使用preS1-tp融合蛋白作为新型的载体，介导针对乙型肝炎病毒

StephenW

[Novel vector preS1-tp fusion protein effectively inhibits hepatitis B virus replication and cccDNA synthesis by mediating hepatitis B virus targeting sequence small interfering RNA]
[Article in Chinese]
Y L Zeng  1 , F Gao  1 , C Zhang  1 , J F Wei  1 , L Ma  1 , G G Ding  1 , W Li  1 , J Shang  1 , Y Kang  1
Affiliations
Affiliation

    1
    Department of Infectious Disease, Henan Provincial People's Hospital, People's Hospital of Zhengzhou University, Henan University People's Hospital, Zhengzhou 450003, China.

    PMID: 33685080 DOI: 10.3760/cma.j.cn501113-20190924-00353

Abstract in English, Chinese

目的： 使用preS1-tp融合蛋白作为新型的载体，介导针对乙型肝炎病毒（HBV）核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区的小干扰RNA(siRNA)进入感染HBV的肝细胞，从而抑制HBV复制和共价闭合环状DNA的形成。 方法： 以慢病毒感染系统为基础，建立表达人牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽的HepG2.2.15细胞；针对HBV NLS区设计合成siRNA；表达纯化preS1-tp融合蛋白，检测其进入细胞和与DNA结合的能力；以preS1-tp融合蛋白为载体，介导NLS siRNA递送至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞中,观察其对HBV复制和共价闭合环状DNA水平的影响。多组间比较采用方差分析，计量资料用t检验分析组间差异。 结果： 成功构建HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞株并合成筛选出显著抑制HBV复制的HBV NLS siRNA。纯化并大量表达preS1-tp融合蛋白，以该融合蛋白为载体靶向输送HBV NLS siRNA，结果显示，融合蛋白可以有效靶向输送siRNA至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞，不仅可有效抑制细胞中HBV mRNA，HBsAg和HBeAg表达，还能显著降低HBV DNA和共价闭合环状DNA的水平。 结论： preS1-tp融合蛋白利用preS1与肝细胞HBV受体结合，tp与核酸结合的双功能特点，将针对HBV NLS的siRNA靶向至感染HBV的靶细胞，靶向阻断rcDNA转运入细胞核，使siRNA发挥抑制HBV复制和共价闭合环状DNA合成的作用，为HBV感染所致慢性乙型肝炎治疗提供新策略，为彻底清除体内HBV提供新的研究视角。.

Keywords: Covalently closed circular DNA; HepG2.2.15; NLS siRNAs; NTCP; Recombinant preS1-tP proteins.

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