代偿期慢乙治疗思路！

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治疗性乙肝疫苗的理论基础是三军大吴玉章教授建立的“基于表位的疫苗设计”
机理（epitope-based vaccine design） 。虽然名称是“疫苗” ，但实际上是一种治疗
性多肽药物。从授权的专利看，该药物是由三个氨基酸序列构成的合成肽，三个
氨基酸序列分别是：破伤风类毒素来源的 Th 细胞表位上的序列或其变异序列；
HBV核心抗原上的序列或其变异序列； HBV Pre－S2来源的B细胞表位上的序列
或其变异序列。在天然序列的基础上，实验者利用分子模拟设计出免疫原性更强
的合成序列。该合成肽药物可以激发体内的细胞免疫反应，清除感染乙肝病毒的
肝细胞，达到治疗目的。

2.3 此前临床结果的总结
新药的研发，从来不是一帆风顺，国内外皆如此。治疗性乙肝疫苗在 2003年进入
I期临床，结果证明其安全性符合要求；2006年进入 II期 A阶段临床（II期预实
验） ，在小样本的基础上取得了一定的成功，2009年开始进入 II期 B阶段临床（II
期正式实验） 。


--临床 I期的结果总结：
2003年 11月开始的 I期临床，包括单次给药和连续皮下给药。从结果看，药物的
在试验的剂量下，其安全性较好，未出现严重的不良反应。结果表明治疗性疫苗
可以有效激发特异性体液免疫应答，一定程度激发特异性细胞免疫应答，在低剂
量组（300μg）就可以激发免疫应答。

--临床 II期预实验（即 II期 A阶段）的结果总结：
2006 年开始 II 期预实验，在 40 多例慢性乙肝患者中，使用不同剂量以及联合使
用γ-干扰素及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子进行治疗。其中不同剂量给药组观
察到病毒 DNA 拷贝数下降，以及抗 HBV Pre-S2 抗体应答。由于 II 期预实验设
定的观察期不长，在试验结束时没有观察到 e 抗原转阴等结果。但试验者对其中
部分给药病例继续观察，在后续的观察中出现 e 抗原转阴的结果。截至目前，在
跟踪的给药病例中，有超过一半的病例出现这一结果。

--对 II期预实验的评价：
II期预实验的结果虽然是在小样本基础上取得的，但仍然有一定的参考意义。
1）有效性较高，目前临床使用的干扰素、核苷类药物，对 e 抗原转阴大概有效率
在30－40％；
2）反弹率较低，干扰素以及核苷药物在停药后有较大比例反弹，而治疗性疫苗
到目前为止没有明显的反弹；
3）治疗周期短，给药方便，目前 II期 B阶段采取的是 28周治疗，分别在
0、4、8、12、20、28周注射，共 6次，而现有治疗方案周期较长，用药量大；
4）副作用较低，目前未观察到严重不良反应，而其他治疗方案都有一定的副作用。

此外，II 期预实验在给药后约 1 年的观察期内没有出现效果，但随着时间推移，
效果逐步显现。在给药后近 3 年的时间内，不断出现新的显效病例，这意味着药
物确实激发了人体自身的免疫应答，其对病毒的清除虽然缓慢，但是更持久。

（转）重啤佳辰生物乙肝疫苗实验进程

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2.4 II 期B 阶段临床将具有决定性意义
在此前临床试验的基础上，II 期 B 阶段自 2009 年 3 月已经开始筛选病例并进行
治疗。II期 B阶段只是一个通俗的说法，与 II期预实验（A阶段）想对应。正式
名称是“治疗用（合成肽）乙型肝炎疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效及安全性的多
中心、随机、双盲、安慰剂对照的 II 期临床研究” 。这一临床分成两部分，一个
部分就是我们通常说的 II期 B阶段，由北大附属人医院做组长单位；另一个部
分由浙江第一人医院做组长单位，其临床方案设计是采用治疗性乙肝疫苗与恩
替卡韦联合用药。


目前正在进行的 II期 B阶段，是判断疫苗治疗效果最重要的试验，这一结果将决
定能否如期申请 III期临床及后续工作。而联合用药方案是重要的辅助研究，这一
组的病例也达到 300多，预计在 II期 B阶段病例入主完成后，将正式启动。联合
用药的方案目的也是检验治疗性疫苗的安全性及疗效，同时可以检验治疗性疫苗
能否提高恩替卡韦的治疗效果，减少反弹等。由于对照组使用恩替卡韦这一目前
治疗乙肝的新型核苷类药物，病人和临床医生容易接受，便于病例的搜集。由于
核苷类药物本身的疗程就很长（一般是一年） ，因此其观察期也较长，预计在 2
年左右，多于 II期 B阶段。需要说明的是，这一组试验不影响 II期 B的结论。

II 期 B阶段研究的首要目的是：评价慢性乙肝患者单独使用治疗性疫苗的疗效。
次要目的是：观察治疗的安全性和耐受性，为后续临床研究确定合理的剂量和疗
程。与 II期 A阶段不同，B阶段做了如下调整。


表 1：治疗性乙肝疫苗 II期 A与 II期 B方案的差异比较
  II期A-II期B
病例总数-40多预计360（不低于300）
治疗期24周28周
给药次数-4次-6次
分组

对照组、600μg、900μg、-对照组、600μg、900μg
600μg＋INF－γ＋GM-CSF

随访期24周48周
后续阶段-无--76 周研究结束后，受试者自愿决定可以进
-入第二阶段，给药者继续使用原有剂量，
-对照组进行给药，随访至3 年（144周）

从临床方案的变化来看，有如下几点值得注意：
1）病例大幅增加，完全满足临床研究需要。
2）给药剂量加大。II 期 A 阶段初始效果不明显，可能是给药剂量不足，刺激不
够强。II期 B阶段，增加了 50％的给药次数，等于免疫刺激增加了一半。
3）治疗期和随访期延长。从 II 期 A 阶段的结果看，药物起效比较缓慢，清除感
染病毒肝细胞的半衰期较长，因此在 48周内没有明显的效果。II期 B阶段将随访
期延长至 76 周，确保药物的治疗效果得到检验。此外，在 76 周研究结束后，还
将进行开放性设计的第二阶段，能更好的评价药物的治疗效果。由于 II期 B阶段
的病例数多，达到 III 期临床要求，因此如果 II 期 B 结束后，疗效很好的话，III
期临床可能会很快开展，缩短临床时间。



重啤佳辰生物乙肝疫苗实验进程

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治疗性疫苗临床结果与现有治疗方案比较

从比较结果看，治疗性乙肝疫苗的优点较为明显：
1）疗效较好，目前 II 期 A 阶段临床结果中，e 抗原转阴比例超过 50％，高于现
有其他治疗方案。
2）反弹很小，目前没有出现明显的反弹，其他药物长期用药，都存在反弹问题。  
3）耐药性不明显，治疗性疫苗产生耐药性的可能性不大。
4）不良反应轻，目前观察到一些较轻的免疫反应，而干扰素不良反应比较严重。  
5）病人的依顺性好，由于给药次数少，病人的痛苦较少，医生和病人容易接受，
其他如干扰素，在半年的疗程中隔天打针，核苷药物是每天使用，比较麻烦。
我们认为，这些优点将有助于该药品完成临床研究，并获最终得新药证书。


重啤佳辰生物乙肝疫苗实验进程

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由于治疗用（合成肽）乙型肝炎疫苗涉及免疫学较新的理论，吴玉璋和临床专家之间存在专业理解上的分歧。二期A临床试验方案由临床医院专家设计，二期A临床试验也因此出现了一些问题。比如由于在原理上缺乏足够的理解，二期A临床试验的专家坚持将吴玉璋原先设想的注射剂量减半，将时间缩短到了48周，导致误以为药物无效。此外，还有一家参加临床试验的医院在样本遴选上没有按照原定方案，引起样本数据异常波动。



　　2007 年8 月，48 周的检测结果出炉，揭盲后用药组无免疫应答，临床试验医师灰心了，将试验病人遣散。由此也导致了重庆啤酒被机构减持。

　　但是，据知情人士透露，在医院遣散了参与实验的病人后，吴玉璋坚信自己的研发成果是有效的。因此自己掏钱继续对参与试验的病人进行随访，结果让人非常兴奋，平安证券研究员廖万国2月25日的研究报告透露：二期A临床试验共48例病人（治疗组＋对照组），结果表明治疗用（合成肽）乙型肝炎疫苗具有一定的疗效，30％病人E抗原转阴或病毒滴度大幅度下降。


重啤佳辰生物乙肝疫苗实验进程

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重庆啤酒发布公告，截止到2010 年12 月31 日，以北京大学人民医院为中心实验室（组长单位）的“治疗用（合成肽）乙型肝炎疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效及安全性的多中心、随机、双盲、安慰剂对照的II 期临床研究” 按临床试验方案正在各家临床医院正常进行临床试验，目前累计已有44 例受试者完成了76 周临床实验。以浙江大学医学院附属第一医院为中心实验室（组长单位）的“治疗用（合成肽）乙型肝炎疫苗联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者的疗效及安全性的随机、双盲、多中心II 期临床研究”临床试验正在进行受试者的筛选入组工作，目前累计已入组了336 例受试者。

　　点评：

　　公告表明，治疗性乙肝疫苗目前进展顺利。北大组不断有受试者完成全部76 周的实验，相应的统计数据对最终证明该疫苗的疗效，具有确定性的指导意义。浙大组自2010 年7 月以来，至12 月底已经有336 例受试者入组，我们估计在2011 年1 月就完成全部396 例受试者入组。

　　合成肽治疗性乙肝疫苗的效果到底有多好？IIb 阶段是检验结果的关键时期。北大组临床入组完成，目前已经进入收获期。我们根据临床进程判断，全部入组受试者完成76 周试验，应该在2011 年的9 月份。那么10 月份之后将有全部的结果。浙大组预计2011 年1 月份完成396 例受试者入组，根据临床进程，48 周后即2011 年底将有结果公布（之后再观察48 周）。从临床跟踪情况分析，该疫苗很可能超过现有药物的治疗效果。从疫苗设计来看，更有可能出现彻底治愈的希望，我们认为在较长的观察期内，有望出现这一结论。

　　从机理上讲，合成肽治疗性乙肝疫苗的抗原设计更科学合理。合成肽疫苗的抗原设计中，明确采用了CTL 细胞表位作为片断，目的是激发免疫系统产生细胞免疫反应，达到清除病毒感染的肝细胞，彻底消灭病毒。而我们看到的DNA 疫苗，缺乏对CTL 表位的设计。国内的DNA 治疗性疫苗，更有可能用于提高核苷类似物对乙肝病毒DNA 复制的抑制作用，降低停药后的反弹。

　　从安全性来说，蛋白质/多肽疫苗具有明显优势。蛋白质/多肽的预防性疫苗已经应用非常普遍，这对于相应的治疗性疫苗来说，表明安全性是容易被认同（合成肽治疗性乙肝疫苗在2003 年开始做I 期临床，之后的IIa 和IIb 临床，都表明安全性没有问题）。而DNA 疫苗在国际上目前没有一个预防性产品批准，其安全性（特别是长期安全性）还是有待检验。

　　DNA 的表达量，存在个体差异性，这对疫苗的推广不利。DNA 疫苗携带的基因片断进入细胞后，其表达出抗原的量，是受个体基因表达的调控，而且电击转染的效率比基因枪要低。所以，每个病人给药的剂量，能不能表达出所需要的抗原，是需要个别研究。如果一个治疗方案是个性化治疗，那么其成本会很高，应用面会变窄。所以目前基于树突细胞的治疗性疫苗（参见我们的行业报告）用于肿瘤治疗就可以接受，因为肿瘤病人对这种成本是不敏感的，但对于乙肝病人来说，适应范围可能会变小。

　　在合成肽疫苗的临床方案设计中，选择了HLA-A2（对人白细胞抗原分型的一种）阳性的群体作为受试范围，这一人群占中国人口的50%左右。市场可能担心，这样是不是将一半的乙肝群体排除在外？我们认为，合成肽疫苗一旦证明对HLA-A2 阳性群体有效，那么意味着从实践上证明这条途径成立，据此开发针对其他分型群体的疫苗，也是比较容易实现的。

　　市场变化比基本面变化快，但最终基本面决定公司的真正价值。具有革命性意义的事物，在被大众接受的过程中，肯定面临各种质疑和分歧。创新药物历史上，有成为重磅油炸弹的产品，也有很多极具潜力的品种中途夭折。对产品从机理到实践的研究，有助于对项目的成功可能性进行判断。从对合成肽治疗性乙肝疫苗的跟踪来分析，我们认为该产品成为一线用药的可能性极大，并有希望在未来的临床进程中，观察到更有科研价值以及商业价值的成果。

StephenW

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你可以从这个文件学习关于免疫识别和免疫攻击.[StephenW]

http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6W7C-51J363G-6&_user=10&_coverDate=11%2F23%2F2010&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=search&_origin=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_searchStrId=1631130261&_rerunOrigin=google&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=9760dee963ff9573d6de94fb316c35ef&searchtype=a
Engineering Virus-specific T cells that Target HBV Infected Hepatocytes and Hepatocellular Carcinoma Cell Lines





References and further reading may be available for this article. To view references and further reading you must purchase this article.


Adam J. Gehringa, Shao-An Xueb, Zi Zong Hoa, Denise Teoha, Christiane Ruedlc, Adeline Chiaa, Sarene Koha, d, Seng Gee Lime, Mala K. Mainif, Hans Staussb and Antonio Bertolettia, e, g, , ,

a Singapore Institute for Clinical Sciences, Agency for Science Technology and Research, (A*STAR), Singapore
b Department of Immunology, Royal Free Hospital, Royal Free and University College Medical School, London, UK
c Division of Molecular & Cell Biology, Nanyang Technological University, Singapore
d Department of Laboratory Medicine, Division of Clinical Microbiology, Karolinska Institute, Stockholm, Sweden
e Yong Loo Lin School of Medicine, National University of Singapore, Singapore
f Division of Infection and Immunity, University College London, UK
g Duke-NUS Medical School, Singapore


Received 13 May 2010;  
revised 1 October 2010;  
accepted 20 October 2010.  
Available online 23 November 2010.  

AbstractBackground & AimsVirus-specific T cells capable of controlling HBV and eliminating hepatocellular carcinoma (HCC) expressing HBV antigens are deleted or dysfunctional in patients with chronic HBV or HBV-related HCC. The goal of this study was to determine if T cell receptor (TCR) gene transfer can reconstitute HBV specific T cell immunity in lymphocytes of chronic HBV patients and investigate whether HCC cells with natural HBV-DNA integration can be recognized by genetically modified T cells.
MethodsWe used vector-mediated gene transfer to introduce HLA-A2-restricted, HBV-specific TCRs into T cells of chronic HBV as well as HBV-related HCC patients.
ResultsThe introduced TCRs were expressed on the cell surface, evidenced by Vβ and pentamer staining. TCR transduced T cells produced IFN-γ, TNF-α, IL-2, and lysed HBV infected hepatocyte-like cell lines. Furthermore, HCC cell lines with natural HBV-DNA integration could be recognized by HBV-specific TCR-redirected T cells.
ConclusionTCR re-directed HBV-specific T cells generated from PBMC of chronic HBV and HBV-related HCC patients were multifunctional and capable of recognizing HBV infected cells and HCC tumor cells expressing viral antigens from naturally integrated HBV DNA. These genetically modified T cells could be used to reconstitute virus-specific T cell immunity in chronic HBV patients and target tumors in HBV-related HCC.


Keywords: Immunotherapy; T cell receptor gene transfer; Hepatocellular carcinoma; Hepatitis B virus



Corresponding author.  

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There are three types of "Articles in Press":

Accepted manuscripts: these are articles that have been peer reviewed and accepted for publication by the Editorial Board. The articles have not yet been copy edited and/or formatted in the journal house style. Uncorrected proofs: these are copy edited and formatted articles that are not yet finalized and that will be corrected by the authors. Therefore the text could change before final publication. Corrected proofs: these are articles containing the authors' corrections and may, or may not yet have specific issue and page numbers assigned.

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Journal of Hepatology

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StephenW 发表于 2011-2-5 21:44
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你可以从这个文件学习关于免疫识别和免疫攻击.[StephenW]

不好意思，自从学校出来后就很少和英文粘边，所以我的英文很菜的，谢谢你的帮助！

mtv982

停阿德肝功谷丙暴升1300多，之后48天表抗原e抗原核心抗体大幅度的下降（就dna降一次方），表明成功激发了自身的免疫应答，但由于cccdna仍然太多和dna高复制，很容易又把我的免疫压制下去了，随后就出现了谷丙下降dna和两对半回升的现象。
如果我没想错的话，我这种情况等同于打了数月的治疗性乙肝疫苗激发免疫应答的效果，这时上核甘抗病毒，不出意外，拿银牌并能成功停药的可能性较高。（也许过于盲目乐观了）

我随心动

致楼主狂人，汝今能持否。。。
被赶到这里来继续日记啦。

StephenW

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"我这种情况等同于打了数月的治疗性乙肝疫苗激发免疫应答的效果"
"激发免疫" - 这个"激发免疫" 是非常错误的!

我想问你一个问题：乙肝病毒本身不损伤肝细胞, 你知道吗?