探索cccDNA形成分子机制，美研究人员开发，新型生化系统

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一、聚合酶抑制剂作用HBV原理

核苷类似物主要抑制的是HBV聚合酶，不直接影响cccDNA的活性。cccDNA，它在静止的肝细胞中十分稳定，攻克其高度稳定性也是慢乙肝研究热门课题之一。一般情况下，在聚合酶抑制剂应用之后，cccDNA水平也会明显下降，原因是细胞质中的HBVDNA合成受到了强烈地抑制，进而导致HBV的核衣壳向细胞核的再循环不足，从而从血液中传入的病毒较少。

二、对cccDNA生物发生的机制见解

即便如此，应用这种疗法（NA）来耗竭cccDNA也需要很多年时间。除此之外，如果病毒抑制不彻底，则可能出现抗病毒耐药变体，这种现象更主要发生在第一代NAs，拉米夫定或阿德福韦。在HEP DART 2021大会上，美国普林斯顿大学刘易斯·托马斯实验室研究人员带来了对乙型肝炎病毒 (HBV) cccDNA生物发生的机制见解。

研究人员介绍，乙肝病毒是一种嗜肝病毒，可感染人类和黑猩猩。估计全球有20亿人接触过HBV，其中2.50-4亿人为慢性感染者。每年约有 887,000 人死于与 HBV 相关的肝病。目前，慢性 HBV 感染无法治愈，患者需要终生接受抗病毒治疗。

HBV慢性化的根本原因是共价闭合环状DNA（cccDNA）的形成，它是通过修复病毒粒子传递到肝细胞的带有病变的HBV松弛环状DNA（rcDNA）而形成的。然而，目前对cccDNA形成的分子机制知之甚少。
三、新型生化开发意义

在大会上，刘易斯·托马斯实验室研究人员介绍已开发了一种新的生化系统，它可以在体外修复HBV rcDNA以形成cccDNA。研究人员使用这个生化系统，并检查了修复rcDNA的每个单独病变的分子机制。

之前已经确定了参与DNA滞后链合成的五种成分，它们在体外cccDNA中是必不可少的。研究人员现在已经确定修复rcDNA的正负链需要不同的因素。正链的修复需要所有五个因素，其修复类似于冈崎片段的成熟，而负链的修复只需要这五个因素中的两个。研究人员还发现靶向这些因子的抑制剂可以在体外和/或细胞培养中抑制cccDNA的形成。

综上所述，研究人员已经建立了一个生化系统，它可以用纯化的人类蛋白质完全重建cccDNA的形成。提供了体外rcDNA修复的机制见解和阻断cccDNA形成的潜在治疗方法。
四、科学界还需深入了解cccDNA来寻找阻断潜在疗法

小番健康结语：最近两年来，基因编辑技术应用于慢乙肝新药开发领域的潜力不断被科学家提及，这种潜力主要指能够直接靶向cccDNA，因此也称其为cccDNA抑制剂。要注意一点，即便是目前全球比较前沿的相关医药技术也只能够作为cccDNA抑制剂，而非cccDNA清除剂。

cccDNA在肝细胞核中高度稳定，科学界对cccDNA的形成分子机制以往知道得信息还很少，基于这一原因，本研究人员开发了这个新的生化系统，它是用来专门了解cccDNA形成的分子机制，以此来寻找阻断cccDNA形成潜在疗法。