| 肝癌转移复发的研究进展与展望周信达
2004-11-29 16:48:09 中华肝脏病杂志，2004年，第12卷 第11期，690
[摘要]
分子生物学的进展，为研究肝内复发灶的细胞起源提供了条件。用HBV DNA整合和p53基因的分析等，证明肝癌单中心与多中心发生约各占半数。多中心发生的预防属病因预防（一级预防），非本文论述范围。目前文献所指的肝癌术后转移复发防治的研究，一般是指原发癌的播散，其核心是肝癌细胞的侵袭性。肝癌转移复发研究的重点主要是转移复发的预测指标（尤其是分子水平的探索），以及转移复发的干预治疗。同时，肝癌转移复发的研究离不开转移模型，因此动物、人肝癌转移模型和细胞系的建立也必不可少。
1. 转移潜能逐级递增的人肝癌模型：早在1982年复旦大学肝癌研究所已建成裸鼠人肝癌模型，但在人体内发生转移的人肝癌细胞种到裸鼠皮下后，却基本上不出现转移。该所经过多年努力，将30例肝癌手术切除标本种植于裸鼠肝脏，获得一株裸鼠人肝癌转移模型，定名为LCI-D20。其肝内转移率、肺转移率和淋巴结转移率均可达100%，其染色体90%为异倍体。免疫组化提示AFP和HBxAg阳性。其高转移性至第120代时仍不变。该研究所还应用LCI-D20模型的肝癌组织，建成高转移潜能人肝癌细胞系，命名为MHCC97。在高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97的基础上，成功地分离出遗传背景相仿的高（MHCC97-H）、低（MHCC97-L）转移人肝癌细胞克隆。最近又在MHCC97-H基础上，通过“自发性逐级肺转移筛选”建成自发肺转移人肝癌细胞系HCCLM3（第3轮肺转移后建立的细胞系）和HCCLM6（第6轮肺转移后建立的细胞系）。随着转移筛选次数增加，癌细胞恶性生物学行为增强。上述转移动物模型和细胞系的研究，为研究肝癌转移提供了宝贵模型。
2. 转移复发的预测指标：文献报道的预测指标包括血中的标志物和对切除标本的检测；在层次上，包括病理水平、细胞水平和分子水平。肝癌转移分子水平研究提示：p16突变、p53突变，p21、c-erbB-2、mdm-2、转移生长因子α（TGFα）、表皮生长因子受体（EGF-R）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体与纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍化内皮生长因子（PD-ECGF）等为肝癌侵袭性正相关因子。而转移抑制基因nm23-U1和KA11、组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）及钙黏素（E-cadherin）和整合素α5（integrin α5）等则为负相关因子。最近，复旦大学肝癌研究所和美国国立卫生研究院（NIH）合作，采用目前国际上最先进的基因芯片技术，在国际上第一次提出促使肝癌转移的基因改变可能发生在原发瘤阶段的观点。这项研究还发现与转移有关的包括骨桥蛋白（osteopontin）、整合素α9（integrin α9）及H-钙黏连素（H-cadherin）、白细胞介素2受体、丝氨酸蛋白酶抑制物5（serine proteinase inhibitor member 5）、金属蛋白酶9（MMP-9）、白细胞免疫样受体亚家族A2和CD37等。其中骨桥蛋白列首位，其相应抗体可阻断这些细胞的侵袭能力。
3. 转移复发的实验性干预治疗：在肝癌转移模型上进行干预治疗的初步研究表明：反义H-ras寡核苷酸、抗CD3/抗HBx的双特异抗体合并淋巴因子激活的杀伤细胞治疗、基质金属蛋白酶抑制剂BB-94、抗肿瘤血管生成的TNP-470、苏拉明、钙通道阻断剂以及VEGF寡核苷酸、肝素等，均有抑制肿瘤生长和转移的作用。在抗肿瘤血管生成方面，血管抑素和内皮抑素引人注目。其它如血小板因子Ⅳ能阻断VEGF的Thalidomide、白细胞介素-12、金属蛋白酶抑制剂Marimastat、Thrombospondin，一氧化氮合酶抑制剂L-NAME等也有抗肿瘤血管生成作用。有报道用抗体-组织因子复合物可使靶区肿瘤血管栓塞。此外，针对抗肿瘤血管的基因治疗（自杀基因和细胞因子基因的联合、腺病毒介导p53等）也有不少研究。大剂量长疗程应用干扰素α，在模拟手术切除后复发的模型中，有明显预防复发的作用，在肿瘤形成后也有治疗作用，且疗效与剂量相关，并证明其作用是通过抑制血管生成。分化诱导剂CDA-Ⅱ（喜滴克）对裸鼠早期和晚期肝癌切除术后的转移复发有防治作用。5-FU的前体药氟铁龙和卡培他滨可被PD-ECFG转变为5-FU，从而达到选择性杀伤肿瘤的作用。这些药物在LCI-D20模型有明显抑制肿瘤生长和转移的作用，其中希罗达的作用比氟铁龙强。而且治疗后癌细胞PD-ECFG的表达明显减弱，从而也抑制血管生成。
4. 展望：肝癌复发转移的研究将建立在生物学、尤其是分子生物学的基础上，肝癌根治性切除后生物治疗可能占重要地位，尤其是提高机体免疫功能方面。对肝癌而言，控制肿瘤血管包括抑制肿瘤血管生成和阻断已生成的肿瘤血管是重要方向。应用基因组学、蛋白组学来研究肝癌转移复发的关键分子及寻找新的基因，可为肝癌发生、发展、转移复发提供有益的启示和新的治疗靶点。鉴于难以通过单一的措施达到目的，综合几种方法同时应用可能是一个方向。
作者单位：200032 上海，复旦大学附属中山医院、肝癌研究所 | 
发表于 2004-12-18 14:13
