JOH丨替诺福韦基因型耐药和表型耐药首次获证，四位点突变

newchinabok

JOH丨替诺福韦基因型耐药和表型耐药首次获证，四位点突变跨越耐药屏障
原创： 国际肝病  国际肝病  今天


富马酸替诺福韦二吡呋酯（TDF）是强效低耐药的药物，临床应用十年尚未检测到针对性的基因型耐药及相关表型耐药。但从理论上说，由于病毒的持续存在和HBV基因组的异质性，出现病毒耐药突变是不可避免的。Journal of Hepatology杂志近日发表了韩国学者的一项研究，可能是首个有关TDF临床耐药和体外实验耐药的HBV突变报道。

一直认为，TDF为高耐药屏障药物。体外实验中，rtA194T突变可增加IC50，但在体内，该突变并不能引起替诺福韦耐药或部分耐药。还有其他一些相关报道，但均未见导致替诺福韦敏感性下降10倍以上的基因突变。然而，在接受TDF治疗的患者中，的确有少数患者尽管依从性良好但仍然应答不充分，并且部分患者出现了病毒学突破。因此研究者认为，上述患者体内可能存在针对替诺福韦的基因型耐药。



此次发表的这项研究前瞻性地纳入了2例在使用含TDF方案治疗期间出现病毒学突破的患者，对其HBV的逆转录酶（RT）基因进行测序。随后研究者通过定点突变构建了11个携带RT基因系列突变的HBV克隆，通过Southern印迹分析和实时PCR确定各个克隆对TDF的敏感性，并通过超深度测序和克隆分析评价突变株的相对频率。



这两例患者中，一例先后接受过拉米夫定单药→拉米夫定＋阿德福韦→拉米夫定＋TDF→恩替卡韦＋TDF治疗，每次更换治疗方案均因出现了病毒学突破，并先后检出了rtL180I、rtM204I和rtA181T突变。



另一例患者则先后接受了拉米夫定单药→恩替卡韦单药→阿德福韦＋拉米夫定→TDF＋替比夫定→TDF单药治疗，这名患者主要在当地私人诊所就诊，期间有过脱落，缺少过去的耐药检测数据。



两例患者的依从性通过每次复诊时的问诊、药品持有率（MPR）和血清TDF和恩替卡韦的谷浓度检测得到确认。从这2例患者体内分离得到的病毒株中，有5种突变普遍存在，包括rtS106C[C]、rtH126Y[Y]、rtD134E[E]、rtM204I/V和rtL269I[I]。突变C、Y和E是与耐药相关的新突变。



在药敏试验中，野生型HBV的IC50为3.8±0.6 μmol/L，而CYE和CYEI突变病毒的IC50分别为14.1±1.8  molL和58.1±0.9 μmol/L。野生型HBV的IC90为30±0.5 μmol/L，而CYE和CYEI突变病毒的IC90分别为185±0.5  molL和790±0.2 molL。也就是说，如果病毒出现四个位点的联合突变（CYEI），则抑制50%和90%的病毒所需的替诺福韦量分别要增加15.3倍和26.3倍。



超深度测序和/或克隆分析显示，CYEI突变在这两例患者中为优势株，验证了结果的临床意义。



另外，进一步分析显示，所有对TDF耐药的突变株对衣壳组装调节剂NVR3-778的敏感性野生型病毒相似，IC50分别为<0.4 μmol/L和0.4 μmol/L。



这说明，对替诺福韦耐药的病毒是可以出现的，只是这个耐药屏障很高，需要同时出现四个位点的突变。CYE三个位点突变降低替诺福韦的敏感性，而CYEI四个位点突变则可引起替诺福韦完全耐药。研究者认为，当前对于TDF耐药的乙型肝炎患者，并无有效的挽救治疗方案，TAF是否有效尚未得到验证。因此对多重耐药患者的治疗需格外谨慎。这也再次强调了新型药物开发的意义。

fuke

新药已经迫在眉睫，核衣壳急需上市

左罗

目前，药研机构及医疗方面似乎还没有应对这个问题的相应手段与措施。即便核衣壳尽快上市，是否就可以有效解决替诺（TDF、TAF）的耐药问题？

newchinabok

核衣壳抑制剂防耐药，降肝癌，我说了n遍，有的短浅的人认为核衣壳只不过和核苷一样抗病毒。核衣壳也有耐药，所以我常说抗病毒是单行道，最后结果不是挂了就是治愈了

9病成医

应该有升级版的抗乙肝病毒新药出现了。