悬赏：抗乙肝药物对cccDNA抑制作用的文章

wxuoke

StephenW

springa 发表于 2011-5-5 21:50
核苷类似物,如果不是当作一个药物来看待的话,倒是很乐意把它当作构造的一个特殊的环境,这个复制环境对病毒 ...

"cccDNA的稳定性肯定超出我们的想象，病毒的目的很明确，他的目的不是要杀死宿主，对宿主的损伤时他目的的副作用，他的目的是生存，"

1.因此，当年轻时
免疫耐受 - 不要杀死宿主.
2.母宿主传播病毒到婴儿.
3. 母宿主免疫清除, 母宿主可以照顾婴儿，婴儿宿主生存, 病毒生存.
4. 以后, 病毒对母宿主没有兴趣.
有道理??

zlj1982

嘿嘿，不懂进来看看

lin12345

lifevendor

[size=1.3em]我最近也在看cccDNA相关的东西。
个人认为如果可以从基因表达上面控制cccDNA的转译，找到cccDNA转译的动力在哪会比较有意义。比如说表观遗传方面，组蛋白的修饰，DNA的修饰。为什么有的人可以自动转阴，如果其中有免疫清除的话，应该还有cccDNA的长期转译的抑制。靶向专一性高的cccDNA 转译的抑制，可以通过几个方面来实现，RNAi，不知道大家对riboswitch了解不？riboswitch是一种低等生物的基因调控机制。我觉得病毒在这里应该也属于低等生物，病毒的表达并不是更具需求来的，比如说人的血糖过高，导致更多的胰岛素的表达，但是 如果人体内HbsAg很多，并不能抑制cccDNA的转译。也不能抑制HBV mRNA的表达。对这些低等生物的基因控制，应该考虑一些更简单，快速的方式。

cccDNA 仅提供模板用于转译，它自己不复制！而且cccDNA不能整合到人的基因组。（母系可以阻断成功）
长期的抗病毒可以减少cccDNA，但是病毒变异后怎么办？

我觉得cccDNA的消除会比较难，但是cccDNA转译的控制自然界应该有一种药物可以控制，但是我们还没有发现。通过长期压制cccDNA的转译，达到清除病毒可以实现。而且控制cccDNA的转译要从HBV病毒本身的mRNA结构来思考。

lifevendor

Hepatitis B virus replication is regulated by the acetylation status of hepatitis B virus cccDNA-bound H3 and H4 histones.AbstractBACKGROUND & AIMS:

HBV covalently closed circular DNA (cccDNA), the replicative intermediate responsible for persistent HBV infection of hepatocytes, is the template for transcription of all viral mRNAs. Nuclear cccDNA accumulates as a stable episome organized into minichromosomes by histone and nonhistone proteins. In this study we investigated, by a newly developed sensitive and specific assay, the relationship between viral replication and HBV chromatin assembly, transcription, and interaction with viral and cellular regulatory proteins.

METHODS:

To achieve this aim we coupled a quantitative chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique to an established method that allows the amplification of virion-encapsidated HBV genomes after transfection of linear HBV DNA into human hepatoma HuH7 cells. The cccDNA-ChIP technique was also applied to study HBV minichromosome transcriptional regulation in liver tissue from HBV-infected patients.

RESULTS:

The use of anti-acetyl-H4/-H3 specific antibodies to immunoprecipitate transcriptionally active chromatin revealed that HBV replication is regulated by the acetylation status of the cccDNA-bound H3/H4 histones. Class I histone deacetylases inhibitors induced an evident increase of both cccDNA-bound acetylated H4 and HBV replication. Finally, histones hypoacetylation and histone deacetylase 1 recruitment onto the cccDNA in liver tissue correlated with low HBV viremia in hepatitis B patients.

CONCLUSIONS:

We developed a ChIP-based assay to analyze, in vitro and ex vivo, the transcriptional regulation of HBV cccDNA minichromosome. Our results provide new insights on the regulation of HBV replication and identify the enzymatic activities that modulate the acetylation of cccDNA-bound histones as new therapeutic targets for anti-HBV drugs.

lifevendor

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大家有没有相关的抑制cccDNA表达的文章。

StephenW

lifevendor 发表于 2011-5-12 17:03
我最近也在看cccDNA相关的东西。
个人认为如果可以从基因表达上面控制cccDNA的转译，找到cccDNA转译的动力 ...

[springa]
??在我国，慢性HBV感染很难清除，有三个原因：1、如上所述，cccDNA很难消亡。2、我国病人多位婴幼儿时期感染，在长期慢性携带后发病，都有不同程度的免疫耐受性，因此和西方病人相比，我国病人的血清抗体转换率低，复发率高。3、部分病人，HBV DNA早期整合到感染肝细胞的细胞核染色体中，成为肝细胞染色体的组成成分，此后随着肝细胞染色体的复制、分裂而复制、分裂，不能清除。
以上是摘自骆抗先教授的文章，cccDNA很难消亡应该是指慢性乙肝病人而言，但成人感染乙肝确实有90%自愈。非溶细胞机制抗病毒作用当然不能排除：哪位战友能将急性乙肝的自愈做一个解释？是否涉及cccDNA的出现与消失？我想会对最终治疗慢性乙肝起到一定作用。

这是您的帖子:
"cccDNA 仅提供模板用于转译，它自己不复制！而且cccDNA不能整合到人的基因组。（母系可以阻断成功）"
"母系可以阻断成功" - 这是不正确的解释, 因为cccDNA整合到感染肝细胞的基因组, 不是在卵细胞的基因组.

"它自己不复制"  v "HBV DNA早期整合到感染肝细胞的细胞核染色体中，成为肝细胞染色体的组成成分，此后随着肝细胞染色体的复制、分裂而复制、分裂" - 谁是正确的?

lifevendor

StephenW 发表于 2011-5-12 18:19
[springa]
??在我国，慢性HBV感染很难清除，有三个原因：1、如上所述，cccDNA很难消亡。2、我国病人多位婴 ...

[size=1.75em]Hepatitis B viruses: Reverse transcription a different way
[size=1.75em]Michael Nassal 谁能查一下这篇论文。

StephenW

lifevendor 发表于 2011-5-12 18:32
Hepatitis B viruses: Reverse transcription a different way
Michael Nassal 谁能查一下这篇论文。

[url=]Virus Res.[/url] 2008 Jun;134(1-2):235-49. Epub  2008 Mar 12.
Hepatitis B viruses: reverse transcription a different way.Nassal M.
SourceUniversity Hospital Freiburg, Internal Medicine 2/Molecular Biology, Hugstetter Str. 55, D-79106 Freiburg, Germany. [email protected]

AbstractHepatitis B virus (HBV), the causative agent of B-type hepatitis in humans, is the type member of the Hepadnaviridae, hepatotropic DNA viruses that replicate via reverse transcription. Beyond long-established differences to retroviruses in gene expression and overall replication strategy newer work has uncovered additional distinctions in the mechanism of reverse transcription per se. These include protein-priming by the unique extra terminal protein domain of the reverse transcriptase (RT) utilizing an RNA hairpin for de novo initiation of first strand DNA synthesis, and the strict dependence of this process on cellular chaperones. Recent in vitro reconstitution systems enabled first biochemical insights into this multifactorial reaction, complemented by high resolution structural information on the RNA, though not yet the protein, level. Genetic approaches have revealed long-distance interactions in the nucleic acid templates as an important factor enabling the puzzling template switches required to produce the relaxed circular (RC) DNA found in infectious virions. Finally, the failure of even potent HBV RT inhibitors to eliminate nuclear covalently closed circular (ccc) DNA, the functional equivalent of integrated proviral DNA, has spurred a renewed interest in the  mechanism of cccDNA generation. These new developments are in the focus of this review.
B型肝炎病毒：反转录以不同的方式。
Nassal米
来源

弗赖堡大学医院，内科2/Molecular生物学Hugstetter海峡。 55个D - 79106 Freiburg，德国。 [email protected]
摘要
乙型肝炎病毒（HBV），对B型肝炎的病原体在人类身上，是Hepadnaviridae，嗜肝DNA病毒的复制通过逆转录类型的成员。除了历史悠久的差异表达基因的复制策略和整体更新工作，以反转录病毒已发现的反转录机制的补充本身的区别。这些措施包括蛋白质以独特的额外终端的利用逆转录酶的蛋白质结构域的一个从头开始的第一链DNA合成的RNA发夹（RT）的，而这个过程严格依赖细胞伴侣启动。体外重组系统最近启用了这个多因素的反应高分辨率对RNA的结构信息的补充，第一生化的见解，但还不是蛋白质的水平。遗传方法揭示了核酸长途互动作为一项重要的令人费解的模板使开关须出示轻松通函（局）发现DNA的传染性病毒颗粒因素模板。最后，甚至有力的乙肝病毒逆转录酶抑制剂未能消除核共价闭合环状（CCC认证）的DNA，综合功能相当于前病毒DNA，促使中的cccDNA的产生机理的新兴趣。这些新的事态发展在本次审查的重点。