HBV DNA的 检验, etc.

liver411

以下是引用嚼得菜根香在2006-1-19 17:28:00的发言：

想问问零拷贝是什么意思？

是不是就是没有病毒了？

不是, 是现有技术/试剂/方法检测不到一定数目之下的病毒.

嚼得菜根香

怎么没人回答啊？

嚼得菜根香

、

乙肝小强

不是，结果为0不代表没病毒，而是设备精度问题。例如最小极限值是10的话那么小于10就显示不出来，但是并不代表没有病毒。

一种毒药

嘿嘿

aiguozhezhishi

乱了

haichao-01234

非常好谢谢

一种毒药

如果DNA在7次方和8次方之间反复是怎么回事

liver411

repost:

HBV DNA的 检验, etc. 
谢谢Medline在昨天"HBV DNA检验..."一帖中提到关于HBV DNA 测量检验问题. 刚刚察看 
了一下资料总结如下. 没有提到处请大家再加入/讨论. 谢谢. 
******************** 
HBV DNA 检验: 种类, 指标...etc. 
讲HBV DNA的检验不能不提一下目前常用检验病毒含量的方法. 
目前检验病毒的方法, 除去血清培养基方法, 但HIV, CMV, HBV等病毒很难在培养基中分 
离检验, 大致有三种: 
PCR (polymerase chain reaction 或RT-PCR等), 最常用的方法. 很敏感. 误差大. 价 
钱比较贵. 通常单位用 copies/ml of plasma; 
bDNA (branched chain DNA assay), 也是目前常用的方法. 敏感, 常规化. 结果比较稳 
定. 价钱比较便宜. 通常单位用 units/ml of plasma (pg/ml, fg/ml); 
NASBA (nucleic acid sequence-based amplification), 不常用. 很敏感. 误差大. 工 
时长, 价钱最贵. 通常单位用 units/ml of plasma (pg/ml, fg/ml); 
************* 
就HBV DNA而论, 目前测验HBV DNA时通常要达到两个目的. 一个是定性 (qualitative) 
, 另外一个是定量(quantitative) 
HBV DNA定性的测验注重于HBV DNA的存在, 它通常可以测到低于100copies/ml的病毒存 
在. 当然还有更精确的方法, 通常用于科研实验室中, 可以测到更低的含量. 一般临床 
用的都可以测到1000-2000 copies/ml以上的精度. 定性通常只给阴性, 阳性的结果. 
另外一方面, 定量的测定着重于HBV DNA量存在的多少. 通常用于定量的极限在0.1-5 p 
g/ml (1 pg/ml = 283,000 copies/ml)之间. 同样, 更精确的仪器可以测到0.001-0.00 
5 pg/ml的精度. 正如Medline提到, 现在, 特别是国外常用 fg/ml 为单位. copies/ml 
 比 fg/ml, pg/ml 单位更小. fg/ml, pg/ml 显示定量比 (?) X 10?易懂不容易错. 
关于 copies/ml, pg/ml, fg/ml的换算大致如下: 
Picogram: 1 pg = 10-12 g= 10-9 mg= 10-6 mg= 10-3 ng= 1 pg= 103 fg 
Femtogram: 1 fg= 10-15 g= 10-12 mg= 10-9 mg= 10-6 ng= 10-3 pg= 1 fg 
1 pg/ml = 283,000 copies/ml 
HBV DNA正常指标 
HBV DNA的正常指标或标准可以说是"不能100%设定的." 
定性测量的阳性通常说明病毒容易传染给他人, 阴性说明不容易传给他人. 一般讲血中 
测到少于1000copies/ml一下可为阴性. 
定量测验, 因为结果是数字的, 而不是"高低," "阴阳," "正常/不正常," 也就比较麻烦 
. 确定正常值指标一定要知道所做实验的 "参考范围" (reference range). 参考范围是 
因测验的仪器, 方法, 试剂, 病人年龄, 性别, 条件等而定的. 如, 目前一般生产应用 
的Ultra Sensitive Quantitative CR (高灵敏度定量PCR) 法的测验参考范围是在: 
Less than 0.001 pg/mL 
Less than 2.3 log copies/mL 
Less than 200 copies/mL 
Note: The reportable range is 0.001 to approximately 700 pg/mL, which is app 
roximately equivalent to 2.3-8.3 log copies/mL (200 to 200,000,000 copies/ml 
). 
就是说这种方法可以测到参考范围是在0.001 到 700 pg/ml间, 约合在2.3-8.3 log 拷 
贝/毫升(200-200,000,000 拷贝/毫升)间; 但是不同方法, 仪器, 批量这个范围不同而 
正常值(对照)也就不同. 现在技术先进, 人们可以在大量生产时人为地把这个范围弄稳 
定/固定. 
此外定量是根据拷贝/毫升决定多少而定. 它只有量的定性! 只要测得到就是阳性, 不是 
在一个病毒含量浓度没病, 一个含量有病, 何况测不到也不能说没病了 (下面细谈). 
所以要想知道结果的正确与否, 含量高低等应该和所做DNA单位索取所用方法及仪器的参 
考范围及标准值或正常对照值. 
查不到病毒DNA(Undetectable DNA)是不是就说明疾病治愈, 不感染了? 
查不到病毒的DNA不能说明已经不感染疾病, 或者是治愈了. 查不到病毒可能是因为现有 
仪器和水平不能测到更精确程度. 目前很好的仪器可以测到20copies/ml之低血中的病毒 
存在. 但是就是低于20拷贝还是有病毒存在在那里, 而且病毒可能存在除血清以外的液 
体, 细胞等中. 病毒变化是以log (10的次方)计算的, 半个log变化都属于轻微的. 
测验HBV DNA的一点建议 
一个有经验的医生, 第一次给病人测定DNA, 用药或检查前, 都会用两种不同的方法确定 
病毒的底线. 之后, 如果没有特别误差, 最好是沿用一种方法. 这样可以比较准的记录 
病毒量的变化. 不会因为今天在地坛做的和下次在协和做的结果看起来离谱 (可能方法 
, 参考范围, 仪器不同). 医生也是一样, 最好固定. 不然每个医生不同想法 (不过想法 
一样就坏了). 最后弄得患者不肝昏迷也要脑雾了. 当然第二, 第三位医生的会诊建议是 
不可以忽略的. 
废话了半天, 希望有用. 欢迎讨论补充. 
谢谢阅读. 
参考: 
Lab Test Online 
HIV ositive 
Arup Lab

liver411

1g ＝1000mg
1mg＝1000μg
1μg＝1000ng
1ng＝1000pg
（ng比pg大）