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氧化苦参碱的基础与临床(概述)



上海市长征医院感染科







    氧化苦参碱是从中药苦豆子中提取的一种生物碱水溶液制剂，其中氧化苦参碱（oxymatrine）占98%以上，分子式为C15H24N2O2.H2O，分子量为282，其他还有极少量的槐果碱、槐胺碱、槐啶碱等几种。

    苦豆子（sophoraal opecuraidesl）为豆科槐属植物。别名苦甘草、苦参草、苦豆根及西豆根。我国约有12种，集中分布于北方的荒漠地区，尤以宁夏、甘肃、青海、新疆及内蒙古为多。全株味极苦、性寒，具有清热解毒、抗菌消炎作用，民间用其根治喉痛、咳嗽、痢疾及湿疹等。我国药典1977年版已将“苦豆草片”加以收载，主治痢疾及肠炎，国外早在30年代初苏联开始研究，国内开始于1972年，国内外研究的重点均放在生物碱上，目前国内自苦豆子植物中提取、分离、鉴定的生物碱主要有氧化苦参碱、苦参碱、槐果碱、槐胺碱、槐啶碱、苦豆碱、金雀花碱、N-甲基金雀花碱等几种。药理方面国内70年代主要研究了苦豆草煎剂、苦豆草干浸膏、苦豆草总生物碱及生物碱单体苦豆碱、槐啶碱及槐果碱的药理作用，尤其以槐果碱的研究较为详细，有平喘、抗菌、消炎、抗肿瘤等作用。近15年对氧化苦参碱及苦参碱的研究较多，但主要限于实验研究，其中有氧化苦参碱对小鼠实验性肝损伤保护作用的观察；对小鼠微粒体药物代谢酶的诱导作用研究；对-型变态反应的抑制作用；氧化苦参碱对淋巴细胞增殖的影响及抗心律失常的实验研究等，临床主要用于过敏性皮肤病及白细胞减少的治疗。1994年上海市传染病医院实验发现氧化苦参碱有抗麻鸭乙型肝炎病毒作用，上海市多家综合医院协作采用氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎均取得良好疗效。    1996年12月由卫生部指定的上医大附属华山医院，北京佑安医院完成40例随机双盲验证及其它有关药效、不良反应的基础论证工作，1998年2月24日卫生部批准氧化苦参碱为国家治疗慢性乙型肝炎五类新药。    1998年8月中华医学会重点推广工程专家认证决定博尔泰力（苦参素注射液）治疗病毒性肝炎列入重点推广工程项目，在全国推广使用。近几年氧化苦参碱在治疗病毒性肝炎方面的主要进展如下。



一、 氧化苦参碱具有直接抗乙型肝炎病毒作用



1. 氧化苦参碱可抑制2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg



    上海长征医院采用含HBV基因转染的2.2.15细胞株为研究对象，观察不同浓度氧化苦参碱（Oxy）作用不同时间对细胞培养上清中HBsAg及HBeAg水平的影响及其细胞毒性，计算Oxy对HBV抗原的抑制率及治疗指数（Ti），并同无环鸟苷（Acy）相比较，综合评价Oxy的体外抗HBV效果，结果：Oxy在50μg/ml-2000μg/ml浓度范围内剂量相关性抑制2.2.15细胞分泌HBsAg及HBeAg，且随着药物作用时间的延长，Oxy对HBsAg及HBeAg的分泌抑制率逐渐增强，在药物作用第20天，对HBsAg及HBeAg的分泌抑制率最高，可分别达93%及63%，虽有一定的细胞毒性，但对HBsAg及HBeAg的TI分别达到63及6.2。Acy对HBsAg及HBeAg也有较高的抑制率，在1mg/ml浓度时，作用于细胞20天，对HBsAg及HBeAg的抑制率分别达到96%及60%，但显示出较高的细胞毒性，其抑制HBV的治疗指数明显低于Oxy。实验证明Oxy可抑制2.2.15细胞分泌HBsAg及HBeAg，细胞毒性低，治疗指数高，提示直接抑制乙肝病毒活动为Oxy抗HBV作用机理之一。



2.氧化苦参碱可抑制乙肝病毒转基因小鼠抗原的表达



    上海长征医院以乙肝病毒全基因组转基因小鼠ICR(TgN,HBV 1.2copy)为动物模型，采用ELISA、免疫组化和电镜等方法检测不同剂量Oxy治疗不同时间小鼠肝脏内HBV抗原含量的变化，研究Oxy的抗HBV作用，结果表明Oxy能降低HBV转基因小鼠肝脏内HBsAg及HBeAg含量，且对两者作用一致，Oxy200mg/kg治疗30天时，6只小鼠肝脏内HBsAg及HBeAg均转阴，但随着治疗时间延长重又出现阳性表达，这可能同转基因小鼠处于免疫耐受有关。



二、氧化苦参碱能抑制胶原活动度和防治肝纤维化



    上海长征医院采用四氯化碳（CCL4）造成大鼠慢性肝损伤纤维化模型，同时采用Oxy防治，并动态观察血清丙氨酸转移酶（ALT）、IV型胶原（IV-C）、透明质酸（HA）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的水平以及肝脏组织病理变化，通过计算机图象分析系统，分析肝内纤维组织增生情况，结果表明，Oxy治疗组血清 ALT、IV-C、HA、TNF-α水平和肝组织内炎症活动度以及纤维组织增生程度均低于模型组，且大剂量治疗组又低于小剂量治疗组，表明Oxy有减轻肝脏炎症活动度，抑制肝内胶原合成及抗肝纤维化作用。



    上海长征医院以NIH3T3成纤维细胞为靶细胞，应用MTT法、Northern blot杂交及免疫细胞化学技术，研究发现当Oxy浓度大于62.5 ug/ml时，成纤维细胞增殖活性受到明显抑制，并呈剂量依赖性，受抑制的细胞体积小、细胞质少，多呈梭状或圆形，细胞核小，处于核分裂期细胞少。Oxy并能明显抑制成纤维细胞III型前胶原mRNA及转化生长因子 （TGF-β1）的表达，提示以上发现可能是Oxy抑制肝纤维化的机理之一。



三、氧化苦参碱可阻断肝细胞异常凋亡



    上海长征医院采用撤除苯巴比妥钠（PB）诱导的肝细胞凋亡的实验模型，研究氧化苦参碱及甘草酸对肝细胞凋亡的影响，以肝体重比、肝脏DNA含量、肝组织病理改变及原位细胞凋亡TUNEL标记为指标，观察Oxy150 mg·kg-1及甘草酸50 mg·kg-1，腹腔注射对撤除PB后引起的小鼠肝细胞凋亡影响，结果模型组小鼠肝体重比及肝脏DNA含量分别回落16.3%及32.4%，Gly组小鼠肝体重比及肝脏DNA含量分别回落16.1%及28.9%；Oxy组小鼠无明显回落，组织学检查及凋亡细胞TUNEL标记：模型组及GL组小鼠肝细胞出现典型凋亡样改变，TUNEL标记阳性，而Oxy组小鼠肝组织未见明显凋亡改变，实验结果表明Oxy可阻断PB诱导的小鼠肝细胞凋亡，而甘草酸对其无影响。



四、氧化苦参碱对实验性小鼠肝衰竭具有保护作用



    长征医院采用内毒素（LPS）和D-氨基半乳糖（GalN）致小鼠产生暴发性肝衰竭，同时分组以氧化苦参碱治疗观察，结果表明氧化苦参碱治疗组小鼠血清以ALT及TNF-α水平明显低于模型组，肝组织损害程度及Fas、FasL表达强度均较模型组减轻，提示氧化苦参碱可能通过下调TNF-α水平及抑制Fas、FasL表达，从而阻断LPS所致肝细胞异常凋亡及坏死。



五、氧化苦参碱治疗慢性肝炎取得良好疗效



    长征医院采用氧化苦参碱治疗慢性乙肝64例，与-干扰素300万单位治疗慢性乙肝52例比较，氧化苦参碱组ALT复常率81.6%，胆红素复常率69.9%，干扰素分别为73.7%和64.0%（p<0.05），氧化苦参碱组HBeAg阴转率44.4%，HBV DNA阴转率45.3%，干扰素组分别为48.0%和51.9%（p<0.05）。氧化苦参碱组中CAH患者HBeAg 及HBV DNA阴转率分别为61.0%和61.9%，而CPH分别为15.4%和15.4%，CAH+CL分别为11.1%和11.15%，表明治疗病例的选择对治疗有直接影响，氧化苦参碱治疗患者除注射部位轻度疼痛外，未见其他不良反应，本组合并有白细胞及血小板降低的慢性乙肝患者，经过氧化苦参碱治疗后1/3患者白细胞和血小板恢复正常，或有不同程度提高，同时发现氧化苦参碱治疗组血清型胶原及型胶原及透明质酸水平较治疗前均有显著下降，表明氧化苦参碱治疗慢性肝炎时同时具有抑制胶原活动度和肝纤维化作用。



    上海仁济医院采用氧化苦参碱治疗慢性丙型肝炎17例600mg/d，肌注，疗程3个月HCV RNA转阴8例（47.1%），转阴率高于对照组（1/18），5.6%，肝功能ALT复常率第1、2月末亦高于对照组，血清可溶性白介素-2受体（SIL-2R）水平和血清型胶原（IV-CL）水平较治疗前显著下降，结果表明氧化苦参碱有抑制HCV增殖、抗肝纤维化和调节宿主免疫的作用。



六、其它方面



    氧化苦参碱具有抗过敏、抗炎作用：能调节免疫和升高白细胞。近年有研究发现Oxy和苦参碱Mat有抗过敏作用，可抑制炎症介质的释放，可调节小鼠和大鼠腹腔肥大细胞组织胺释放，可有效抑制IgE交联及组胺、白三烯等介质释放，并具有稳定细胞膜作用。另有报道Oxy 100 mg·kg-1可提高肝微粒体细胞色素P450含量，可激活细胞膜上的腺苷酸环化酶，从而提高细胞内cAMP水平，Oxy 100 mg/kg时对大鼠产生强烈的利胆作用，这种作用可能同升高细胞内钙水平有关。Oxy对免疫系统细胞增殖的影响同细胞状态密切相关，升高白细胞作用及抑制自身免疫可应用于自身免疫性肝炎及白细胞及血小板减少的治疗。



    上海长征医院 采用大剂量Caerulein皮下注射诱导大鼠急性胰腺炎模型，以氧化苦参碱治疗，大鼠血清淀粉酶活力和胰腺组织病理改变较对照组有明显改善，并能显著降低血清和胰腺内炎性细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α水平，与生长抑素（Somatostatin）治疗组相比较无显著差别。



    上海长征医院 有研究发现氧化苦参碱对肺癌、胃癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖具有抑制作用，表明氧化苦参碱有可能成为防治肿瘤转移的治疗药物。