学术讨论-治疗性乙肝疫苗研究及进展

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本贴仅供学术研究讨论.

KEYWORD:Therapeutic vaccines  Hepatitis B

国内外都有很多研究单位都在搞治疗性乙肝疫苗的研究.目前国内SFDA批准进行2期临床研究的有以下几个单位.

1。（该药下文简称:KT60)是解放军第458医院（广州空军医院）全军肝病中心的张宜俊教授和深圳康泰生物合作搞的治疗性疫苗,成份与康泰生物生产的预防用疫苗一致，同属于蛋白疫苗，HBsAg设计到生产技术都从美国默克公司引进的.与普通预防用疫苗区别是治疗性疫苗在铝含量不变的情况下把HBsAg浓度改为60ug/ml，普通预防用疫苗通常为5ug/ml或10ug/ml，葛兰素史克（GSK）公司生产的安在时预防疫苗剂量是20ug/ml。60ug/ml的剂量为实验室优选确定的剂量，并且采用低铝和康泰自有的超低硫柳汞专利技术（该技术与效果无关，但提高应用安全性,康泰目前已实现无汞生产），目前两者均在研究比KT60更为优秀的药物。

2.（该药下文简称:YK）是闻玉梅院士的治疗性疫苗(乙克),简单讲就是HBIG抗体和HBsAg抗原大概6比3混合,佐剂同普通疫苗一样是氢氧化铝,即疫苗+HBIG的复合.属于蛋白疫苗.
（该药下文简称:YK-DNA）闻玉梅同时有研究DNA疫苗,简单讲就是疫苗+HBIG+DNA质粒3复合，但还没批准进行2期临床,可能还没申请.

3 。(该药下文简称:TCB)是第三军医大学全军免疫研究所吴玉章教授的多肽疫苗通过仿乙肝抗原的某些肽链,诱导细胞产生抗体.同是人工合成,计算机辅助设计肽段，吴玉章使用了先进技术对其优选有效表位，多肽疫苗研制很艰辛,就连吴玉章本人也讲"局外人很难想象其中的酸甜苦辣."

以上3个批准进行2期临床研究的乙肝治疗性疫苗,都不是DNA疫苗.此外SFDA还批准了一个DNA疫苗.

4..(该药下文简称:GY-DNA)中国研究乙肝治疗性DNA疫苗的有很多单位,但目前只有同是解放军第458医院（广州空军医院）全军肝病中心副主任、主任药师陈光明带领的科研协作组研究的治疗性DNA疫苗获得批准进行2期临床研究.

临床试验进度

KT60     > 2期临床试验即将结束.

YK       > 2期临床试验结束,评估中,专家的评估意见，将在2007年上半年出具。

TCB      > 2期临床试验还有数月结束.

GY-DNA   > 刚刚批准备开展2期临床试验.

1.目前已肯定以上提及的四个治疗性乙肝疫苗对乙肝病人都有一定效果,能一定程度上清除病毒.

2.就和现有的抗病毒药物一样,能一定程度上清除病毒不等于特效药.

3.已明确KT60和乙克(YK)不是特效药,对乙肝起辅助治疗的作用.

4.TCB估计能达到现有抗病毒药物的水平,具体如何,能否超越现有抗病毒药物,尚需等临床进一步验证.

5.GY-DNA,最值得关注的药物,现有抗病毒药物不能彻底清除病毒,主要是因为其不能清除cccDNA.

而GY-DNA

>有一项研究指DNA疫苗能清除DHBV(鸭HBV)cccDNA,

>ancholi等证实DNA疫苗能促进IFN-γ及TNF-α的分泌，降低感染了HBV的黑猩猩体内的cccDNA，在较长时期内抑制HBV DNA的复制

>2001年日本愛媛大学医学院  "<东京爱情故事>男主角完治的故乡就是愛媛哦"  Oka 等报道应用 pCAGGS (S)和pCAGGS (S+preS2 )质粒分别给 15 只HBV Tg 小鼠一次性肌肉注射免疫 ，结果 93 % HBV Tg 小鼠 HBsAg 发生血清转换 ，27 % HBV Tg 小鼠产生抗-HBs(第二项阳性!)Anti-HBs was detected in 4 out of 15 HBV-Tg mice at 12 weeks after vaccination

效果预期分析(本人初中毕业,不是医生,仅供参考)

KT60<YK<TCB<GY-DNA

(PEG-INTRON)Peginterferon alfa-2b   <>   (Pegasys)Peginterferon alfa-2a   <   GY-DNA

更新中...

http://www.hbvhbv.com/forum/dispbbs.asp?boardid=27&replyid=1121408&id=607481&page=1&skin=0&Star=22

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乙肝疫苗、MERCK、中国及为什么一定要四十年

今天研习一个案例的时候，有一点题外的感想。

因为这个案例和乙肝疫苗有关，所以先问点这方面的问题。不知道看这篇文章的人，有多少人打过乙肝疫苗？有多少打过疫苗的人知道疫苗的意义？有多少打过疫苗的人知道疫苗从哪来？

这是一个关于MERCK制药公司的案例。1978年，MERCK需要决定是否继续研制一种新药，这种新药能治疗RIVER BLINDNESS，一种在非洲地区广泛传播致使800万人染病，并使其中200万人失明的疾病。MERCK能确定的是治疗效果，不能确定的是因为患者都是穷人，即使有药，他们也未必买的起。换句话说，对MERCK，即使新药研制成功，也未必能盈利。是否继续投资研制？

这是一个很实际的案例。后来的发展是MERCK继续研究，然后免费提供给任何需要这种药的患者。不过我不想继续说这个案例了。我想说的是，我在案例的最后一段看到这样一个和中国有关的事情：

基于同样的理由，1986年MERCK决定将一项复杂的疫苗制造技术出售给中国。这种乙肝疫苗将会帮助中国预防肝癌——在那里这是成年人的第二位致病死因。经过协商，MERCK同意将这项技术以700万美元出售给中国，这个数额仅仅是其价值的一个零头。这项技术将会帮助中国人给所有的新生儿免疫。VAGELOS博士相信在三十或者四十年的时间里，当中国和世界市场融为一体时，“中国人会记得是MERCK的疫苗拯救了所有那些可能染病的孩子“。

那700万美元绝对只是个零头，想想美国一种新药的平均研究成本是十几亿美元，研究期是十几年。可能有人觉得不太好理解，因为新药研究不是科学灵感之类的事情吗？确实是，可是，更有一种严格的程序规定了最终上市的新药是在数百种候选配方中胜出，并要先后经过动物实验两三年，自愿者人体实验两三年，然后经官方批准，而这个批准的比例大概是百分之十左右，最后才能上市。

我自己打过疫苗。我也没有乙肝。即使我不能确定我没有乙肝这种情形是否与疫苗有关，但每当我看到身边的乙肝患者为病所困时，我也觉得我应该还是感谢疫苗。

可是，直到我读到这个CASE，我还不知道原来中国所有的乙肝疫苗都是MERCK的研究成果。我用"MERCK 乙肝疫苗"在GOOGLE里搜了一下，找到一篇关于深圳康泰制药公司的文章。越走越宽的生化之路---访深圳市康泰制药有限公司总工汪恩浩。如果脱离我这篇案例的背景去看那篇文章，会觉得他们还真了不起。可是，可是，他们就是一个生产工厂而已。而且，不谈研制，即使只谈生产，在国内，"因技术、工艺等原因，使国产疫苗稳定性等指标与国外存在较大差距，从而难以获得市场认可"。差距啊！

而且，不仅是技术上的差距，还有精神上的差距。感谢的话没见到一句！

看来博士说的不错，需要三十或者四十年的时间，中国人才会承认感谢。现在才二十年而已。刚好二十年。

关于上面文章作者

用户名：aiaidi 笔名：艾迪 地区： 湖北-武汉

评论人：汪恩浩           2006-07-12 16:57:44

请参考我的文章：刊物名称：出版单位：；发表日期1999年7月如有兴趣，可寄全文。感谢之心还是有的。

一个技术转让的故事：康泰公司的重组乙肝疫苗汪恩浩1989年默克公司（）同意出售他们的重组乙肝疫苗技术给中国，中国政府选择默克疫苗技术有几个理由：深圳是中国的第一个经济特区。康泰相信它成功的主要原因在于深圳市政府的支持，以及公司有关人员（工程师、科学家、经理们）有权自行作出许多关键性的决定。这个项目最终取得成功应归究中方和默克之间友好合作与彼此理解。这次技术转让中没有损失方。当时默克向中国进行技术转让的项目经理李察得8226刚德罗说得好：我们有争论，文化差异和语言障碍，但每一次，我们都提醒项目组内的每一位成员让我们克服这些困难吧，因为这是为了中国儿童的健康。发表日期1999年7月题目：刊物名称：出版单位：

http://aidi.bokee.com/4404193.html

http://cn.chenweiyong.net

宝安区生物医药在建产业化项目
序号 项目名称 建设单位 总投资、建设期及建设内容
2 流感病毒亚单位疫苗生产基地 深圳市海王英特龙生物技术股份有限公司 项目总投资：18000万元；建设期：2004年5月至2006年5月；建设内容：在深圳市光明高新技术产业园区，建设占地120000平方米流感病毒亚单位疫苗生产基地，达产后，年产量1000万人份。
3 治疗性（重组）酵母乙肝疫苗生产基地 深圳康泰生物制品股份有限公司 项目总投资：19650万元；建设期：2005年1月至2006年3月；建设内容：在深圳市宝安区光明高新技术产业园区，建设总面积27000平方米治疗性（重组）酵母乙肝疫苗生产基地，年产360万支60微克乙肝疫苗。
4 口服基因重配轮状病毒活疫苗项目 深圳康泰生物制品股份有限公司 项目总投资：6200万元；建设期：2005年1月至2005年12月；建设内容：在深圳市宝安区光明高新技术产业园区，建设总面积3000平方米口服基因重配轮状病毒活疫苗项目生产线。年产294万人份口服疫苗。
16 生物包衣种子和菌根种苗的生产示范基地 深圳市芭田生态工程股份有限公司 项目总投资：2800万元；建设期：2005年1月至2005年12月；建设内容：在深圳市“两明”农业高科技农业园区，建设生物种子包衣剂及包衣种子加工基地及菌根菌剂生产及菌根种苗培育基地建设，总占地350亩。
2 三九医药股份有限公司生产基地 三九医药股份有限公司 项目总投资：54000万元；建设期：2003年5月至2004年12月；建设内容：在深圳观澜高新技术开发区建设颗粒剂、软膏、中药粉针等GMP制剂车间及相关配套设施。项目建成后将形成年产值40亿的生产能力。
3 深圳市制药厂医药研发制造基地 深圳市制药厂 项目总投资：25000万元；建设期：2003年6月至2005年12月；建设内容：在深圳观澜高新技术开发区，购买土地50000平方米左右，建立符合GMP标准的现代化制药工业基地。达产后，年产值20亿，销售收入10亿，利润8000万元。
6 北科联中药现代化产业基地 深圳市北科联药业科技有限公司 项目总投资：15000万元；建设期：2003年6月至2004年9月；建设内容：在深圳市光明高新技术产业园区建设固体制剂车间、粉针剂车间、中药材提取及前处理车间等。达产后，年销售收入10亿元。
7 海水网箱及海洋生物制品 深圳市鹏森实业发展有限公司 项目总投资：15922万元；在深圳市光明高新技术产业园区生产海水网箱及海洋生物制品，占地45000平方米。
资料来源：深圳市发展和改革局、宝安区高新办。

http://cache.baidu.com/c?word=&url=http%3A//www%2Ebaoan%2Egov%2Ecn/main/file/article/2338/article%5F35973%2Ejsp&b=34&a=18&user=baidu

http://www.baoan.gov.cn/main/file/article/2338/article_35973.jsp

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http://www.infectcma.org.cn/bbs/dispbbs.asp?boardID=40&RootID=5827&ID=5827`

Coimmunization with IL-15 plasmid enhances the longevity of CD8 T cells induced by DNA encoding hepatitis B virus core antigen.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Retrieve&dopt=AbstractPlus&list_uids=16937447&query_hl=16

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[mp=400,350]mms://winmedia.cctv.com.cn/xinwen30fen/2006/10/xinwen30fen_300_20061023_2.wmv[/mp]

CCTV,新闻联播

http://video.sznews.com/content/2006-10/23/content_470746.htm

以上为媒体报道,不代表本人意见.

感谢Jewooh提供网址

http://vsearch.cctv.com/play.jsp?storyref=OpenVWMVPath_xinwenlianbo/2006/10/xinwenlianbo_300_20061023_10.wmv&ref=OpenVWMVPath_CCTVCOM/xinwenlianbo/2006/10/xinwenlianbo_300_20061023_10.wmv

动物试验结果表明疫苗能够清除动物体内病毒，也就是说有可能使人体肝炎病毒由阳性转为阴性

 

http://tzwzjss.bioon.cn/user1/3570/archives/2006/35923.shtml

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http://www.gzkj.gov.cn/noticeboard/newsDetail.jsp?infoId=69597

2006年粤港关键领域重点突破项目

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留位

http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=146&id=2081035&sty=3

http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=75&id=2475025&sty=3

一、基因枪：以氦气为动力，以干电池为起动电源，把DNA微弹或颗粒药物直接发射到人体或动物的细胞、组织或器官。作为Ⅲ类医疗器械管理。

Kimball Research Institute of the New York Blood Center-DNA疫苗对高病毒数黑猩猩治疗失败.(那只猩猩真可怜,3次都失败)

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Retrieve&dopt=AbstractPlus&list_uids=16764675&query_hl=16

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www.jiudai.com

www.duominuo.com.cn

http://www.bjwansai.com.cn/products/development.html

http://www.gzkj.gov.cn/noticeboard/newsDetail.jsp?infoId=69717

深圳市清华源兴生物医药科技有限公司

http://search.most.gov.cn/radar_detail.do?id=3176342

http://gdlab.gdstc.gov.cn/labintroduce/medical/bdxgy.htm

http://www.hbvhbv.com/forum/viewthread.php?tid=621261 ---张宜俊 KT60
http://www.hbvhbv.com/forum/viewthread.php?tid=468986 ---张宜俊 KT60
http://www.hbvhbv.com/forum/viewthread.php?tid=519088 ---闻玉梅 YK 乙克
http://www.hbvhbv.com/forum/viewthread.php?tid=607707 ---吴玉章 TCB

以上有关的媒体报道,不代表本人意见.

以上有关的媒体报道,不代表本人意见.

http://www.pasteur.fr/recherche/RAR/RAR2001/Ureg-en.html

www.ichorms.com

www.lipoxen.com

http://nybloodcenter.org/index.jsp

http://it.sohu.com/2004/05/18/98/article220159897.shtml

http://www.medscape.com

www.aokoo.com

www.capitalbio.com

很早之前，我分析治疗性乙肝疫苗的时候，我查过数据库，其中有希波的。

天坛苗，IL-2，GM-CSF，TT联合应用。

应该对打破免疫耐受有一定作用。

http://www.hbver.com/Article/yljz/xyyz/200208/1053.html

http://www.hbver.com/Article/ygfz/zlyg/200507/3946.html

http://paper.people.com.cn/scb/html/2006-12/06/node_192.htm

http://paper.people.com.cn/scb/html/2006-12/06/content_12073857.htm

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rts6666

顶

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细述乙肝史
    乙型肝炎：一种消耗性疾病

    病毒性肝炎是最常见的传染性疾病之一，在全世界范围内每年有一千五百万人死于肝炎。在有文字记载的历史记录当中，乙肝病人均出现皮肤发黄,这使得这一疾病很容易被人们识别出来。其它一些急性肝炎的特征性临床表现有：高热、寒战、疲劳、呕吐、食欲减退及腹痛。即使有些患者患的是致命性的重型肝炎，但往往上述临床症状在几周后减轻。

    然而乙型肝炎在临床上并不只是表现为急性经过。许多慢性肝炎患者虽然没有急性肝炎的临床表现，但也可出现体重减轻、疲劳腹疼、黄疸及其它肝损害的临床表现。在这些慢性肝炎病例中，病程可持续15年以上，在这个过程当中肝组织不断受到损伤，最终病人常死于肝功能衰竭或肝癌。此外在全世界范围内还有大量的病人只是乙肝病毒携带者，即这些病人的免疫系统可以容忍这些病毒的存在而不是将它们视为异物。这些病毒携带者可在长时间内无任何临床症状，但实际他们却在不知不觉中传染给其他健康人。病毒携带者孕妇可将病毒传播给她的孩子，这些孩子也自然成为病毒的携带者，因为这些病毒已经被他们的机体视为自身的一部分。

    虽然人们知道肝炎这一疾病已经几个世纪了，但在二次世界大战前医生们还不知道它是由什么病毒引起的。但在当时这一疾病已被视为具有传染性，因为它常发生于人口密度大、卫生条件差的地区，但是它是如何传播的仍然是个谜。

    在20世纪40年代，一位专门从事肝疾研究的英国医生F.OMacCallum最先解开了这个谜。他最开始并不是研究肝炎，而是研究黄热病，当时这一由蚊子传播的疾病造成了非洲和南美洲大批士兵的死亡。当时他负责研究生产黄热病疫苗，后来有一个现象令他大为不解，即许多接种了黄热病疫苗的士兵在几个月后出现肝炎。在黄热病疫苗中含有人血清，F.OMacCallum想起在医学文献报道中曾看到一些肝炎病例也是在接种了含有人血清的疫苗后发生的，他还了解到一些糖尿病和老年病患者在使用了未消毒的注射器后，也出现肝炎，这些未消毒注射器的针头上带有少量的人血。由此，F.OMacCallum考虑到是否在人的血液当中含有引起肝炎的病毒。

    于是在二次世界大战期间及结束后短短的时间里，F.OMacCallum及他的同事们对一批志愿者进行了一系列的观察研究，研究结果证实了他的假设，同时还搞清楚了肝炎不仅可以通过血液传播，也可通过其它途径传播。MacCallum将由被少量粪便污染的食物和水经消化道传播引起的一型肝炎称为甲型肝炎，由污染血液经输血传播引起的一型肝炎称为乙型肝炎。

    从血液中寻找线索

    在接下来的十几年当中，科学家们在各自的实验室中试图寻找到引起这两型肝炎的病原微生物，然而，他们的工作没有任何结果。科学家们怀疑这些罪魁祸首可能是病毒，因为在实验中发现它们可以通过非常小的微孔，可是他们却不能将这些病毒分离培养出来以供研究。到了20世纪60年代中期，肝炎研究陷入了一个困境。

    之后一个当时并非在该领域从事研究工作的人使该项研究走出了困境，他就是BaruchBlumberg，一个从事内科学和生物化学的专家，他感兴趣的是一些比较基础性的问题——为什么有些人易患某种疾病。

    在20世纪50年代早期，BaruchBlumberg还是一名医学生，他在苏里南研究象皮病，该病是热带地区很常见的一种寄生性疾病。研究中发现，在他工作的小镇里，即使每一个人都生活在相同的生活环境中，仍然有些人种很容易得象皮病。他开始怀疑这种对疾病易感性的差异可能是由不同的基因决定的，然而在当时这些用于研究疾病和基因之间关系的现代分子生物学手段还没有发明。当时的科学家们正试图通过检测特殊的血液蛋白成份来寻找遗传差别，从而解释疾病的易感性与基因之间的关系，这些血液中的特殊成份，即多形核白细胞，被认为可以一代一代遗传保留下来，它们在保护身体健康、抵御疾病上起了很大的作用。

    20世纪50年代末，BaruchBlumber为了研究具有遗传变异性的血液蛋白成分，开始从世界各地收集血液样本。经过几年的努力，他终于确定了最先在澳大利亚土著人血液中发现的抗原性物质为乙肝病毒表面抗原（HbsAg）(图中为BaruchBlumberg)科研人员已经在血液蛋白中发现了大量的多形核白细胞，例如决定A、B、O血型的不同血蛋白，但是，这一研究领域十分广大，且有许多问题没有解决，相信经过大量研究，定可打开疾病易感性之谜。在50年代末期，Blumberg开始在血液蛋白中寻找新的多形核白细胞。从那时起他开始收集世界各地人的血样。

    60年代初期，Blumberg在国家健康研究所（NIH）工作，在那里他与生物化学家AnthonyAllison合作，共同研究寻找一种快速、简易检测血液蛋白的方法。研究者们推测，当患者体内接受了大量异体血液之后，机体当中的血液蛋白就会由于遇到了大量异体血液蛋白而刺激自身的免疫系统发生免疫反应，即产生抗体，来对付外来的异种蛋白——抗原。他们采用凝胶扩散技术，该技术利用免疫原理，利用抗原抗体的特异反应来检测血液中少量的异体蛋白。凝胶扩散技术涉及到蛋白和抗原抗体复合物在胶内扩散的过程。这项技术可以检测免疫系统对发现蛋白质中微小差别的能力和新的抗原抗体的反应凝胶扩散实验结果。首先，科研人员在玻璃片上涂上明胶，中心部滴加曾多次接受输血患者的血清样本。在这个样本周围滴加正常人未接受输血者的血清。所有的血清样本均通过凝胶缓慢进行扩散，如果正常人血清当中的某一成份与患者血清样本中的抗体发生反应，即会出现一条明显的白线，表明抗原、抗体复合物的量较大。这一结果有二种提示：1、患者血清当中已含有某些抗体，该抗体是在以前接触到抗原时形成的。2、一个人血清当中的某种成份已能足够做为抗原引起他人的免疫反应。

    所有的血清样本均通过凝胶缓慢进行扩散，如果正常人血清当中的某一成份与患者血清样本中的抗体发生反应，即会出现一条明显的白线，表明抗原、抗体复合物的量较大。这一结果有二种提示：1、患者血清当中已含有某些抗体，该抗体是在以前接触到抗原时形成的。2、一个人血清当中的某种成份已能足够做为抗原引起他人的免疫反应。

    从血液样本中寻找突破

    与此同时，一个人的血液可以同其他人血液发生反应这一实事也引起了另一个人的兴趣，他就是在国家健康研究所血库工作的血液专家HarveyAlter。Alter试图找到一些病人在输血后会出现发热、寒战、皮疹的原因，他认为这些患者可能是在接受输血之后机体对异种蛋白（抗原）发生了免疫反应。当Alter听说Blumberg正在研究接受输血患者的免疫反应后，就前去拜访，二人决定开始合作。

    Blumberg和Alter使用凝胶扩散技术，用曾多次接受输血患者（如血友病、白血病患者）的血液样本与Blumberg从世界各地收集来的血液样本进行反应。1963年，经过几个月的实验，研究者们发现，一位住在纽约的血友病患者的血清可与一位居住在世界另一个角落里的澳大利亚土著人的血清发生反应。这一发现本身很平常，在实验中，这位患者的血清可与其他很多人的血清发生反应，从这一点上可以看出，这位患者在接受输血过程中已经接触到了很多常见的抗原。当然到目前为止还不能得出明确的结论，是哪种或哪些种抗原引起的反应。在利用澳大利亚土著人血清所做的特殊实验中发现，只有1/24的血友病患者血清可与之反应。这一结果很令人兴奋，因为它提示人们是某一种罕见的抗原引起的反应。到底什么是抗原？既然这种抗原很罕见，它就不会是人血液基因变异造成的，相反，这种抗原很有可能是通过传染源得到的。

    一直被这一问题困扰着的Blumberg和Alter虽然还没有直接研究乙型肝炎，但是他们正在朝这个方向努力。他们将有问题的血友病患者的血清与成千上万个血清样本进行反应，发现在1000个正常的非血友病患者的美国献血者的血清当中，只有一个与血友病患者血清发生反应。而每10个白血病患者的血清中就有一个与血友病患者血清发生反应。在他们的实验中还发现澳大利亚土著人血清中的抗原可与多数白血病患者血清发生反应，更重要的是，这种抗原很少出现在正常人的血清中，但是却常出现在血友病和白血病患者的血液中。研究者们将这一神秘的蛋白命名为澳大利亚抗原（Aa），以表示它是在澳大利亚土著人当中发现的。他们设想在澳大利亚土著人的血液中有一种不知名的抗原，它正在与血友病和白血病患者血清中的抗体发生着反应。

    惊奇的发现

    Blumberg认为他可以检测到一种具有遗传性的血液蛋白多形核白细胞，这种白细胞可影响人类对白血病的易感性，但同时他也认为还有其它的一些因素（包括感染因素，如病毒）可以说明Aa与白血病之间的关系。为了能够说明Aa与白血病之间的关系，他开始在患有唐氏综合症孩子的血液中检测是否含有的Aa，因为这些孩子很容易患白血病。令人惊讶的是几乎1/3唐氏综合症的孩子血液中有Aa。之后Blumberg开始检测不同年龄和居住在不同地区的唐氏综合症患者的血样，他发现新生儿Aa检测是阴性，而居住在人群较密集环境中的孩子，其检测结果常为阳性，这一结果提示Aa与传染有关。

    正象Blumberg所预测的血液蛋白多形核白细胞的作用一样，被检测为Aa阴性的孩子，在复查时仍是阴性，而检测为Aa阳性的孩子复查时仍是阳性。但是在1966年，Blumberg，WThomasLondon和AltonSutnick发现一个12岁的唐氏综合症男孩在他首次发现血液中含有Aa后的几个月后，血液中的Aa消失了。这个男孩的血样在凝胶扩散检测中确实查出有Aa，而且他还有肝炎症状。这一巧合说明，与其说Aa与遗传性血蛋白多形核白细胞有关，不如说与肝炎有关。循着这一假设，研究者们立即开始进行研究。在检测肝炎患者和非肝炎患者的血清时发现，肝炎患者血清中Aa阳性率高于非肝炎患者。正在这时，Blumberg实验室中的技术员感到身体有些不适，她想是否是得了肝炎，她给自己做了Aa检测，结果发现是阳性，之后她果然出现肝炎症状，因此她就成了第一个用Aa检测法诊断出病毒性肝炎的患者。正是这位技术员的生病为这一假设的成立奠定了基础。

    在60年代中期，在得知了Blumberg的重大发现之后，纽约血液中心的病毒学家AlfredPrince开始一项能够最终确立Aa与肝炎之间关系的实验。已知在10个接受输血的患者当中至少有一个人患有肝炎，Prince还要进一步确定在没有任何临床症状出现前的潜伏期时血液中是否也有Aa，如果有的话，Aa就可认为是引起肝炎的病毒的一部分。于是，Prince开始在纽约血液中心定期收集一些病人的血清样本并把它们冷冻起来。终于在1968年，他听说一个被他收集血液样品的患者出现了明显的肝炎症状，于是他检测该病人的血液样本，发现在早期的样本中没有Aa，而在他发病前几周中的血液样本中发现有Aa。由此可见Aa确实是参与了乙型肝炎的形成。

    大约是在同一时期，东京大学的KazuoOkochi的实验结果表明Aa阳性的血液与Aa阴性血液相比更易将肝炎传播给受血者。意大利新安娜大学的AlbertoVierrucci在同一年进一步证实了Prince和Okochi的实验结果。1970年伦敦Middlesex医院的D.S.Dane和他的同事们以及纽约的K.E.Anderson和他的同事们利用电子显微镜发现在Aa阳性患者血清中有看上去像病毒样的颗粒，他们同时还发现在肝炎患者的肝细胞中也有相同的颗粒。

    到1970年底，越来越多的事实都说明这样一个相同的结论：Aa做为肝炎病毒的一部分引起乙型肝炎的发生（这时已将Aa命名为HAA即肝炎相关抗原；现在又称为HBsAg，即乙型肝炎表面抗原）。由于白血病及血友病患者需要经常输血，因此他们就有更多的机会接触到被乙肝病毒污染的血液，故血液中HBsAg的阳性率较高。

    血液筛查——一项革命性的举动

    乙肝病毒表面抗原的发现震惊了临床医生。在60年代的美国，绝大多数血液来自于有偿献血者，而这些人要比普通人群更易患乙肝。做为这一现象的后果就是出现很多输血后性肝炎。一些研究表明，由于大的外科手术需要接受输血的患者当中，有一半出现肝炎。医学委员会认识到，如果能够采用适当的方法对已被HBsAg污染的血液进行筛查，就可大大减少输血后肝炎的发生。

    Blumberg和Alter曾使用的凝胶扩散法检测血中的HBsAg的方法，对于精确的血样筛查已经显得不十分敏感。令人欣慰的是，这时出现了两位好奇心极强的科学家，他们就职于Bronx老兵医学管理中心，50年代初期，正是由于他们研究如何测量糖尿病患者血液中胰岛素含量，而发明了测量血液中微量蛋白和抗体技术。胰岛素是由胰腺分泌的一种激素，糖尿病患者表现为胰岛素缺乏。而糖尿病患者的胰岛素是究竟如何产生的？这一问题一直困扰着RosalynYalow和SolomonBerson两位科学家。为了研究糖尿病患者的胰岛素在进到血液循环中发生了什么变化，他们将带有放射活性物质的胰岛素注入人体内，以便于观察。研究中发现，这些注入到体内的胰岛素很快与机体免疫系统所产生的抗体结合在一起。这一发现促使他们发明了这一新的技术方法即放射免疫分析法。该方法利用被检物与抗体或蛋白相结合的原理，可检测到很微量的物质。与凝胶扩散相比，此法不仅更简单，而且敏感性是它的1000倍，正是由于发明了放射免疫分析方法这一技术，Yalow获得了1977年诺贝尔生理或医学奖。

    许多商业公司和科研单位采用放射免疫分析的方法来研制能够精确测定血液中HBsAg的试剂盒。1972年美国法律正式规定每一个献血者的血样必须经过HBsAg的筛查，所有血库对每一个血样进行检查，这样输血后乙肝的发生变得十分罕见了。此项举动为美国每年节省了5亿美元的医疗支出。

    关于那些病毒颗粒

    乙型肝炎病毒的发现不仅可以保护那些接受乙肝病人血液的患者，也可以保护所有的人远离该病。60年代末，在FOXchase癌症中心（FCCC）工作的Blumberg同免疫及病毒学家BarbaraWerner、电子显微镜学家ManfredBayer，以及分子生物学家LawrenceLoeb共同描述了在电子显微镜下观察到的从HBsAg阳性患者血液中分离出来的小颗粒。有些颗粒是完整病毒，有些却不含有核酸——即能够引起疾病和传播的基因或基因组。-

    一些实验显示这些颗粒可以引起保护性免疫。1971年，纽约大学传染病专家SaulKrugman发表了一篇论文，描述说了他的一个偶然发现。他将已被乙肝病毒污染的血液加热处理后，再注射给病人，病人即可不再感染乙肝病毒。虽然被Blumbery分离出的这种不带有核酸的病毒颗粒不能致病，但是许多实验证明，它们可以刺激免疫系统产生抗体，来对抗病毒的感染。Okochi和他的同事们发现血液中含有HBsAg抗体的人与血液中没有该抗体的人相比不易发生输血后性肝炎。

    HbsAg可以刺激机体免疫系统产生抗体，从而保护机体免受肝炎困扰，这一事实激发了Blumberg以及同在FCCC工作的IrvingMillman提出这样一个想法，即从乙肝病毒携带者的血液中获取病毒颗粒制备乙肝疫苗。这是一个非同寻常的想法，1969年以前所有疫苗的制备均采用如下三个方法之一。一种方法是将整个病毒或细菌灭活后制备成疫苗。另一种方法是采用一种致病力弱的菌株，这种菌株可能会引起轻微的或不引起任何临床症状，当接种了这种疫苗后可以防止较严重类型的发生。此外，疫苗还可以从整个病毒制备，也可达到预防的目地，但是还没有一种疫苗是利用人类病毒一部分即亚单位来制备的，FCCC就这一技术方法于1969年提出申请专利。

    MauriceHilleman以及他在Merck治疗研究所的同事们认为从病毒颗粒即亚单位制备疫苗具有重要的意义。1971年，Merck研究所从FCCC处获准进行乙肝疫苗的研制。经过几年的大量研究和实验，终于从HBSAg携带者的血液中研制出乙肝病毒亚单位疫苗。1980年纽约血液中心的WolfSzmuness和在Merck研究所工作的同事证实这种疫苗可以保护病人不受乙肝的危害，其有效率达90%，并且没有副作用，到1981年，这种亚单位病毒疫苗已经可以普遍使用。

    在另一个独立的动物学基础研究中，由美国农业部HowardBachrach领导的一组科研人员于1981年首次报导了有效的用于人类或动物的蛋白疫苗，这是第一个病毒蛋白疫苗，该疫苗用于预防足口病。

    大量需要乙肝病毒携带者的血液以及这些血液很容易被其它病毒污染等问题的出现，使大批量乙肝疫苗的制备受到了阻碍。基于对这一问题的兴趣，1977年在加利福尼亚大学工作的WilliamRutter和他的同事们从Merck研究所获得了一些含有病毒的血清，他们提出采用重组技术由病毒颗粒制备乙肝疫苗。这一新的工艺可确保疫苗不受其他病毒污染，同时可以大批量生产。

    由这种方法制备疫苗的概念是一种全新的概念，在克隆出乙肝病毒并获得HBsAg的基因序列后，Rutter和他的同事们采用重组技术，利用各种不同的生物系统来生产病毒颗粒。然而利用这种方法制备细菌没有成功。之后，在1980年和1981年Rutter和华盛顿大学的，曾利用酵母细胞制备出模型系统的BenjaminHall以及他的同事们进行合作研究。Rutter和Hall成功地利用改变基因的酵母细胞生产出纯净的HBsAg颗粒。Rutter又和他的同事们成立了Chiron公司，一方面通过与Merck研究所契约的关系继续生产HBsAg疫苗，同时通过重组技术发展其它的医学治疗方发。在Merck研究所Hilleman利用采用重组技术由酵母菌生产的HBsAg颗粒，（而不再是从血浆中制备的抗原）生产效率更高的乙肝疫苗。该疫苗是同类产品中的第一个应用于人的疫苗，1986年该疫苗通过美国食品和药物管理局的鉴定，并开始普遍使用，至此距肝炎病毒首次被发现已经过了9个年头。

    更进一步的研究发现乙肝在人群之间的传播不只是通过血液，还可以通过性接触传播，或是由一个乙肝病毒携带者的母亲把病毒传播给新生儿。1975年，PalmerBeaslerg和他的同事们在台湾的一项研究表明，有2/3乙肝病毒携带者的母亲的新生儿是乙肝病毒携带者。乙肝病毒疫苗可以防止人们遭受各种类型肝炎病毒的侵袭。由于婴幼儿在感染乙肝病毒后，可能会成为该病毒的终身携带者，因此，目前包括美国在内的85个国家已经采取了给新生儿进行乙肝疫苗的预防接种的措施。

    一种可预防肝癌的疫苗

    肝癌是世界上较为常见的恶性肿瘤之一，特别是在亚州一些地区更为常见。由于该病只有发展到晚期时才容易被发现，患者常常在诊断一年内死亡。在全世界范围内约有60%以上的肝癌发病与乙肝有关，同时一项研究表明，慢性肝炎病毒携带者的肝癌发生率是非携带者的100倍。因此乙肝疫苗不仅可以降低肝炎的发生率，同是还可以减少肝癌的发生。研究表明，乙肝疫苗接种措施在一些地区已大大减少了病毒携带者的数目，虽然这还需要一个较长时间的观察，但在台湾的一项10年研究结果表明，肝炎疫苗的使用已经使儿童中的病毒携带者从10%下降到1%。研究者们希望这一巨大改变也将导致儿童中肝癌发病率的下降。

    其他类型的肝炎病毒

    在成功地对乙型肝炎病毒研究的鼓舞下，许多研究者们又将研究目标转向甲型肝炎病毒及其它类型的肝炎病毒。1973年在NIH工作的StephenM.Feinstone和他的同事们用电子显微镜在病人的粪便中发现病毒颗粒。大约是在同时，Merck研究所的Hilleman和他的同事们描绘出了人甲型肝炎病毒的特征，这种病毒正是Feinstone从感染的狨（猴子的一种）肝组织当中分离纯化出来的那种病毒。到1996年，Hilleman和他的同事们已经研制出一种减毒的甲肝疫苗（该疫苗直接由病毒生产出来，但此病毒已经修改，不会引起发病），此疫苗已通过鉴定，正普遍使用。另一种甲肝疫苗正在SmithklineBeecham的实验室中研制。

    1978年，意大利胃肠病专家MarioRizzetto和Georgetown大学的分子病毒学家JohnGerin共同发现了δ型，即丁型肝炎病毒。这种罕见的病毒依赖乙肝生存，并可引发严重的乙型肝炎发生。1983年，莫斯科脊髓灰质炎和病毒性脑炎研究所的MikhailBalayan发现了戊型肝炎病毒。和甲型肝炎一样，戊肝也是由污染的水或食物经消化道传播引起的，并可引起局部地区的流行。

    既使有了血液筛查，仍有许多患者患有输血后性肝炎，此种肝炎为非甲非乙型肝炎。科学家们怀疑还会有其它种类的肝炎病毒经血液传播。于是他们想出了这样一个对策—即先将非甲非乙型肝炎患者进行隔离，然后对他们的血液进行检查。在经历了这些里程碑式的研究之后，科学家们希望有一天能研制出一种复合式疫苗。

    然而非甲非乙型肝炎病毒似乎非常不稳定，难以捉摸。于是1983年Chiron公司出资支持一项大规模的研究计划来解决这一难题。这项研究汇集了很多科学家，有疾病控制与防治中心的DanielBradleg,有Chiron公司的GeorgeKuo,QueLimChoo及他们的同事们。Bradley一直利用黑猩猩进行研究，他让黑猩猩感染非甲非乙型肝炎，现在他已将感染黑猩猩的血清提供给Chiron公司。1989年MichaelHoughton和他的同事们利用分子生物学技术克隆出丙型肝炎病毒，并证实80%—90%的非甲非乙型肝炎是由丙型肝炎病毒造成的。这一研究成果为感染病原的发现开辟了一个新的领域，这是科学的一项巨大进步。因为这种未知的病原的发现不同于其它肝炎病毒的发现，它们并没有在显微镜下看到，也没有培养出来，或是通过免疫学方法发现，而是利用分子生物学的方法找到了它们的基因序列。从1990年开始，随着高敏感性、高效性的丙肝病毒血液检查方法的应用，由输血导致的输血后性肝炎已下降到1/100，000在过去的30年中，对肝炎病毒的发现和研究，以及血液筛查和疫苗的使用，使科学家坚信病毒性肝炎将很快被人类所控制，它将永远不会象过去的几千年那样对人类造成威协。

    乙肝研究大事记录（下面列出了乙肝研究过程中一些重要的研究成果）

    公元前2000年:首次记录肝炎的流行

    1947年：F.O.Maccallam通过对肝炎病人志愿者的研究，提出由污染食物、水传播引起的甲型肝炎和由血液传播引起的乙型肝炎。

    1963年：BaruchBlumberg和HarveyAlter发现了Aa（澳大利亚抗原）（后改称HBsAg）。

    1967—1968：Blumberg,KazuoOkochi,AlfredPrince,AlbertoVierrucci及他们的同事们报道了Aa参与乙型肝炎的形成。

    1969年：IrvingMillman和Blumberg提出一种新的概念并通过FoxChase癌症中心获得使用Aa制备乙肝疫苗的专利

    1970年：D．SDane用电子显微镜发现了血样中的乙肝病毒颗粒。

    1972年：美国法律通过要求所有献血者要事先进行血液筛查。

    1973—1974年：StephenFeinstone及MauriceHillman和他们的同事们发现并描述了甲肝病毒。

    1975年：WolfSzmuness和Hilleman及他们的同事们开始检测乙肝疫苗

    1977年：MarioRizzetto和JohnGerin发现了丁型肝炎病毒

    1980—1981年：由Hilleman和他的同事们研制的由血清乙肝病毒亚单位制成的疫苗被证实十分有效，并通过鉴定，广泛使用

    1983年：MikhailBalayan发现了戊型肝炎病毒。

    1983—1986年：WilliamRutter和他的同事们从酵母菌中制备出乙肝病毒亚单位疫苗，并通过使用。

    1989年：DanielBradley向Chiron公司提供了非甲非乙型肝炎的黑猩猩的血清；MichaelHoughton和他的同事们发现了一个孤立的病毒，他们公布了这一病毒的基因序列，并将其命名为丙型肝炎病毒。

    1990年：开始对丙型肝炎病毒进行血液筛查。

    1996年：第一个由Merck研究所研制的甲肝疫苗通过鉴定，并广泛使用，另一种由SmithklineBeecham研制的甲肝疫苗被证实有效。

不過，當B型肝炎基因工程疫苗於1986年領到美國食品藥物管理局上市執照時，並未如預期般席捲市場，此乃因新疫苗的價格仍如血漿疫苗般地昂貴（全程注射在美國需費110美元）。然而，到了1990年，由於眾人恐懼血漿疫苗有傳染AIDS的可能性，而終使血漿疫苗退出美國市場。

[此贴子已经被作者于2006-12-16 1:58:50编辑过]

rts6666

我想讨论讨论这个比那个中医要好的多.