悬赏：抗乙肝药物对cccDNA抑制作用的文章

ainile

无论怎么样支持你们，

lyq2003526

维普数据库里面有几篇cccdna的，还没仔细看。
-- http://vip.8888120.com/index.asp
阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者血清cccDNA的影响
六月青含药血清对HepG2.2.15细胞HBV cccDNA的抑制作用
水芹总酚酸对2.2.15细胞HBV DNA、cccDNA的抑制作用
HBVcccDNA检测判断拉米夫定抗乙肝病毒治疗的预后
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1-网络2006年的希腊Hadziyannis等报告---①HBeAg阴性慢性乙肝患者接受ADV治疗4~5年后, HBV复制被长期抑制,导致肝内HBV cccDNA显著降低但不能被清除,pgRNA水平也平行下降;②HBeAg阴性慢性乙肝患者接受ADV治疗4~5年后,肝内基因组HBV DNA的产生也被显著抑制;
2-HBsAg滴度与肝细胞内cccDNA呈正相关
3-血清cccDNA与肝细胞内cccdna有良好的相关性。

lin12345

lyq2003526

《Long-Term Entecavir Treatment Results in Sustained Antiviral Efficacy and Prolonged Life Span in the Woodchuck Model of Chronic Hepatitis Infection 》2001年
摘要：Entecavir is a guanosine nucleoside analogue with potent antiviral efficacy in woodchucks chronically infected with woodchuck hepatitis virus. To explore the consequences of prolonged virus suppression, woodchucks received ETV orally for 8 weeks and then weekly for 12 months. Of the 6 animals withdrawn from therapy and monitored for an additional 28 months, 3 had a sustained antiviral response and had no evidence of hepatocellular carcinoma (HCC). Of the 6 animals that continued on a weekly ETV regimen for an additional 22 months, 4 exhibited serum viral DNA levels near the lower limit of detection for >2 years and had no evidence of HCC. Viral antigens and covalently closed circular DNA levels in liver samples were significantly reduced in all animals. ETV was well tolerated, and there was no evidence of resistant variants. On the basis of historical data, long-term ETV treatment appeared to significantly prolong the life of treated animals and delay the emergence of HCC 。
恩替卡韦是一种具有强大的慢性肝炎病毒感染的土拨鼠土拨鼠鸟嘌呤核苷类似物抗病毒功效。为了探讨长期抑制病毒的后果，旱獭接受恩替卡韦口服8周，然后每周12个月。在6退出治疗和额外28个月的监测动物，持续3例抗病毒反应，也没有肝细胞癌（HCC）的证据。在这6只，即在每周的恩替卡韦方案继续为另外22个月，4展出近血清检测低的“2年的期限病毒DNA水平与肝细胞癌并没有证据。所有的动物的肝脏样本的病毒抗原和共价闭合环状DNA含量均显著降低。恩替卡韦的耐受性良好，而且没有抗药性变异的证据。根据历史数据的基础上，长期的恩替卡韦的治疗似乎显着延长治疗动物的寿命，延缓肝癌的出现。

中国成都

克来夫定  http://www.hbvhbv.com/forum/foru ... ble-tid-922295.html

springa

乙肝病毒DNA复制周期开始于共价闭合环状DNA（cccDNA）转录为前基因组RNA。cccDNA可十分稳定的存在于肝细胞核中。HBV一旦感染人体， cccDNA就难以消失。乙肝病毒携带者，肝细胞分裂为子代细胞时，cccDNA随之也复制到子代肝细胞中；而乙型肝炎病人，肝细胞大量坏死后，肝脏再生新的细胞，cccDNA就会重新感染再生细胞， cccDNA继续复制。所以HBV cccDNA很难消失。
??资料表明，cccDNA的半衰期为33～70天，只要肝细胞中还存在cccDNA，乙肝病毒的复制就不会停止，即使在药物的强烈抑制下，肝细胞中的cccDNA仍然在少量复制，补充到cccDNA库中。因此停用药物后，多会恢复复制。IFNα由于有免疫调节作用，因此在停药后会有持续效应，能持续抑制cccDNA的复制，最终耗竭cccDNA库，从而使cccDNA消失。不过一般多需要较长期用药。而拉米夫定虽然在用药时对cccDNA抑制作用强，但由于它没有免疫调节作用，停药后也就没有后续效应，从而很难耗竭肝细胞内cccDNA库，因此停药后很容易复发。
??CccDNA的消亡取决于感染肝细胞。慢性乙型肝炎患者，5～40％的肝细胞被感染乙肝病毒。感染肝细胞源源不断地复制cccDNA，并分泌到血清中。血清HBV DNA的转换半减期是1.2日；也就是说，血清中HBV DNA在1天以后，约有50％是新复制的病毒。正常情况下，健康肝细胞的半衰期是200余天。 而慢性乙型肝炎，在炎症活动时，肝细胞破坏、坏死较快，半衰期约为10天，因此每日可减少7％的感染肝细胞（此时如不治疗，再生肝细胞仍可被感染）；如果炎症静息，肝细胞的破坏延缓，半衰期约为100天，这样每日可减少0.3％的感染肝细胞。由此可见感染肝细胞的清除是非常缓慢的，而再生肝细胞或子代细胞又被再感染，因此cccDNA很难彻底消亡，可以说，cccDNA和肝细胞是“共存亡”。尤其是炎症静息时，感染肝细胞相对长寿命，cccDNA更难清除。
??在我国，慢性HBV感染很难清除，有三个原因：1、如上所述，cccDNA很难消亡。2、我国病人多位婴幼儿时期感染，在长期慢性携带后发病，都有不同程度的免疫耐受性，因此和西方病人相比，我国病人的血清抗体转换率低，复发率高。3、部分病人，HBV DNA早期整合到感染肝细胞的细胞核染色体中，成为肝细胞染色体的组成成分，此后随着肝细胞染色体的复制、分裂而复制、分裂，不能清除。
以上是摘自骆抗先教授的文章，cccDNA很难消亡应该是指慢性乙肝病人而言，但成人感染乙肝确实有90%自愈。非溶细胞机制抗病毒作用当然不能排除：哪位战友能将急性乙肝的自愈做一个解释？是否涉及cccDNA的出现与消失？我想会对最终治疗慢性乙肝起到一定作用。

我的观点是，要根除乙肝，即慢性乙肝治疗的一个理想终点：
1.对于没有发生乙肝病毒与肝细胞融合的患者，根治乙肝的办法就是彻底清除共价闭合环状DNA。
2.对于已经发生乙肝病毒与肝细胞融合的患者，希望从基因治疗的途径，敲除融合基因。
3.退而求其次，可以采取某种措施，将乙肝病毒人为改造成某种非致病病毒，不但本身不致病，代谢产物也不致病，也不会出现免疫损伤
二、慢性乙肝的终结，大家比较倾向的意见是采用联合用药，这点我也赞同。有人举到青霉素的例子来类比，个人感觉将乙肝与结核来类比如何？有很多相似的地方，结核的治疗发展史我不是很清楚，那位战友开一下课？我想会有很多启发。
欢迎继续讨论，就乙肝的理想治疗终点，核苷类药物的前景，我上面提到的两点等等
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今晚上在检索上面的问题，误打误撞找到一个张定凤教授的幻灯，跟咱的讨论题目居然惊人的像，因为幻灯太大，近20兆，英文居多，表格居多，所以我摘取了标题供大家分享一下，看看大家的思路与风范：
核酸类似物能清除HBV　cccDNA吗？
HBV　DNA　的变异株复制能力低还是高？
清除乙型肝炎病毒还有什么途径？
1. 钙通道及Tyrosine kinase inhibitor 的作用
2. Ras 可能是多种因素抑制乙型肝炎病毒基因复制的枢纽
3. TNF 可能是通过 NF-kB抑制乙型肝炎病毒基因复制
4.HBV DNA 基因整合的条件是什么？
1.HBV的那种病毒蛋白引起细胞免疫可以清除病毒？
2.乙型肝炎病毒的免疫耐受和产生及／或接受细胞毒性T细胞的宿主的免疫状态有关
3.急性乙型肝炎的病毒清除主要依靠特异性CD8+　T细胞。
4.乙型肝炎的病毒清除主要依靠1型细胞因子还是2型细胞因子？
5.干扰素的抗病毒治疗的作用机理是什么？小提琴手？还是交響乐团？
6.联合治疗是抗乙肝病毒治疗的方向。
7.核(苷)酸类似物/不同靶位/不同机制药物联合治疗可以提高效果
8.核酸类似物抗乙肝病毒的作用已无用置疑，对Lamivudine耐药毒株有效药物不断出现。
核(苷)酸类似物为基本药物，和其他不同靶位不同机制药物药物合用。

激活乙型肝炎的特异性细胞免疫功能的药物。DNA疫苗在鴨体内可提高疗效。
RNA干扰体
这是他老人家最后的小结：
人体抗乙型肝炎是一个復合过程，包含病毒，及机体抗病毒免疫各个方面。
抗病毒治疗也应采取联合治疗，包括核(苷)酸类似物，特异性细胞免疫功能及非特异性细胞免疫功能药物，进行科学化合理配置。

springa

核苷类似物,如果不是当作一个药物来看待的话,倒是很乐意把它当作构造的一个特殊的环境,这个复制环境对病毒并不十分有利.为什么要提到复制环境这个东西,还是应该从HBV的嗜肝性说起.肝脏表面的受体当然是病毒定植的必然途径,但是,肝脏细胞提供了一个丰富的复制酶类才是HBV得以存在的复制环境,改变这个环境,比如说使用了核苷类似物或者个体之间的差异,病毒同样会发生选择变异.此区别与我们通常说的免疫压力的选择作用.所以,即使目前的多种药物轮用,或者是将来的联用,实际上都是增加或者改变作用位点,理论上尚无法证明存在一个高度保守的序列,其对病毒的复制是必须的,任何其他的变异都可以导致遗传失能,所以理论上任何核苷类似物都不可能根本上清除病毒.正如贴主所说,在健康的人体内仍然有病毒,一个推论上的解释:把病毒分为慢和急病毒,慢病毒可以通过改变其复制能力适应宿主并且长期存在,而无法清除,在免疫学上也有佐证,过低的抗原总是诱导耐受,所以,微量病员的存在是完全可能的.上面的讨论试图推导出,完全清除病毒是不可能的,当然也包括cccDNA.

明白清除病毒是伪问题以后,才明白的治疗的终点和可能的途径是什么?只要是感染都按照急性感染的自然过程进行,HBV就不是什么心病.所以最最关键的是找到导致急性和慢性感染两种不同结局的最初的免疫差异.我个人认为治疗的根本途径是免疫,而核苷类似物延长生存机会,无疑是有利的.

现在对慢性感染机制的研究已经日渐衰落,直接抑制病毒似乎更容易让那些外行的课题评审激动,即使进行的研究也局限在对慢性化后发生后的事件的探索,就好象只摸瓜不摸藤.导致病毒急性康复的理由只有一个,那就是感染前的免疫状态,而导致慢性化却有N多的方面导致,显然是不符合逻辑.导致慢性的理由也应该只有一个,就是感染前的免疫状态.
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不能将HBV简单定义为DNA病毒，因为实际上它完全是RNA病毒的表现，另外，cccDNA的稳定性肯定超出我们的想象，病毒的目的很明确，他的目的不是要杀死宿主，对宿主的损伤时他目的的副作用，他的目的是生存，而宿主也很明确，就是让容易感染的宿主在进化中淘汰掉，这是自然界中真正造成疾病的原因，但是人类发展了医学，阻止了进化，所以才造成现在一些现象，这也是HBV的致病性不是很强的原因，就是为了让自己能够购生存下去。HIV的潜伏期长也是这个原因。核苷类药物应该还是关注耐药性，阿德福为的耐药性肯定不是想厂家说的那样，恩悌卡位更不要说了，如果那样，说明抑制效率不行，临床上好像也事实如此，抑制能力和耐药是成反比的吧。
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哪位战友能将急性乙肝的自愈做一个解释？是否涉及cccDNA的出现与消失？我想会对最终治疗慢性乙肝起到一定作用。

我的观点是，要根除乙肝，即慢性乙肝治疗的一个理想终点：
1.对于没有发生乙肝病毒与肝细胞融合的患者，根治乙肝的办法就是彻底清除共价闭合环状DNA。
2.对于已经发生乙肝病毒与肝细胞融合的患者，希望从基因治疗的途径，敲除融合基因。
3.退而求其次，可以采取某种措施，将乙肝病毒人为改造成某种非致病病毒，不但本身不致病，代谢产物也不致病，也不会出现免疫损伤

StephenW

springa 发表于 2011-5-5 21:41
乙肝病毒DNA复制周期开始于共价闭合环状DNA（cccDNA）转录为前基因组RNA。cccDNA可十分稳定的存在于肝细胞 ...

您的文章我很感兴趣。请提供原来参考, 谢谢.

springa

StephenW 发表于 2011-5-5 22:00
您的文章我很感兴趣。请提供原来参考, 谢谢.

多谢,
http://www.med66.com/html/ziliao/yixue/11/56f63261671fdfe71cd4f4e0f16f90c4.htm

springa

【讨论】病毒性肝炎小组4~5月份讨论主题-核苷类药物抗乙肝病毒能走多远？