EASL2015:工程化HBV特异性T细胞：解开 从抗病毒查杀能力

StephenW

G04
ENGINEERED HBV-SPECIFIC T CELLS: DISENTANGLING
ANTIVIRAL FROM KILLING CAPACITY
S. Koh1, C.Y.L. Tham2, A.T. Tanoto2,A.Pavesi3, R.D. Kamm4,A. Bertoletti2.
1Singapore Institute for Clinical Sciences A*STAR,
2Emerging Infectious Diseases Program, Duke-NUS Graduate Medical School,
3Singapore MIT Alliance–SMART, Singapore, Singapore;
4Department of Biological Engineering, Massachusetts Institute of
Technology, Cambridge, United States
E-mail: [email protected]
Background and Aims:
We  have  recently  demonstrated  that
adoptive transfer of engineered HBV-specific T cells in a patient
with HBsAg-productive HCC cause a profound inhbition of HBsAg
production (J Hepatology 2014. doi: 10.1016/j.jhep.2014.10.001.). The
difficulty to disentangle the antiviral effect of HBV T cells from
their killing ability constitutes a barrier to the application of this
immunotherapeutic approach in chronic HBV patients. Therefore,
our aim was to produce HBV-specific T cells that can inhibit
virus replication without hepatotoxicity and analyzed the antiviral
mechanism mediated by these engineered T cells.
Methods:
Using messenger RNA electroporation of HBV-T cell
receptor in human lymphocytes, we produced HBV-specific T
cells characterized by different activation and maturation stages.
These distinct HBV-specific T cell populations were tested in 2
dimensional (2D) and 3D in vitro assays for their ability to inhibit
HBV replication and/or lyse target cells.
Results:
Among  different  engineered  HBV-specific  T  cell
populations, we selected a perforin/granzymelow HBV-specific T
cells able to induce 50% drop in HBV viral load in HepG2.2.15
without causing detectable hepatotoxicity at an effector to target
ratio of 1:3 (both in 2D and 3D models). After HBV-specific
recognition, these resting naïve (CD28+CD27+) T cells produced
a large range of cytokines (IFN-gamma, TNF-alpha, GM-CSF and
lymphotoxin-alpha and -beta). Analysis of the specific antiviral
mechanisms indicated that a specific synergy between classical
antiviral cytokines (IFN-gamma, TNF-alpha, GM-CSF) and activator of lymphotoxin-b receptor (LT
bR) pathway mediate the antiviral but
non-cythopathic effect.
Conclusions:
It is possible to produce HBV-specific T cells able
to  efficiently  inhibit  HBV  replication  without  causing  direct
hepatocytes killing. This represents an attractive cell population
for adoptive T cell therapy of chronic hepatitis B. The relative contribution  of  antiviral  cytokines  and/or  LTbR  activation  to antiviral activity can lead to the development of new targeted
combinatorial therapy in HBV infection.

StephenW

G04
工程化HBV特异性T细胞：解开
从抗病毒查杀能力
S. Koh1，C.Y.L. Tham2，A.T。 Tanoto2，A.Pavesi3，R.D. Kamm4，A。 Bertoletti2。
1Singapore临床科学研究所A * STAR，
2Emerging传染病计划，杜克 - 新加坡国立大学医学研究生院，
3Singapore麻省理工学院联盟-SMART，新加坡，新加坡;
麻省理工学院4Department生物工程，
技术，剑桥，美国
电子信箱：[email protected]
背景和目的：
我们最近证实，
工程化HBV特异性T细胞的患者中的过继转移
与乙肝表面抗原生产力的肝癌引起的HBsAg深刻inhbition
生产（十肝病2014 DOI：10.1016 / j.jhep.2014.10.001）。该
难以从解开的HBV的T细胞的抗病毒效果
其杀伤能力构成了障碍的本申请
免疫治疗方法慢性乙肝患者。因此，
我们的目标是生产HBV特异性T细胞可以抑制
病毒复制没有肝脏毒性和分析了抗病毒
通过机制设计，这些T细胞介导的​​。
方法：
HBV-T细胞的使用信使RNA电
受体在人体淋巴细胞中，我们生产的HBV特异性T
细胞特征是不同的激活和成熟阶段。
这些不同的HBV特异性T细胞群中2测试
体外测定维（2D）和三维它们抑制能力
HBV复制和/或裂解靶细胞。
结果：
在不同的工程化HBV特异性T细胞
人群中，我们选择了一个穿孔/ granzymelow HBV特异性T
细胞能够诱导50％下降乙肝病毒载量的HepG2.2.15
而不会引起肝毒性检测时效应为目标
比例为1：3（无论是在2D和3D模型）。 HBV特异性后
承认，这些天真的休息（CD28 + CD27 +）T细胞产生
大范围的细胞因子（IFN-γ，TNF-α，GM-CSF和的
淋巴毒素α和-beta）。具体的抗病毒分析
机制表明，古典之间的特定协同
抗病毒细胞因子（IFN-γ，TNF-α，GM-CSF）和淋巴毒素β受体活化剂（LT
BR）通路介导抗病毒，但
非cythopathic效果。
结论：
它可以生产HBV特异性T细胞能够
有效抑制HBV的复制，而不会造成直接的
肝细胞杀死。这表示一个有吸引力的细胞群
对慢性乙型肝炎的过继性T细胞疗法的抗病毒细胞因子和/或LTBR激活抗病毒活性的相对贡献可以导致新的靶向开发
组合治疗HBV感染。

StephenW

这是另一种新的方式治愈乙肝, 从新加坡的Bertoletti

yelanglms

又多了一种方法啊，看样子乙肝能搞定，哈哈