在用重组AAV-HBV载体转导的小鼠中检测乙型肝炎病毒（HBV）共

StephenW

Antiviral Res. 2017 Jul 11. pii: S0166-3542(17)30407-2. doi: 10.1016/j.antiviral.2017.07.006. [Epub ahead of print]
Detection of the hepatitis B virus (HBV) covalently-closed-circular DNA (cccDNA) in mice transduced with a recombinant AAV-HBV vector.Lucifora J1, Salvetti A1, Marniquet X2, Mailly L3, Testoni B1, Fusil F4, Inchauspé A5, Michelet M1, Michel ML6, Levrero M1, Cortez P2, Baumert TF7, Cosset FL4, Challier C2, Zoulim F8, Durantel D9.
Author information
1INSERM, U1052, Cancer Research Center of Lyon (CRCL), Université de Lyon (UCBL1), CNRS UMR_5286, Centre Léon Bérard, Lyon, France.2Sanofi R&D, Infectious Disease Therapeutic Area, Marcy l'Etoile, France.3INSERM U1110, Institut de Recherche sur les Maladies Virales et Hépatiques, Université de Strasbourg, Strasbourg, France.4INSERM, U1111, International Center for Infectiology Research (CIRI), Team EVIR, Inserm, U1111, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR5308, Ecole Normale Supérieure de Lyon, Univ Lyon, F-69007, Lyon, France.5INSERM, U1052, Cancer Research Center of Lyon (CRCL), Université de Lyon (UCBL1), CNRS UMR_5286, Centre Léon Bérard, Lyon, France; Sanofi R&D, Infectious Disease Therapeutic Area, Marcy l'Etoile, France.6INSERM U994, Institut Pasteur, Paris, France.7INSERM U1110, Institut de Recherche sur les Maladies Virales et Hépatiques, Université de Strasbourg, Strasbourg, France; Institut Hospitalo-Universitaire, Pôle Hépato-digestif, Hôpitaux Universitaires de Strasbourg, Strasbourg, France.8INSERM, U1052, Cancer Research Center of Lyon (CRCL), Université de Lyon (UCBL1), CNRS UMR_5286, Centre Léon Bérard, Lyon, France; Hospices Civils de Lyon (HCL), Lyon, France; Institut Universitaire de France (IUF), Paris, France. Electronic address: [email protected].9INSERM, U1052, Cancer Research Center of Lyon (CRCL), Université de Lyon (UCBL1), CNRS UMR_5286, Centre Léon Bérard, Lyon, France. Electronic address: [email protected].

AbstractHepatitis B Virus (HBV) persists in infected hepatocytes as an episomal covalently-closed-circular DNA mini-chromosome, called cccDNA. As the main nuclear transcription template, HBV cccDNA is a key replication intermediate in the viral life cycle. Little is known about the mechanisms involved in its formation, maintenance and fate under antiviral therapies. This is mainly due to the lack of small immune-competent animal models able to recapitulate the entire HBV replication cycle, including formation of HBV cccDNA. Here we report that HBV cccDNA can be detected by Southern blot analyses in the liver of C57BL6 mice transduced with AAV-HBV. HBV cccDNA persists in the liver of these animals together with the AAV-HBV episome. We also set up a PCR strategy to distinguish the HBV cccDNA from the AAV-HBV episome. These suggest that the AAV-HBV/mouse model might be relevant to test drugs targeting HBV cccDNA regulation and persistence.

Copyright © 2017. Published by Elsevier B.V.

KEYWORDS: Adeno-associated virus; Hepatitis B virus; Immune-competent mouse; Immune-therapeutics; cccDNA

PMID:28709657DOI:10.1016/j.antiviral.2017.07.006

StephenW

抗病毒研究2017年7月11日。pii：S0166-3542（17）30407-2。 doi：10.1016 / j.antiviral.2017.07.006。 [提前印刷]
在用重组AAV-HBV载体转导的小鼠中检测乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）。
Lucifora J1，Salvetti A1，Marniquet X2，Mailly L3，Testoni B1，Fusil F4，InchauspéA5，Michelet M1，Michel ML6，Levrero M1，Cortez P2，Baumert TF7，Cosset FL4，Challier C2，Zoulim F8，Durantel D9。
作者信息

1
    INSERM，U1052，Lyon癌症研究中心（CRCL），里昂大学（UCBL1），CNRS UMR_5286，法国里昂中心LéonBérard。
2
    赛诺菲R＆D，传染病治疗领域，法国Marcy l'Etoile。
3
    INSERM U1110，Institut de Recherche sur les Maladies Virales etHépatiques，Universitéde Strasbourg，Strasbourg，France。
4
    INSERM，U1111，国际传染病研究中心（CIRI），团队EVIR，Inserm，U1111，大学Claude Bernard Lyon 1，CNRS，UMR5308，法国里昂法国里昂法国里昂法国里昂法国高等师范学院。
五
    INSERM，U1052，Lyon癌症研究中心（CRCL），里昂大学（UCBL1），CNRS UMR_5286，法国里昂LéonBérard中心;赛诺菲R＆D，传染病治疗领域，法国Marcy l'Etoile。
6
    INSERM U994，巴斯德研究所，巴黎，法国。
7
    INSERM U1110，Institut de Recherche sur les Maladies Virales etHépatiques，Universitéde Strasbourg，Strasbourg，France;法国斯特拉斯堡，法兰西大学法兰西体育学院医院大学。
8
    INSERM，U1052，Lyon癌症研究中心（CRCL），里昂大学（UCBL1），CNRS UMR_5286，法国里昂LéonBérard中心;里昂（HCL），法国里昂，法国大学法学院（IUF），法国巴黎。电子地址：[email protected]。
9
    INSERM，U1052，Lyon癌症研究中心（CRCL），里昂大学（UCBL1），CNRS UMR_5286，法国里昂中心LéonBérard。电子地址：[email protected]。

抽象

乙型肝炎病毒（HBV）作为附加型共价闭合循环DNA微染色体（称为cccDNA）在感染肝细胞中持续存在。作为主要的核转录模板，HBV cccDNA是病毒生命周期中的关键复制中间体。关于抗病毒治疗中其形成，维持和命运的机制知之甚少。这主要是由于缺乏能够重述整个HBV复制周期的小型免疫能力动物模型，包括HBV cccDNA的形成。在这里我们报告HBV cccDNA可以通过AAV-HBV转导的C57BL6小鼠的肝脏中的Southern印迹分析来检测。 HBV cccDNA与AAV-HBV附加组合一起在这些动物的肝脏中持续存在。我们还建立了一个PCR策略来区分HBV cccDNA与AAV-HBV的关系。这表明AAV-HBV /小鼠模型可能与靶向HBV cccDNA调节和持续性的药物相关。

版权所有©2017. Elsevier B.V.发行。
关键词：

腺相关病毒乙型肝炎病毒免疫能力小鼠免疫疗法; cccDNA的

结论：
    28709657
DOI：
    10.1016 / j.antiviral.2017.07.006