BEAM的基于CRISPR技术的管线

tim889

The pgRNA TI was calculated, as previously published, by dividing the number of pgRNA transcripts, measured by the 5′ HBV amplicon in RNA, by the number of cccDNA molecules, quantified by the mid-HBV assay in exonuclease I/III–treated DNA (
14,
15).

tim889

StephenW 发表于 2022-9-21 10:10
"Grudda et al.的supplementary Figure 3中的transcription index已经是normalize by total cccDNA了"

t ...

问你横纵坐标坐标是啥，你告诉我横纵坐标 是 Horizontal and vertical coordinates？！显示你强大的翻译能力？哈哈哈哈

你要是真读了paper，就理解我为啥说那篇commentary中的Marc Ghany和 Anna Lok的观点“多年 NA 治疗后 cccDNA 转录的下降可能是由于核衣壳循环减少和 cccDNA 的细胞内补充。不被这张图支持了。所以说赶紧去读读paper，丰富一下老年生活，不要动不动就跑论坛骂人


至于binding assay，劝你好好把现在的本科生的method in biochemistry读一读。你连binding assay是啥都不知道，我还是很震惊的。正常学过生化的本科生都应该至少知道基于co-IP, gel shift，FRET 以及 size exclusion chromatography之类的方法。我本来的确是想请教下你有没有binding assay，因为我对rep觉得有点好奇和怀疑，因为机理很不明确。但我现在知道你连基本的本科生的课程都没有掌握，以后跟你也没什么好讲，大家level的确差太远，你连我在讲啥都不知道。一天天的就会像泼妇骂街一样骂人是伪科学和骗子。除此之外真的一无是处。

虽然我不知道你学啥的，即便你学过biochem，你那个年代很多技术都没有，我猜FRET你可能都没有听说过吧，因为你那个年代估计连GFP都还没有。你不理解 也正常，但不学无术还要跑来骂街就出洋相了。

tim889

StephenW 发表于 2022-9-21 08:32
可悲的是humanized mouse没有整合的 hbv dna.

integrated DNA在cell line里面都有，为什么humanized mouse里面没有？只是frequency比较低罢了。

https://journals.asm.org/doi/full/10.1128/JVI.02007-17

StephenW

tim889 发表于 2022-9-22 04:17
integrated DNA在cell line里面都有，为什么humanized mouse里面没有？只是frequency比较低罢了。

http ...

您参考论文的标题是:
Hepatitis B Virus DNA Integration Occurs Early in the Viral Life Cycle in an In Vitro Infection Model via Sodium Taurocholate Cotransporting Polypeptide-Dependent Uptake of Enveloped Virus Particles
乙型肝炎病毒 DNA 整合发生在 体外 感染模型的病毒生命周期早期，通过牛磺胆酸钠协同转运多肽依赖性摄取包膜病毒颗粒

体外不是在体内!

为什么humanized mouse里面没有？只是frequency比较低罢了- 仅代表您的个人意见.

tim889

StephenW 发表于 2022-9-21 12:31
您参考论文的标题是:
Hepatitis B Virus DNA Integration Occurs Early in the Viral Life Cycle in an In ...

如果你说humanized mouse里面没有integrated DNA，请拿出证据。

我感觉你分不清什么是“仅代表您的个人意见”和“educated guess”。humanized mouse使用的是human hepatocytes, 而DNA integration event仅发生在HBV infect 了host cell以后，并且现在学界的认识是random event，跟in vitro in vivo没有关系。没有任何理由怀疑在体外可以integrate，但体内就不行。我觉得你还是极度缺乏科学训练的。

tim889

StephenW 发表于 2022-9-21 12:31
您参考论文的标题是:
Hepatitis B Virus DNA Integration Occurs Early in the Viral Life Cycle in an In ...

老爷爷 我怀疑你不在澳洲哦 半夜四点不睡觉来泡论坛？哈哈哈
两点到四点持续发帖？他要么不是70多岁的老年人，要么不在澳洲。

StephenW是个骗子，需要被揭穿。
StephenW is a fraud. He needs to be umasked.

StephenW

tim889 发表于 2022-9-22 02:47
问你横纵坐标坐标是啥，你告诉我横纵坐标 是 Horizontal and vertical coordinates？！显示你强大的翻译能 ...

"问你横纵坐标坐标是啥" - "横纵坐标" 不是 "Horizontal and vertical coordinates", 那么一定是你自己的发明或垃圾.

tim889

StephenW 发表于 2022-9-21 12:49
"问你横纵坐标坐标是啥" - "横纵坐标" 不是 "Horizontal and vertical coordinates", 那么一定是你自己的 ...

阅读障碍 还是老年痴呆？哈哈哈哈。

我让你看看图片里的横纵坐标是啥，你来告诉我"横纵坐标" 是 "Horizontal and vertical coordinates"。智障么？笑死我了

StephenW

tim889 发表于 2022-9-22 04:54
阅读障碍 还是老年痴呆？哈哈哈哈。

我让你看看图片里的横纵坐标是啥，你来告诉我"横纵坐标" 是 "Horizo ...

Transcription Index 是转录指数, 不是 横纵坐标.

tim889

StephenW 发表于 2022-9-21 13:01
Transcription Index 是转录指数, 不是 横纵坐标.

我的妈呀。你能不能别来搞笑了。哈哈哈

Transcription Index 是纵坐标啦。图都给你贴出来了，自己看嘛。笑死我了 哈哈哈