康宁杰瑞/思路迪PD-L1抗体KN035-Fc研究报告

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康宁杰瑞/思路迪PD-L1抗体KN035-Fc研究报告

原创： Armstrong  生物制药小编  2017-03-27
首个PD-L1纳米抗体
本文介绍康宁杰瑞开发的PD-L1抗体KN035-Fc，该药物已经在前不久相继在中美获批临床。国际上，罗氏的PD-L1抗体AtezolizumabPD-L1已经在2016年获得FDA批准上市，用于治疗膀胱癌。默克/辉瑞的PD-L1抗体Avelumab已于2017年3月获得FDA批准上市，用于治疗皮肤癌。阿斯利康的PD-L1抗体Duvarlumab则处于临床后期阶段。

小编专文介绍KN035-Fc有两个原因，第一，该药物与前几个PD-L1抗体均有所不同，是一种纳米抗体-Fc融合蛋白，结构上具有明显的差异；第二，康宁杰瑞在专利与文献中均披露了较为详细的药学信息和临床前研究数据，这对于习惯炒作概念、谈数据则语焉不详的国内新药研发环境来说，实在是一股清流。说到底，新药的好坏、有无差异化特色，还是要看数据来说话。国内的新药研发，需要更多康宁杰瑞这样的实干派。


关于序列，康宁杰瑞在专利201510465481.8中的介绍，噬菌体库筛选后确认了56号纳米抗体，该序列与Cell Discovery的序列仅差一个氨基酸：123位。但康宁杰瑞在专利中对56号纳米抗体进行了人源化改造，并明确提到其中一个人源化Hu56V2-Fc即为KN035，而Hu56V2-Fc改变了十余个氨基酸，与Cell Discovery序列差别较大。小编分析可能康宁杰瑞在序列优化的时间和流程较长，在序列等方面出现了一些变化，因此出现一些矛盾。从时间来看，文献发表时间更晚近一点（专利申请时间为2015年11月，文献投稿时间为2016年11月），KN035的序列似乎更可能为Cell Discovery中披露的序列。但为什么不需要进行人源化，还不清楚。考虑到序列的矛盾，其IgG1 Fc也可能有序列突变的可能（采用强ADCC或弱ADCC，是两种不同的粗略），因此KN035-Fc的序列仍需期待进一步的公开信息以确认。

专利中披露的研发过程
在2017年2月15日公开的专利201510465481.8中，康宁杰瑞描述了PD-L1抗体KN035-Fc的详尽筛选流程。CHO表达重组PD-L-Fc，用PD-L1-Fc四次免疫新疆双峰驼，分离100ml外周血提取总RNA，反转录得到cDNA文库，然后克隆建立噬菌体展示文库，库容达1.33*108。

整个筛选过程基于ELISA，3-4轮PD-L1包被的ELISA筛选，共得到21株序列不同、可结合PD-L1的阳性克隆。将这21株克隆的基因进行重组表达，纯化得到21个纳米抗体。ELISA结合验证，得到8株阳性克隆。这8个纳米抗体，通过ELISA分析与PD-L1结合曲线，发现56号亲和力最强，IC50为143ng/ml。