在基于免疫刺激的完整酵母细胞的治疗性疫苗中定量重组抗

StephenW

Anal Biochem. 2018 Jan 12. pii: S0003-2697(18)30007-1. doi: 10.1016/j.ab.2018.01.006. [Epub ahead of print]
Quantification of a recombinant antigen in an immuno-stimulatory whole yeast cell-based therapeutic vaccine.
Wang J1, Stenzel D1, Liu A1, Liu D1, Brown D1, Ambrogelly A2.
Author information

1
    Biologics Analytical Operations, Pharmaceutical & Biologics Development, Gilead Sciences, 4010 Ocean Ranch Blvd, Oceanside, CA, 92056, United States.
2
    Biologics Analytical Operations, Pharmaceutical & Biologics Development, Gilead Sciences, 4010 Ocean Ranch Blvd, Oceanside, CA, 92056, United States. Electronic address: [email protected].

Abstract

Therapeutic vaccines represent an emerging class of immune-modulatory treatments for cancer, infections, and chronic diseases. One such vaccine was designed as an immune stimulator of the T cell response against HBV antigens to eliminate HBV infected cells and offer a therapeutic avenue to treat patients suffering from chronic hepatitis B infection. Whole deactivated Saccharomyces cerevisiae cells expressing a recombinant fusion of HBV X, S and Core antigens elicit T cell responses in mice and activate human T cells linked with viral clearance. As the therapeutic efficacy of the yeast-based vaccine relies on the production of the recombinant antigen, analytical methods designed to accurately and precisely quantitate the fusion protein in the midst of all the yeast proteins are necessary. We report the development and characterization of western blot, quantitative ELISA and mass spectrometry based orthogonal methods to support the assessment of manufacturing consistency.
KEYWORDS:

Antigen; Core antigen; ELISA; HBV; Immuno modulatory; MRM; S antigen; Saccharomyces cerevisiae; Tarmogen(®); Whole cell therapeutic vaccine; X antigen

PMID:
    29339060
DOI:
    10.1016/j.ab.2018.01.006

StephenW

肛门生物化学。 2018年1月12日。pii：S0003-2697（18）30007-1。 doi：10.1016 / j.ab.2018.01.006。 [电子版提前打印]
在基于免疫刺激的完整酵母细胞的治疗性疫苗中定量重组抗原。
Wang J1，Stenzel D1，Liu A1，Liu D1，Brown D1，Ambrogelly A2。
作者信息

1
    Biologics Analytical Operations，制药与生物制剂开发，Gilead Sciences，4010 Ocean Ranch Blvd，Oceanside，CA，92056，美国。
2
    Biologics Analytical Operations，制药与生物制剂开发，Gilead Sciences，4010 Ocean Ranch Blvd，Oceanside，CA，92056，美国。电子地址：[email protected]。

抽象

治疗性疫苗代表了一类新兴的针对癌症，感染和慢性疾病的免疫调节治疗。一种这样的疫苗被设计为针对HBV抗原的T细胞应答的免疫刺激剂以消除HBV感染的细胞并提供治疗患有慢性乙型肝炎感染的患者的治疗途径。表达HBV X，S和核心抗原的重组融合物的完全失活的酿酒酵母细胞在小鼠中引发T细胞应答并激活与病毒清除相关的人类T细胞。由于基于酵母的疫苗的治疗功效依赖于重组抗原的产生，因此设计为准确且精确地定量所有酵母蛋白质中间的融合蛋白的分析方法是必要的。我们报告的发展和表征的蛋白质印迹，定量ELISA和质谱基于正交的方法，以支持生产一致性的评估。
关键词：

抗原;核心抗原; ELISA; HBV;免疫调节; MRM; S抗原;酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）;的Tarmogen（®）;全细胞治疗疫苗; X抗原

结论：
    29339060
DOI：
    10.1016 / j.ab.2018.01.006

StephenW

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本文与治疗性疫苗无关. 它是关于找到一种方法来衡量插入酵母细胞的DNA质粒产生的HBV蛋白质.

"自身免疫缺陷" 是一个没有意义的术语.

StephenW

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正如: 你不懂乙肝，因为你的大脑有缺陷.

hunterpt

斯蒂芬w一直还活跃这这个版啊，您是活雷锋，不管对错我都支持你，因为你无私又坚持的精神。

antiHBVren

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支持你，一直在传递知识；真的是无私而又在坚持；

StephenW

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在这个论坛上, 乙肝技术超过你的人, 太多了.

正确，对人应该有礼貌, 但对一个骗子, 不要容忍.

StephenW

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在中国人和外国人的眼里你是一个骗子.

newchinabok

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老王，现出你的原形。老王，你和sw就是即生瑜，何生亮，虽然我是你的粉丝，但是你太让我们失望了，你还是不是拉米西斯？你难道忘记了你的初心？现在改行整起替诺来了，我感觉好痛心，这医药代表完全是逼良为娼！

StephenW

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我再次传递知识:
http://hbvhbv.info/forum/thread-1384445-1-1.html
8楼

"哈哈哈……我可不是杏林老人，他姓张，是湖南中医药研究院附属医院的退休院长，曾当过怀化市中医院的院长，现退休后居住在怀化。我嘛，是湖南医药学院的药学系主任，姓刘；至于撑起新肝胆相照论坛江南金桂嘛，也是我们药学系的教授，马上就要退休了；还有“卡痕老师”，他不是我们学院的人，但我们的几个课题研究需要他，因此我们是聘请他当了我们的客座教授。
金牌试剂是我们的研究成果之一，此外还有“患癌概率测算表”，另外还有一个正在研究的课题是有关通过调节免疫功能来防癌的，主要针对的是高危患癌人群。请看，我们这群人像骗子吗？
我倒觉得这位楼主倒像一只黑马蜂，
卡痕老师一上来以“卡痕”和野漆树过敏观点，论坛群起而骂之，最后强行封号而了之；杏林老人上来发表预测乙肝金牌理论，也被你们群起而骂之，最后封贴完事。我透露了金牌试剂的信息，又被你们封帖。可自从卡痕老师被你们封号后，论坛就一直在走下坡路，现在论坛一天也没几个新帖，论坛就是被你这样的人整垮了的。。这些天新论坛上不了网，所以我才到这里来溜溜。我们也曾办过一个“乙肝咨询网”，知道办好专业公益网站不易，因此见到昔日红火的论坛今天成了这般奄奄一息的冷清样，我劝告论坛的管理员，不要让这帮成事不足的所谓版主胡闹下去了。"

蛇鼠一窝!