如果基因治疗能够彻底根除乙肝，大家能够接受多少？

StephenW

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"我不排斥RNAi对于基因治疗，但是RNAi至今很难找到很成功的案例罢了，我指的是病人，而在HBV上 RNAi没有K因子的powerful能力，所以我忽略了RNAi的基因治疗。" - same conclusion applies to Gene therapy. It is very hard to understand your method without knowing what K因子 is. You have assumed that your k-protein has all the desirable properties that you wish for, together with good k-gene delivery and regulation systems, but is it feasible in a reasonable time frame?

Interferon is part of our innate immune system, it directly suppresses viral replication inside an infected cells, it also signals our adaptive immune system, to kill infected infected cells, thereby clearing the viral infection, at a cost.

Looking forward to hearing more about your k-factor.

走遍四方

感谢楼主专业最前沿的的知识。

lifflefield

走遍四方 发表于 2011-9-26 14:13
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这个药物会不会包含你所指的这个蛋白质呢？

完全不同，我所说的是，干扰素的效应分子，而非这类lamine多肽。当然，如果混合用，说不定疗效更好

走遍四方

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谢谢确认。我们都是外行呀

StephenW

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只有一次侵染，对的。 - how?
释放k，这是没有问题的。- You meaning cleaving your k-gene from your rAAV or something else?
四环素调控，这是最基本的tet on系统，非常简单，学过生物学的都会知道的。
我聚四环素只是一个例子，它很基本，大家都知道，其实我们未必用这么原始的调控方式了。
四环素调控转录起始分 Tet on和off两个系统，我们可以用on，这个系统，也就是存在四环素，转录才发生，k才会存在 - Does it work as perfect as you describe in vivo? Sorry, I am only a layman, so you have to be patient with my questions.

lifflefield

StephenW 发表于 2011-9-26 14:17
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"我不排斥RNAi对于基因治疗，但是RNAi至今很难找到很成功的案例罢了，我指的是 ...

Interferon is part of our innate immune system, it directly suppresses viral replication inside an infected cells, it also signals our adaptive immune system, to kill infected infected cells, thereby clearing the viral infection, at a cost. －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 没错，你所说的是细胞因子引起的adapative immunity，而我所说的是innate immunity，想比你应该知道细胞内有组织病毒复制的因子吧，包括识别和降解它们DNA或者RNA的分子，我们所做的就是innate，而非adaptive。 不是通过细胞免疫或者抗体免疫杀伤干扰细胞，而是通过细胞自己内部的因子组织病毒生产。 我建议你去看看 APOBEC3G和HIV如何在innate作用的。 Looking forward to hearing more about your k-factor. －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ ok的，等我一段时间，我愿意跟你继续探讨k－factor，怎么识别病毒RNA分子和cccDNA的，这是一个也许全新的host defend system。

StephenW

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APOBEC3G（A3G）是一种阻止HIV复制的蛋白质。这种蛋白质在人类抗病毒的先天免疫中扮演着重要角色。 APOBEC3G作为一种脱氨酶，可以诱导HIV的DNA上的胞嘧啶替换为尿嘧啶， 这就导致完整的前病毒数量减少。慢病毒进化出了一种叫做Vif的基因来消除这种影响， 但鼠及大多数灵长类的A3G却不能被HIV的Vif识别，这是导致HIV不感染其他动物的一个主要原因。 人的APOBEC3G是一种强有力的逆转录病毒抑制剂。A3G是哺乳动物特有的， 但它在不同物种间的差异却很大。
[编辑] 结构APOBEC3G的作用原理是在单链DNA复制的过程中使胞嘧啶脱去氨基变成尿嘧啶，它的基因位于第22号染色体。 A3G含有两个典型的胞嘧啶脱氨酶区，其中的C-端已被确认起着调解胞嘧啶脱氨基的作用。 这两个区都分别含有一个催化区，它们是CD1区和CD2区。利用四聚体APOBEC2（A2）蛋白的晶体， 可以推断A3G上的残基存在着电势来调解蛋白质的齐聚反应。 在胞嘧啶脱氨酶区不活跃的N-端上，由酪氨酸-124和色氨酸-127调解着A3G的齐聚反应， 这使得它可以被包装进HIV-1的病毒颗粒中。 A3G在A2模板结构上的同源建模说明它通过二聚体界面形成了一个正电荷堆积的区域。 这个正电荷区域促进了A3G的齐聚反应和提高了它的抗病毒能力。

"ok的，等我一段时间，我愿意跟你继续探讨k－factor，怎么识别病毒RNA分子和cccDNA的，这是一个也许全新的host defend system。" - thanks

lifflefield

StephenW 发表于 2011-9-26 14:25
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只有一次侵染，对的。 - how?

1.请google  tet on and tet off 很多回答的。2.只有一次侵染，对的。 - how?
－－－－－－－－－－－－－－－－－－
因为改造过的rAAV并非真病毒，rAAV需要完整病毒蛋白而继续复制自己，我们破坏了它的蛋白质，只让它表达我们要的因子，
它就像一个载体，可以发挥第一次的侵染，之后，它不断生产k因子，被我们所利用和剥削。 所以，没有病毒周期，只有一次侵染。

3.释放k，这是没有问题的。- You meaning cleaving your k-gene from your rAAV or something else?
－－－－－－－－－
我所说的释放，其实应该是指rAAV病毒，误认为k是自己的基因，开始转录并翻译成K因子，请明白k是细胞内自己翻译的，我们转进去的是携带改造过的k基因的rAAV病毒，就像乙肝病毒利用细胞不断生产自己的蛋白一样，rAAV也是利用细胞生产我们要的k，而k就能去识别乙肝病毒，而不需要干扰素给予信号。

4.Does it work as perfect as you describe in vivo
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你指的是四环素激活？？ 我只是比喻这个调控，如果要在vivo，就是体内做的话，不能用四环素，要构建更加的诱导系统，
比如给老鼠喂食，激活转进去的基因，是非常常用的方法。 四环素如果构建进入人体，副作用应该很大，不应该尝试，而应该寻找更好的激活系统，这都是以后需要工作流程。

lifflefield

StephenW 发表于 2011-9-26 14:36
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APOBEC3G（A3G）是一种阻止HIV复制的蛋白质。这种蛋白质在人类抗病毒的先天免疫 ...

APOBEC3G同样超级强力的组织HBV复制，效果等于现在市面上的药物。 我们每个人肝脏细胞内，都有定量的APOBEC3G，而且它也会上调在干扰素的刺激下。
但是，APOBEC3G，不能减少HBV cccDNA和RNA，这两点只有K因子能够做到。
你也许会问为什么不用rAAV带入A3G呢，因为药物已经达到了它的效果，而且A3G太大，500氨基酸左右，rAAV不太适合携带。

StephenW

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"不能减少HBV cccDNA和RNA，这两点只有K因子能够做到。
你也许会问为什么不用rAAV带入A3G呢，因为药物已经达到了它的效果，而且A3G太大，500氨基酸左右，rAAV不太适合携带。"

Surely, once you can "destroy" cccDNA, there is no need to reduce RNA, no cccDNA, no RNA. rAAV, recombinant AAV, can come in many shapes and forms. Of course, we look forward to hearing how your k-factor will "destroy" the cccDNA inside the nucleus.