旨在通过降低乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)来治疗慢性乙型肝炎的治疗方法需要将药物输送到受感染的肝细胞以传递疗效。S抗原转运抑制寡核苷酸聚合物(STOPSTM)可在体外环境测试中降低HBsAg，在临床阶段相较于结构相似的核酸聚合物(NAP)显示出20-100倍的增强效力。
基于核酸的治疗面临的挑战包括组织靶向，然而，N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)通过富含肝细胞的去唾液酸糖蛋白受体 (ASGPR)介导的递送已被证明可以将寡核苷酸靶向肝脏。在即将召开的2021美国肝病学会年会上，研究人员发表了GalNAc 修饰 STOPS 在小鼠和非人灵长类动物(NHP)中的组织水平，以及它们在体外3D肝脏系统中的抗病毒活性的研究结果。
为了评估STOP在小鼠和非人灵长类动物(NHP)的体内生物分布，在皮下给药24或48小时后选择特定组织，并使用LC-MS/MS分析浓度。使用HBV感染的3D肝芯片评估STOPS的抗病毒活性，每3天添加一次，持续30天。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg和人血清白蛋白水平。使用酶活性测定法测量丙氨酸转氨酶水平。
研究结果显示ALG-010000、ALG-010133 和 ALG-010159 在体外能有效地抑制乙型肝炎表面抗原的分泌，并在小鼠和非人灵长类动物(NHP)中显示出较高肝脏浓度。
出乎意料的是，ALG-010159与 GalNAc 直接结合的化合物表现出与 ALG-010159 相似的肝脏水平。
为了改善肝脏递送，在 GalNAc 和 ALG-010159 之间加入了接头，揭示了组织浓度对接头长度和稳定性的依赖性关系。ALG-010420、ALG-010159 通过优化的接头与 GalNAc 偶联，使小鼠肝脏浓度增加至 13150 ng/g，而 ALG-010159 为 4323 ng/g。当与 GalNAc 接头偶联时，观察到临床候选物 ALG-010133 的小鼠肝脏水平也有类似的3倍增加。
GalNAc-接头偶联还改善了 STOPS在非人灵长类动物(NHP)中的肝脏靶向。与未结合的 STOPS 相比，GalNAc 修饰的 STOPS 在未转染的情况下降低了 HBV 感染的 3D 肝芯片中的 HBsAg。
综上，具有优化接头设计的 GalNAc 缀合使小鼠和非人灵长类动物(NHP)肝脏中的 STOPS 浓度增加了 3 倍。此外，肝细胞递送与体外抗病毒活性相关。GalNAc 修饰 STOPS 的肝脏浓度和活性的提高表明患者的有效抗病毒剂量有可能会显著降低 | 
发表于 2021-11-3 10:03
