单克隆抗体

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重发原文,多谢百度! http://www.hbvhbv.com/forum/viewthread.php?tid=421608

http://tech.sina.com.cn/other/2004-07-07/0957384286.shtml

http://www.pep.com.cn/200406/ca456166.htm

单克隆抗体的应用

陈丽珊

1975年Kohler和Milstein首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠的脾细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，并由此创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株，获得了抗SRBC的单克隆抗体。这是免疫学，乃至医学史上的一个里程碑。

单克隆抗体的特点是：理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制，并且来源容易。这些优点使它一问世就受到高度重视，并广泛应用于生物学和医学研究领域。

1 作为亲合层析的配体

单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合，因而能够从复杂系统中识别出单个成分。只要得到针对某一成分的单克隆抗体，利用它作为配体，固定在层析柱上，通过亲合层析，即可从复杂的混和物中分离、纯化这一特定成分。如用抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)亲合层析柱，就可从孕妇尿中提取到纯的hCG。与其它提取方法(沉淀法、高效疏水色谱法等)相比，具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。

2 作为生物治疗的导向武器

脂质体是由既亲水又亲油的两亲磷脂组成的连续双分子层微囊，内含水相空间，可包裹水溶性物质。包有细胞毒剂的脂质体膜上偶联抗体，可定向攻击靶细胞，称为免疫脂质体。这种“导向治疗”，在动物试验与体外试验中已获得满意效果。如热敏免疫脂质体，由抗人乳癌细胞抗体经疏水长链脂肪酸修饰，抗体带上长的疏水碳链，部分插入脂质体的脂双层膜中，抗体Fab段仍暴露在膜表面，因而保持了抗体活性。热敏免疫脂质体可特异识别靶细胞(人乳癌细胞)，并通过相变温度引起脂质体破裂，从而定向释放药物。另外，可将化疗药物、细菌毒素、植物毒素或放射性同位素等细胞毒剂与抗肿瘤抗原的单克隆抗体直接交联，利用其导向作用，使细胞毒剂定位于肿瘤细胞把它直接杀伤。这不仅提高了抗体的疗效，也可降低细胞毒剂对正常细胞的毒性反应。如应用抗T细胞单抗和柔红霉素结合物，在体外对非T淋巴细胞就无杀伤作用。但是，要把这种方法应用于临床，目前还存在不少技术难关，包括人体对鼠源单抗的排异问题等。

3 作为免疫抑制剂

抗人T淋巴细胞单抗(McAb)作为一种新型免疫抑制剂，已广泛应用于临床治疗自身免疫疾病和抗器官移植的排斥反应。其作用机理有赖于McAb的种类及其免疫学特性。注射抗小鼠Thy-1抗原的单抗，可以抑制小鼠同种皮肤移植的排斥反应。此外，对用于同种骨髓移植的供体骨髓，在体外经抗T细胞单抗加补体处理，能减轻移植物抗宿主病的发生。

4 作为研究工作中的探针

单克隆抗体只与抗原分子上某一个表位(即抗原决定簇)相结合，利用这一特性就可把它作为研究工作中的探针。此时，可以从分子、细胞和器官的不同水平上，研究抗原物质的结构与功能的关系，进而并可从理论上阐明其机理。如用荧光物质标记单抗作为探针，能方便地确定与其结合的相应生物大分子(蛋白质、核酸、酶等)在细胞中的位置和分布。

5 增强抗原的免疫原性

抗体对抗原免疫原性的增强作用由来已久，60年代就已发现幼猪对破伤风类毒素难以产生抗体，注射相应特异性抗体IgG，就能有效地提高对委内瑞拉马脑炎病毒的免疫应答。1984年以来，Celis等发现，抗乙肝病毒(HBs)IgG可增强HBs抗原对特异性人T细胞克隆的刺激增殖，并可诱生干扰素。在小鼠中发现，当低剂量的HBs抗原不产生免疫反应时，加入抗HBs抗体组成的复合物，则可有效地诱生免疫反应。根据这一作用，现已研制出乙肝的抗原—抗体复合物型治疗性疫苗。

6 作为医学检验试剂

单克隆抗体作为医学检验试剂，更能充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强，大大提高了抗原—抗体反应的特异性，减少了和其它物质发生交叉反应的可能性，使试验结果可信度更大。单抗的均一性和生物活性的单一性，使抗原—抗体区应结果便于控制，利于标准化和规范化。目前已有许多检验试剂盒用单抗制成，其主要用途如下：

(1)诊断各类病原体

这是单抗应用最多的领域，已有大量诊断试剂商品供选择。如用于诊断乙肝病毒、丙肝病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒和各种微生物、寄生虫感染的试剂等。单抗所具有的灵敏度高、特异性好的特点，使其在鉴别菌种的型及亚型、病毒变异株，以及寄生虫不同生活周期的抗原性等方面更具独特优势。

(2)肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原的检测

用于肿瘤的诊断、分型及定位。尽管目前尚未制备出肿瘤特异性抗原的单抗，但对肿瘤相关抗原(如甲胎蛋白、肿瘤碱性蛋白和癌胚抗原)的单抗早就用于临床检验。

随着淋巴细胞杂交瘤技术的应用，许多抗人肿瘤标记物的杂交瘤细胞株已经建立，这为肿瘤的早期诊断及其阐明肿瘤的发生、发展，了解肿瘤细胞的生物学活性及其定量研究奠定了基础。用抗肿瘤单抗检查病理标本，可协助确定转移肿瘤的原发部位。以放射性核素标记单抗可用于体内诊断，再结合X-线断层扫描技术，可对肿瘤的大小及其转移灶作出定量诊断。

(3)检测淋巴细胞表面标志

用于区分细胞亚群和细胞的分化阶段。例如检测CD系列标志，有利于了解细胞的分化和T细胞亚群的数量和质量变化，这对多种疾病诊断具有参考意义。细胞表面抗原的检测，将对白血病患者的疾病分期、治疗效果、预后判断等方面有指导作用。组织相容性抗原检测是移植免疫学的重要内容，应用单抗对其进行位点检测可得到更可信的结果。

(4)机体微量成分的测定

应用单抗结合其它技术，可对机体的多种微量成分进行测定。如放射免疫分析，即是利用了同位素的灵敏性和抗原-抗体反应的特异性而建立起来的方法，它可以测至10-9～10-12g，使原来难以测定的激素能够进行定量分析。除了激素，还可检测诸多酶类、维生素、药物和其它生化物质。这对受检者健康状态判断、疾病检出、指导诊断和临床治疗均具有实际意义。

综上所述，单克隆抗体在理论和实践上的应用成为解决生物学和医学等许多重大问题的重要手段。但是，上述应用的单抗属于鼠源性，用于人类疾病的预防和治疗时会产生异种蛋白变态反应，大大限制了其临床应用价值。而且，鼠源性抗体在人体内半衰期缩短，生物活性降低。因此，人们一直致力于人源性抗体的研究，如用人脾细胞与鼠骨髓瘤细胞杂交；用EB病毒转化人的B淋巴细胞；用基因工程法制备嵌合抗体等。但都遇到相当的困难。以分子生物学技术提取、扩增编码人抗体的DNA，构建质粒，建立组合抗体文库，再利用供者文库建立针对某一特定抗原的子文库是近年来形成的最新方法。以该技术制备的抗体片段(Fab)是人源抗体，具有建库简单、抗体表达稳定等特点。迄今已有多种抗体产生。可以预见，该技术具有良好的发展和应用前景。

自生物学教学，1998年第11期

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成都华神生物技术有限责任公司 www.hoist.com.cn

碘[131I]美妥昔单抗

关于国家一类新药碘[131I]美妥昔单抗注射液产品上市延后的说明 作者：董事会办公室  来源：华神生物董事会办公室  2006-7-28 9:50:18

一、关于碘[131I]美妥昔单抗注射液未安预计时间获得生产批文的原因及上市时间     由于碘[131I]美妥昔单抗注射液产品为非常特殊的国家一类新药，涉及生物制品和放射性药物两类药政管理最严格的类别。加之2005年9月14日正式颁布了经国务院第104次常务会议通过的《放射性同位素与射线装置安全和防护条例》，以规范和完善了放射性药品的生产、储存和使用。根据新《条例》和国家食品药品监督管理局的要求，公司对原生产工艺及上报材料进行了完善、调整和补充；原生产工艺所生产的碘[131I]美妥昔单抗注射液成品有效期只有24小时，这对该药品的产业化提出了苛刻的条件，为此公司组织技术攻关，把规模标记后成品的有效期从24小时提升到了48小时。鉴于上述原因，延迟了药品生产注册批件的申报时间。     截止目前，相关工艺研究工作已经顺利完成，产品试生产进展顺利，公司已正式向国家药品监督管理部门提出生产批件的申请。     由于该产品的上市销售，尚需通过GMP验收，因此，确切上市时间得待获得国家药政管理部门的生产批文后才能做出具体评估。该药的上市也是凝聚着全体华神人在生物制药领域的追求和希望，我们定将竭尽全力，促使该药尽快上市，以回报广大投资人的对公司成长的关注。 二、该药不存在失败的可能 (一)该药是经过国家新药评审部门严格评审的国家一类新药，并已经获得新药证书。 (二)经过本公司近一年的努力，该产品的规模化生产工艺，特别是规模化批量标记工艺的研究成功，使核素标记后成品的有效期从24小时提升到了48小时，以及单抗试生产的顺利进行，该国家一类新药的规模化生产技术和工艺水平已经得到进一步的提升和完善，因此，该产品的产业化不仅不存在失败的可能，而且市场前景将更加广阔。 利卡汀——碘[131I]美妥昔单抗注射液及皮试制剂喜获药品生产批件 来源：华神生物  2006-11-16 17:36:32             2006年10月12日，经国家食品药品监督管理局批准，成都华神生物技术有限责任公司备受社会关注的治疗原发性肝癌国家一类新药利卡汀——碘[131I]美妥昔单抗注射液及皮试制剂成功获得药品生产批件，其药品批准文号分别为国药准字S20060064和国药准字S20060065，注册分类为治疗用生物制品。                           该药品生产批件的获得，标志着利卡汀——碘[131I]美妥昔单抗注射液项目正式可以进入生产阶段，对促进我国自主创新的生物技术药物产业化进程，改善在高端生物医药领域长期受制于西方发达国家的不利局面，将产生重大作用。

利卡汀是全球第一个特异性针对肝癌的单抗药物，副作用大大小于通常的化疗药物。该药将放射性核素碘-131 有选择性和针对性地带到肝癌部位，利用其发出的射线有效杀死癌细胞，但全身其它器官无放射性药物的蓄积，堪称国内首个名符其实的“肝癌导向核弹药物”。

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2004L03747

自体肝癌细胞及脾B淋巴细胞融合瘤苗 临床进行中

上海中信国健药业

www.cpgj-pharm.com

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陕西九州科技股份有限公司

抗乙肝病毒人单克隆抗体靶向制剂 研发完成-寻求企业合作中

http://www.cnjzgroup.com/readnew.asp?news_id=200

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http://news.xinhuanet.com/health/2006-11/21/content_5358694.htm

我国科学家发现一种促肝癌新基因

新华网上海１１月２１日电（记者仇逸）国家人类基因组南方研究中心专家日前在研究中发现，人类印迹基因ＤＬＫ１在肝癌组织中表达明显上调，对肝癌的形成起到重要作用。

    肝癌的发生常常与细胞的胚胎化有关。研究首先发现ＤＬＫ１基因在胚胎肝脏中高表达，同时也在肝脏干祖细胞上表达，却不存在于正常健康的肝脏中。８２例肝癌样本检测发现，ＤＬＫ１基因在７３.２％的肝癌样本中表达明显上升，由此推论肝癌可能起源于肝脏干祖细胞。

    研究发现ＤＬＫ１基因的表达对原发性肝癌具有特异性。科研人员通过另外８８例原发性肝癌样本检测发现，ＤＬＫ１基因与目前临床常用的肝癌早期诊断指标甲胎蛋白在病理诊断上能形成互补，联合检测ＤＬＫ１基因和甲胎蛋白可以将肝癌的诊断率提高２５％以上，提示ＤＬＫ１基因可能发展为新的肝癌诊断指标。目前，研究人员正利用ＤＬＫ１单克隆抗体建立诊断肝癌的血清学方法，联合甲胎蛋白检测法，以期更方便准确地诊断肝癌。

    另外，科研人员还发现，降低ＤＬＫ１基因表达水平能明显抑制肝癌细胞的增殖。动物实验表明，ＤＬＫ１基因表达水平被降低后，肝癌细胞的成瘤能力明显降低，甚至消失，说明ＤＬＫ１基因可能是非常有效的肝癌治疗新靶点，为开发药物治疗肝癌奠定了理论基础。

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上海梅山生物技术有限责任公司

http://www.meishanshengwu.biz.sh.cn

神農氏醫藥股份有限公司(中科生龍達集團香港子公司)

http://www.hk-st.com/product.html

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http://www.blogcn.com/user23/gencelltech/index.html

抗体药物现状与产业发展前景

抗体系指机体在抗原性物质的刺激下所产生的一种免疫球蛋白(主要由淋巴细胞所产生)，因其能与细菌、病毒或毒素等异源性物质结合而发挥预防、治疗疾病作用。近年，抗体类药物以其高特异性、有效性和安全性正在发展成为国际药品市场上一大类新型诊断和治疗剂。 

1. 抗体药物的发展历程 
抗体作为药物用于人类疾病的治疗拥有很长历史。但整个抗体药物的发展却并非一帆风顺，而是在曲折中前进（图1）。第一代抗体药物源于动物多价抗血清，主要用于一些细菌感染性疾病的早期被动免疫治疗。虽然具有一定的疗效，但异源性蛋白引起的较强的人体免疫反应限制了这类药物的应用，因而逐渐被抗生素类药物所代替。 
第二代抗体药物是利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物。单克隆抗体由于具有良好的均一性和高度的特异性，因而在实验研究和疾病诊断中得到了广泛应用。单抗最早被用于疾病治疗是在1982年，美国斯坦福医学中心Levy等人利用制备的抗独特型单抗治疗B细胞淋巴瘤，治疗后患者病情缓解，瘤体消失，这使人们对抗体药物产生了极大的期望。1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物——抗CD3单抗OKT3进入市场，用于器官移植时的抗排斥反应。此时抗体药物的研制和应用达到了顶点。随着使用单抗进行治疗的病例数的增加，鼠单抗用于人体的毒副作用也越来越明显。同时一些抗肿瘤单抗未显示出理想效果。人们的热情开始下降。到20世纪90年代初，抗内毒素单抗用于治疗脓毒败血症失败使得抗体药物的研究进入低谷。由于大多数单抗均为鼠源性，在人体内反复应用会引起人抗鼠抗体（HAMA）反应，从而降低疗效，甚至可引起过敏反应。因此，一方面在给药途径上改进，如使用片段抗体、交联同位素、局部用药等使鼠源性抗体用量减少，也增强了疗效；另一方面，积极发展基因工程抗体和人源抗体。 
近年来，随着免疫学和分子生物学技术的发展以及抗体基因结构的阐明，DNA重组技术开始用于抗体的改造，人们可以根据需要对以往的鼠抗体进行相应的改造以消除抗体应用不利性状或增加新的生物学功能，还可用新的技术重新制备各种形式的重组抗体。抗体药物的研发进入了第三代，即基因工程抗体时代。与第二代单抗相比，基因工程抗体具有如下优点：①通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应；②基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位；③根据治疗的需要，制备新型抗体；④可以采用原核细胞、真核细胞和植物等多种表达形式，大量表达抗体分子，大大降低了生产成本。 
自从1984年第一个基因工程抗体人－鼠嵌合抗体诞生以来，新型基因工程抗体不断出现，如人源化抗体、单价小分子抗体（Fab、单链抗体、单域抗体、超变区多肽等）、多价小分子抗体（双链抗体，三链抗体，微型抗体）、某些特殊类型抗体（双特异抗体、抗原化抗体、细胞内抗体、催化抗体、免疫脂质体）及抗体融合蛋白（免疫毒素、免疫粘连素）等。另外，用于制备新型抗体的噬菌体抗体库技术成为继杂交瘤技术之后生命科学研究中又一突破性进展。采用噬菌体抗体库技术筛选抗体不必进行动物免疫，易于制备稀有抗原的抗体、筛选全人源性抗体和高亲和力抗体。同时也将抗体工程的研究推向了一个新的高潮。在噬菌体抗体库基础上，近几年又发展了核糖体展示抗体库技术。利用核糖体展示技术筛选抗体的整个过程均在体外进行，不经过大肠杆菌转化的步骤，因此可以构建高容量、高质量的抗体库，更易于筛选高亲和力抗体和采用体外进化的方法对抗体性质进行改造。核糖体展示抗体库技术代表了抗体工程的未来发展趋势。各种形式基因工程抗体的成功制备和应用将抗体药物的研制带入一个快速发展的新时期。到目前为止，美国FDA已经批准了16个抗体治疗药物，其中12个均为基因工程抗体(见表1)。 

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图1.治疗性抗体发展历程和事件 
1.单克隆抗体-杂交瘤技术宣告诞生 2. 应用抗体治疗淋巴瘤取得成功 
3. OKT3单抗被美国FDA批准上市 4. 单抗用于肿瘤治疗效果不佳 
5. 抗内毒素单抗试用于治疗败血症性休克失败  6. 抗17-1A和ReoPro上市 
7. FDA批准21个治疗性单抗上市 
表1. 美国FDA批准的抗体药物 
（Therapeutic monoclonal antibodies approved by the US FDA） 
学名 
（Generic name） 商品名 
（Trade name） 生产厂家 
（Sponsor company） 抗体类型（Type） 批准日期(Approval date) 
Muromonab-CD3 Orthoclone Ortho Biotech 鼠源（Murine） 1986 
Murine Mab(B72.3) OncoScint CYTOGEN 鼠源（Murine） 1992 
Abciximab ReoPro Centocor 嵌合（Chimeric） 1994 
MurineMAb(PMSA) rostaScint CYTOGEN 鼠源（Murine） 1996 
Murine Fab´ fragment (Anti-CEA) CEA-Scan Immunomedics 鼠源（Murine） 1996 
T99 nofetumo mab merpentan Murine MAb Verluma DuPont Merck 鼠源（Murine） 1996 
Rituximab Rituxan Genentech 嵌合（Chimeric） 1997 
Daclizumab Zenapax Hoffman-La Roche 人源化（Humanized） 1997 
Basiliximab Simulect Novartis 嵌合（Chimeric） 1998 
Palivizumab Synagis Medlmmune 人源化（Humanized） 1998 
Infliximab Remicade Centocor 嵌合（Chimeric） 1998 
Trastuzumab Herceptin Genentech 人源化（Humanized） 1998 
Gemtuzumab Mylotarg Wyeth-Ayerst 人源化（Humanized） 2000 
Alemtuzumab Campath Millennium/ILEX 人源化（Humanized） 2001 
90Y-Ibritumomab Zevalin IDEC 鼠源（Murine） 2002 
Infliximab Remicade Centocor 嵌合（Chimeric） 2002 
Adalimumab Humira Abbot Laboratories 人源化（Humanized） 2002 
LFA-3/IgG1              LFA-3 mAb Biogen 人源化（Humanized） 2003 
Tositumomab and Iodine I 131Tositumomab Bexxar Corixa 鼠源（Murine） 2003 
omalizumab Xolair Novartis 人源化（Humanized） 2003 
cetuximab Erbitux Imclone  嵌合（Chimeric） 2004 
bevacizumab Avastin Genentech 
人源化（Humanized） 2004 

2. 抗体药物的应用进展 
抗体分子是生物学和医学领域用途最为广泛的蛋白分子。以肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原、抗体独特型决定簇、细胞因子及其受体、激素及一些癌基因产物等作为靶分子，利用传统的免疫方法或通过细胞工程、基因工程等技术制备的多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体广泛应用在疾病诊断、治疗及科学研究等领域。根据美国药物研究和生产者协会（PhRMA）的调查报告，目前正在进行开发和已经投入市场的抗体药物主要有以下几种用途：1．器官移植排斥反应的逆转；2．肿瘤免疫诊断；3．肿瘤免疫显像；4．肿瘤导向治疗；5．哮喘、牛皮癣、类风湿性关节炎、红斑狼疮、急性心梗、脓毒症、多发性硬化症及其他自身免疫性疾病；6．抗独特型抗体作为分子瘤苗治疗肿瘤；7．多功能抗体（双特异抗体、三特异抗体、抗体细胞因子融合蛋白、抗体酶等）的特殊用途。 
癌症是威胁人类健康的主要疾病之一，预防和治疗癌症也是研究和开发抗体药物的主要目标之一。最初抗体主要被用于肿瘤体外免疫诊断和体内免疫显像，随着抗体工程技术的不断进步，近年来人们将更多的目光集中在治疗肿瘤的抗体药物开发上。第一个被美国批准用于人肿瘤治疗的基因工程抗体——Rituxan最初被用于非何杰金氏淋巴瘤，总有效率达60%，现在正在探索用于治疗抗体病相关淋巴瘤和中枢神经系统淋巴瘤。目前在临床中使用的肿瘤治疗药物多数存在“敌我不分”的问题，即在杀死肿瘤细胞的同时，也破坏了人体正常细胞。“生物导弹”为解决这个难题提供了一个理想的思路。“生物导弹”，即将各种毒素、放射性同位素、化疗药物与识别肿瘤特异抗原或肿瘤相关抗原的抗体偶联后，能够特异杀伤肿瘤细胞的一类药物。这种药物经由静脉注入人体内，药效分子集中作用于肿瘤细胞，既增强疗效又减少对机体的毒副作用。放射性同位素与抗体的偶联物在体内能将前者运至药靶部位，并通过其放射性活性杀伤靶细胞，还可通过X射线照相机拍摄核素放射线图像，用于体内治疗和定位诊断。抗体与化疗药物分子的偶联方法一般采用化学法。这些偶联物对结肠癌、肝癌和胃癌等多种肿瘤均有一定的抗癌效应。抗体与生物毒素交联制备的偶联物称为免疫毒素。免疫毒素基于抗体部分对相应抗原的特异识别作用及毒素部分具有的细胞毒作用，对肿瘤细胞具有杀伤效应，是很有潜力的免疫治疗方法。 
抗肿瘤血管生成抗体治疗肿瘤的研究最近也取得了很大的进展。在动物模型中用抗血管生成因子（FGF、VEGF）抗体封闭血管内皮生长因子取得了抑制肿瘤生长的作用，此法仍有待于临床验证；而抗erbB-2癌基因产物抗体——Herceptin作为生物技术药品已经在美国上市，配合化疗用于乳腺癌和卵巢癌的治疗，获得较好疗效。治疗肿瘤的双特异抗体、三特异抗体及抗体细胞因子融合蛋白的研制开发正在各国紧张进行，相信在不久的将来，第一个同类新药将会面市。 
在进行器官移植时，可以采用某些抗体类药物来逆转器官移植引起的排斥反应。如最早批准（1986年）进入美国市场的治疗性抗体类药物——抗CD3单抗即被用于肾、心脏、肝脏移植排斥的逆转。抗体酶是具有酶活性的抗体分子，具有酶的生物催化活性和抗体的高度特异性，是抗体工程技术与现代酶工程技术相结合的产物。由于酶的作用范围非常广泛，所以抗体酶药物具有非常好的发展前景。总之，随着抗体工程技术的不断进步，越来越多的新型抗体分子将被推出。 

3. 国际抗体药物的研究和产业化现状 
21世纪，生物技术将与信息技术一起为全球经济发展提供强大的动力，成为全社会最重要并可能改变未来工业和经济格局的技术。抗体工程技术随着现代生物技术的发展而不断完善，并且是生物技术产业化的主力军，尤其在生物技术制药领域占有重要地位。单克隆抗体由于可精确的攻击靶分子，且具有较少的毒副作用而成为人们期望中的理想药物。经过一段曲折的发展历程之后，于二十世纪九十年代进入了一个新的快速成长期。Pharmaproject的一份统计资料显示，截止2001年为止，全球共有11个抗体药物被批准上市；截至2004年已达22个，其中以人源化和嵌合抗体为主。进入临床研究的共有123件，其中23件已进入Ⅲ期临床或新药申报阶段。而这些药物所用的抗体均以人源化抗体为主，约占39%，其次是完全人源的抗体和鼠源性抗体。具体数据见表2 
表2 全球2001年抗体药物的发展现状 
阶段   来源 嵌合 人源化 人 鼠 其他 合计 
上市 6 9 0 7 0 22 
新药申请 0 1 1 1 0 3 
Ⅲ期 1 8 3 8 0 20 
Ⅱ期 6 27 14 5 8 60 
Ⅰ期 5 11 6 8 10 40 
合计 16 52 24 24 18 134 
1997年和1998年FDA批准了6个抗体药物上市，使抗体药物市场自1998年起快速成长。目前，全球有超过225家公司正在研发临床治疗用单克隆抗体，预估有335个产品正在研发中，其中64%进入临床前研究，临床应用以癌症最多，占50%，自体免疫疾病占18%，感染占13%，心血管疾病占6%，器官移植引起的排斥占5%，其它疾病占8%，2002至2004年又有5个新的抗体药物被批准上市，使抗体产品总数达到16个。2000年销售额达21亿美元。2001年总的销售额已达29亿美元。2002年接近40亿美元，平均年增长率为30%。参见图2和表3。预估2005年将有45个产品上市，达到产品上市的高峰期，到2008年将有近70个产品上市，预估市场销售将达140亿美元。随者临床治疗用单抗大量上市，未来临床治疗用单抗制造的需求也相当可观。 

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图2  抗体药物的销售趋势 
  

表3.上市的治疗用抗体2000年销售概况                           百万美元 
产品名/公司 适应症 上市年代 2000年销售额 
OthoClone/J＆J 
ReoPro/Centocor(J&J) 
Rituxan/IDEC(Genentech) 
Simulect/Novartis 
Remicade/Centocor(J&J) 
Zenapax/Roche(PDL) 
Synagis/MedImmune 
Herceptin/Genentech 
Mylotarg/A.H.P.(Celltech) 治疗肾脏移植引起的急性排斥 
治疗急性冠状动脉症候群 
治疗复发性非何杰金氏淋巴瘤 
治疗肾脏移植引起的排斥 
治疗克隆氏病及风湿性心脏病 
治疗肾脏移植引起的排斥 
预防呼吸道融合细胞病毒感染 
治疗HER2阳性移转性乳癌 
治疗急性骨髓性白血病 1986 
1994 
1997 
1997 
1998&1999 
1997 
1998 
1998 
2000 <5 
418 
512 
30 
370 
20 
427 
276 
20 

但是，单克隆抗体药物的陆续上市也引发了全球生产能力的不足。目前，全球哺乳动物细胞培养能力估计在40～50万升之间，主要控制在Genentech，Boehringer Ingelheim和Lonza Biologics三家公司手中，生产能力已趋饱和。由于许多生物技术公司长期处于临床研究延迟的实验室研究阶段，面对突然间取得的成功估计不足，造成了生产能力的不足。Datamonitor指出，2002年有近160个单克隆抗体产品正在进行临床研究，吸引了制药行业和生物行业的广泛投资，截至2004年已有22个产品上市，超过35个产品进入了Ⅱ期临床研究阶段。2006年，当越来越多产品进入到临床研究后期及上市阶段时，治疗性蛋白的生产能力需要在现有基础上增加5倍，由于生产厂房的建设需要4～5年时间，5亿美元以上的资本投入，到2005年时的生产能力最多也只能增加3.5倍，达到130～140万升，尚无法满足。显而易见，对大多数生物技术公司和生物制药公司来说要自己拥有生产能力是非常困难的，这些公司缺少用于投资生产设施的资金。解决这个难题最有效的办法是与其他合同加工企业或制药公司建立长期的战略合作伙伴关系，这种方式对小型的生物技术公司很有效。通常，他们会在上市拓展阶段寻找合作伙伴，通过合作解决生产加工难题。 
当然，在开发抗体药物产品方面美国凭借其先进的生物工程技术和雄厚的财力与人力资源早已“一骑绝尘”，领先于世界各国。据统计目前世界市场上销售的MAbs产品中大约有90%为美国公司开发上市，而其它国家仅占10%左右，至于第三世界国家所开发生产的MAbs产品在市场上可能不到1%份额。 
单克隆抗体迄今为止主要用于诊断试剂以及治疗药。近几年来，国外在用单抗制作“生物导弹”的技术方面又有重大进展(主要是单抗与抗肿瘤剂的整合技术)。如据国外最新报道，美国已有数家公司在“生物导弹”单克隆抗体/放射性同位素整合技术方面取得了成功，这些公司包括美国ImmunoGen，西雅图市的Genetics和Immunomedics Co.等。可以断言，随着崭新的单克隆抗体“生物导弹”抗癌新制剂在今后几年内的不断上市，必将为众多癌症患者带来福音。另据最新报道，国外已开始利用转基因农作物(如番茄、土豆、香蕉、烟草)生产一系列的抗体产品。如抗麻疹抗体、乙型肝炎抗体、霍乱抗体和流感抗体等等。尤其值得一提的是，这类植物抗体不用提取，可随植物一起进入人体。它们可经受烹调时的高温不被破坏。今后吃一份土豆泥，喝一碗番茄汤即可起到(免疫)防病作用，这将不再是神话或幻想(据了解土豆抗体与番茄抗体正在临床试验阶段)。展望二十一世纪，植物来源的抗体将成为医药市场上一大类全新医药产品，其价格低廉，可为广大低收入病人所接受。

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4. 我国抗体药物的研究和产业化现状 
早在20世纪八十年代初，我国科学家就利用杂交瘤技术成功开展了单克隆抗体的研制工作，截止目前已经获得了一大批针对各种抗原的鼠源性单克隆抗体。这些抗原主要有：(1)细胞表面抗原，如血型抗原、白细胞分化抗原、组织相容性抗原、膜受体等。(2)肿瘤相关抗原，如胃癌、肝癌、大肠癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌、脑胶质瘤、乳腺癌等。(3)病原微生物：如流感病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒等病毒抗原；痢疾杆菌脂多糖，沙门氏菌等细菌抗原；恶性疟原虫、血吸虫等寄生虫抗原；大肠杆菌内毒素、破伤风类毒素等微生物毒原抗原。(4)其它抗原，如细胞因子、酶、血浆原蛋白、免疫球蛋白、补体、激素等。针对上述抗原的鼠单抗大部分被用于实验研究，如抗原分类、鉴定和功能研究、抗原基因克隆、蛋白分离纯化等，有一部分抗体用于检验、疾病诊断、预后判断等，少部分鼠单抗也被用于人类疾病治疗研究。 
1987年，“863”计划生物技术领域将抗体导向药物作为一个专题，开展了针对肝癌、肺癌、胃癌、白血病的导向药物研究。经过十几年的努力，在实验室和动物模型上评价了以鼠抗体为载体的同位素—抗体、药物—抗体和毒素—抗体等导向药物的治疗作用，并逐步从实验室走向临床。如抗T细胞免疫毒素经SFDA批准后用于异基因骨髓移植时清除供体骨髓中成熟T细胞，以预防移植物抗宿主病(GVHD)；99mTc标记人小细胞肺癌单抗2F7的F(ab’)2片段放射免疫诊断试剂盒已经过国家SFDA批准进入临床研究。从20世纪八十年代中期开始，我国的科学家紧跟世界抗体工程研究的最新研究动向，开始了基因工程抗体的研制。首先，开展人-鼠嵌合抗体的研究，成功地获得了抗CD3人-鼠嵌合抗体。以后，又利用CDR区移植的方法获得抗CD3改形抗体（或称重构抗体）。随着基因操作技术的发展和普及，许多实验室成功地获得针对各种抗原，如VEGF、CEA、TNFa等的人-鼠嵌合抗体和各种单链抗体。九十年代后又开始了双特异性抗体和其它小分子抗体的研制，如SZ-51Hu-scuPA双特异性抗体，它兼有抗人活化血小板特性和纤溶酶原激活剂特性的双重功能，成为导向溶栓剂，与单独的uPA进行比较，溶栓效率提高4倍。其它的双功能抗体有抗Her2/neuFab-IL-2，抗Her2/neu-抗CD16等。完成了Diabody和Minibody等小分抗体的研究，如CD20/CD3 Diabody。 
随着基因工程抗体技术的发展，在我国有些实验室开始了噬菌体抗体库的构建。用抗体库技术直接制备人源抗体，例如利用被病原微生物感染的病人外周血细胞制备噬菌体抗体库，用特定抗原进行筛选，获得抗乙肝表面抗原、甲肝病毒的人源抗体。抗体库技术也被用于抗体性能改良。例如：用链替换（Chain Shuffling）方法，以亲本抗体的一条链（轻链）与另一条链（重链）的文库组合，构建抗体库，筛选高亲和力的克隆，再固定重链，用同样方法选择具有高亲和力的轻链。一些特异性好，有应用前景的鼠抗体，利用抗原表位定向选择（epitope guided selection, EGS）方法，以鼠单抗可变区为模板，经噬菌体展示技术，通过抗原导向，筛选能够模拟鼠单抗可变区，结合相同抗原决定簇的人抗体，经这一方法获得人源抗体。国内也有实验室采用计算机辅助设计下，将鼠抗体表面氨基酸残基“人源化”，主要将鼠Fv段表面暴露的骨架区残基中与人Fv不同者改为人源性，使Fv的表面人源化，但仍保留其与抗原结合的特性。 
目前，我国已批准的诊断性单抗有31个，已有7个治疗性单抗产品获准在我国上市应用。其中5个为国外进口产品。分别是：鼠源性抗人T淋巴细胞CD3单抗——莫罗莫那-CD3 (Muromonab-CD3)，是最早从国外引进的单抗，用于抑制排斥反应。罗氏（Roche）公司的利妥昔单抗注射液（Rituximab），用于治疗非何杰金淋巴瘤，和曲妥珠单抗Herceptin3 (Trastuzumab)，用于治疗乳腺癌。诺华制药的巴利昔单抗注射液，用于临床各种器官移植的抗排斥治疗，尤其在对肾移植后急性排斥反应的治疗。3个批准上市的治疗性抗体药物为我国自行开发的单抗。分别是：武汉生物制品研究所抗肾移植单抗OKT3（注射用鼠源性抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体），也是最早批准上市的国内自行研制的抗体，具有免疫抑制作用，可逆转对移植器官的排斥反应；东莞宏远逸士生物技术药业有限公司的抗人IL-8单克隆抗体乳膏，用于牛皮癣的治疗；上海美恩生物技术有限公司开发的碘［131I］人鼠嵌合型肿瘤细胞核单克隆抗体注射液（131I-chTNT），用于多种实体瘤，该药物为国家Ⅰ类新药，它的批准上市标志着我国抗体药物的研究已经进入全新发展阶段。现在有7个治疗性产品处在临床研究阶段，包括：济南天康生物制品有限公司的注射用鼠抗人T淋巴细胞CD3表面抗原单克隆抗体，用于抗移植排斥；武汉生物制品所与第四军医大学合作研制的注射用抗肾病综合症出血热病毒单克隆抗体（I型），用于出血热的治疗；第四军医大学细胞工程研究中心研制的国家Ⅰ类新药碘［131I］肝癌片段抗体注射液，用于原发性肝癌的靶向治疗，已完成临床研究，临床有效率（CR+PR+MR）为27.40%，临床获益率(CR+PR+MR+SD)达86.30%，21个月的生存率为44.54%，适用于各期肝癌的治疗，有望2004年上市。该抗体药物的中试生产下游工艺经不断优化，通过使用SREAMLINE扩张柱床吸附技术再配合疏水层析，取得了比传统工艺更为理想的结果；北京百泰生物药业公司的人源化单克隆抗体药物H-R3也已经进入Ⅱ期临床，有望于明年投产，该产品具有大批量发酵和规模生产的特点。H-R3是继用于治疗结肠癌淋巴转移患者的PANOREX和用于治疗转移性乳腺癌的HERCTPTIN之后，又一个面世的单克隆抗体实体瘤治疗药物，比美国的同类药物Erbitux人源化程度更高；中科院细胞所的抗人肝癌单抗、北京生物制品所与第四军医大学合作研制的抗乙型脑炎单抗和最近新批准的注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白也进入了临床研究阶段。另外，多个抗体药物正处于临床前研究阶段，其中包括：抗CEA嵌合抗体（北京赛科药业），用于治疗结肠癌；抗破伤风抗体（军事医学科学院），用于预防破伤风；抗FabC1027（医科院医生所），用于治疗肝癌。（见表4）