抗HBs免疫球蛋白和疫苗对HBs抗原血清清除对慢性乙型肝炎感

StephenW

J Gastroenterol. 2016 Nov;51(11):1073-1080. Epub  2016 Mar 4.
Antiviral effects of anti-HBs immunoglobulin and vaccine on HBs antigen seroclearance for chronic hepatitis B infection.Tsuge M1,2,3, Hiraga N1,3, Uchida T1,3, Kan H1,3, Miyaki E1,3, Masaki K1,3, Ono A1,3, Nakahara T1,3, Abe-Chayama H1,3, Zhang Y1,3, Naswa MG1,3, Kawaoka T1,3, Miki D1,3,4, Imamura M1,3, Kawakami Y1,3, Aikata H1,3, Ochi H1,3, Hayes CN1,3, Chayama K5,6,7.
Author information

• 1Department of Gastroenterology and Metabolism, Applied Life Science, Institute of Biomedical and Health Science, Hiroshima University, 1-2-3 Kasumi, Minami-ku, Hiroshima, 734-8551, Japan.
• 2Natural Science Center for Basic Research and Development, Hiroshima University, Hiroshima, Japan.
• 3Liver Research Project Center, Hiroshima University, Hiroshima, Japan.
• 4Laboratory for Liver Diseases, SNP Research Center, Institute of Physical and Chemical Research (RIKEN), Hiroshima, Japan.
• 5Department of Gastroenterology and Metabolism, Applied Life Science, Institute of Biomedical and Health Science, Hiroshima University, 1-2-3 Kasumi, Minami-ku, Hiroshima, 734-8551, Japan. [email protected].
• 6Liver Research Project Center, Hiroshima University, Hiroshima, Japan. [email protected].
• 7Laboratory for Liver Diseases, SNP Research Center, Institute of Physical and Chemical Research (RIKEN), Hiroshima, Japan. [email protected].
  

AbstractBACKGROUND AND AIMS: Interferon and nucleotide/nucleoside analogues are the main treatments for chronic hepatitis B. These drugs effectively reduce serum hepatitis B virus (HBV) DNA titers but fail to sufficiently reduce hepatitis B surface antigen (HBsAg) levels. Following the recent identification of sodium taurocholate cotransporting polypeptide as a receptor for HBV entry, inhibition of HBV entry has become an attractive therapeutic target for chronic hepatitis B treatment. We therefore evaluated the antiviral effects of antibody to HBsAg (anti-HBs) immunoglobulin (HBIG), which can inhibit HBV entry, by in an vivo study and a clinical trial.
METHODS: In the in vivo study, HBV-infected mice were generated from human hepatocyte chimeric mice and treated with HBIG. A clinical trial evaluating HBIG therapy in patients was also performed.
RESULTS: In the mouse study, HBV DNA titers were reduced and serum HBsAg titers decreased to undetectable levels following high-dose HBIG injection. On the basis of this result, eight chronic hepatitis B patients, who had received long-term nucleotide analogue treatment, were treated with monthly HBIG injections as an additional treatment. After 1 year of treatment, an HBsAg level reduction of more than 1 log IU/mL was observed in four patients, and three patients became anti-HBs positive. No adverse events occurred during HBIG therapy.
CONCLUSION: These results suggest that monthly HBIG injection might benefit patients with chronic hepatitis B whose HBsAg titer becomes lower following long-term nucleotide/nucleoside analogue treatment.


KEYWORDS: Anti-HBs immunoglobulin; Chronic hepatitis B; Hepatitis B surface antigen loss; Human hepatocyte chimeric mouse

PMID:26943168DOI:10.1007/s00535-016-1189-x

StephenW

J Gastroenterol。 2016 Nov; 51（11）：1073-1080。 2016年3月4日。
抗HBs免疫球蛋白和疫苗对HBs抗原血清清除对慢性乙型肝炎感染的抗病毒作用。
Tsuge M1,2,3，Hiraga N1,3，Uchida T1,3，Kan H1,3，Miyaki E1,3，Masaki K1,3，Ono A1,3，Nakahara T1,3，Abe-Chayama H1,3，Zhang Y1,3，Naswa MG1,3，Kawaoka T1,3，Miki D1,3,4，Imamura M1,3，Kawakami Y1,3，Aikata H1,3，Ochi H1,3，Hayes CN1,3，Chayama K5,6 ，7。
作者信息

    1广西大学生物医学与健康科学研究所应用生命科学消化内科与代谢部，1-2-3 Kasumi，Minami-ku，Hiroshima，734-8551。
    2自然科学中心的基础研究和发展，广岛大学，广岛，日本。
    3肝脏研究项目中心，广岛大学，广岛，日本。
    4肝脏疾病实验室，SNP研究中心，物理化学研究所（RIKEN），日本广岛。
    5日本广岛大学生物医学与健康科学研究所，应用生命科学，消化内科和代谢，消化内科与代谢，1-2-3 Kasumi，Minami-ku，Hiroshima，734-8551。 [email protected]。
    6肝脏研究项目中心，广岛大学，广岛，日本。 [email protected]。
    7肝病的实验室，SNP研究中心，物理化学研究所（RIKEN），日本广岛。 [email protected]。

抽象
背景和目的：

干扰素和核苷酸/核苷类似物是慢性乙型肝炎的主要治疗方法。这些药物有效降低血清乙型肝炎病毒（HBV）DNA滴度，但不能充分降低乙型肝炎表面抗原（HBsAg）水平。在最近鉴定牛磺胆酸钠共转运多肽作为HBV进入的受体之后，HBV进入的抑制已经成为慢性乙型肝炎治疗的有吸引力的治疗靶标。因此，我们通过体内研究和临床试验评估了抗体对HBsAg（抗HBs）免疫球蛋白（HBIG）的抗病毒作用，其可以抑制HBV进入。
方法：

在体内研究中，从人肝细胞嵌合小鼠产生HBV感染的小鼠并用HBIG处理。还进行了评估HBIG治疗患者的临床试验。
结果：

在小鼠研究中，在高剂量HBIG注射后，HBV DNA滴度降低，血清HBsAg滴度降低至不可检测的水平。基于该结果，8名接受长期核苷酸类似物治疗的慢性乙型肝炎患者用每月HBIG注射作为另外的治疗进行治疗。治疗1年后，在4名患者中观察到HBsAg水平降低超过1log IU / mL，3名患者变为抗HBs阳性。 HBIG治疗期间无不良事件发生。
结论：

这些结果表明，每月HBIG注射可能有益于慢性乙型肝炎患者的HBsAg滴度变得较低长期核苷酸/核苷类似物治疗。
关键词：

抗HBs免疫球蛋白;慢性乙型肝炎;乙型肝炎表面抗原损失;人肝细胞嵌合小鼠

PMID：
    26943168
DOI：
    10.1007 / s00535-016-1189-x

StephenW

Discussion
There  are  several  steps  in the  life  cycle of  HBV,  such  as
attachment  and  binding  to  hepatocytes,  endocytosis,  tran-
scription  of  several  HBV  RNAs,  replication  of  the  HBV
genome,  formation  of  viral  particles,  and  exocytosis,  but
recent   antiviral   therapies   for   chronic   hepatitis B   have
mainly targeted transcription of HBV RNA or replication
of the HBV genome. Although these antiviral therapies are
able to strongly suppress HBV replication, it is difficult to
reduce  HBsAg  levels  or  clear  cccDNA  from  the  nucleus
because  of  recycling  of  HBV  DNA  and  reinfection  of
hepatocytes with HBV particles. Therefore, we considered
that   protection   from   HBV   reinfection   could   reduce
cccDNA  and  HBsAg  production.  According  to  several
reports, HBIG can block HBV entry [24–28] and enhances
the response of T cells [29]. However, it is unclear whether
HBIG   can   decrease   viral   load   in   chronic   hepatitis B
patients.  To  clarify  this  issue,  we  performed  an  in  vivo
analysis  using  HBV-infected  human  hepatocyte  chimeric
mice  before  starting  a clinical  study. As  shown in Fig.1,
serum HBV DNA levels decreased significantly following
HBIG injection, and the reduction was enhanced in a dose-
dependent  manner.  Furthermore,  serum  HBsAg  also  tran-
siently decreased to an undetectable level 24 h after HBIG
injection  (data  not  shown).  According  to  these  results,  it
was considered that repetitive HBIG therapy could inhibit
HBV  reinfection  and  could  reduce  intracellular  cccDNA
and HBsAg production.
On  the  basis  of  the  in  vivo  analysis,  we  conducted  a
clinical  trial  involving  treatment  of  chronic  hepatitis B
patients with HBIG.  Because  it was considered to be dif-
ficult  to  obtain  adequate  results  with  patients  with  high
initial HBV DNA or HBsAg levels, the study focused only
on   chronic   hepatitis B   patients   undergoing   long-term
nucleotide  analogue  therapy  who  had  undetectable  HBV
DNA   levels   and   HBsAg   levels   less   than   500 IU/mL
(Table1).  After  more  than  1 year  of  HBIG  therapy,  a
greater than 1 log reduction of HBsAg levels was observed
in four of the eight patients, and two of these four patients
achieved  sustained  HBsAg  loss  and  were  able  to  discon-
tinue  antiviral  therapy  (Fig.4a,  b).  Although  the  clinical
trial  was  conducted  with  a  small  number  of  patients,  the
HBsAg level reduction rate was high, and 25 % of patients
achieved  HBsAg  loss.  Furthermore,  these  results  suggest
that  HBIG  therapy  might  be  a  trigger  for  HBsAg  level
reduction,  because  in  some  cases  HBsAg  levels  began  to
reduce  after  discontinuation  of  HBIG  therapy  (Fig.4c).
Considering  the  low  HBsAg  loss  rate  over  the  natural
course or during antiviral therapy (0.6–11 %) [30–35], the
HBsAg loss rate observed in this study appears quite high
and suggests that HBIG combination therapy might induce
additional  HBsAg  level  reduction  in  patients  with  low
HBsAg titers.
Furthermore,   several   interesting   characteristics   were
observed   in   the   two   most   successful   clinical   courses.
Although  anti-HBs  titers  gradually  decreased  after  dis-
continuation of antiviral therapy, they rebounded following
additional  hepatitis B  vaccination  (Fig.4a,  b).  Anti-HBs
levels  generally  do  not  increase  in  chronic  hepatitis B
patients  after  additional  hepatitis B  vaccination,  but these
two  patients  reliably responded  to the  additional  vaccina-
tion. The clinical results suggest that these patients might
have  been  able  to  successfully  eliminate  HBV  and  that
their immune responses to HBV were restored by the NA
and HBIG  combination therapy. However, transient  HBV
DNA   elevation   (2.1   log   copies   per   milliliter   or   less)
occurred  despite  HBsAg  loss  in  these  two  patients,  indi-
cating  that  HBV  cccDNA  still  remained  in  the  nuclei  of
hepatocytes.  Therefore,  it  is  important  to  maintain  anti-
HBs levels at a higher titer to prevent HBV recurrence.
According to the Japanese Prescribing Information, the
use  of  HBIG  in  HBsAg-positive  HBV  carriers  is  con-
traindicated  because  of  concern  about  acute  renal  failure
due  to  immune  complex  or  anaphylaxis  by  activation  of
immune complement. However, the use of HBIG in HBV
carriers is not contraindicated in other countries, and HBIG
can  be  used  safely  to  protect  against  HBV  reinfection  in
patients  who  underwent  liver  transplantation  for  HBV-re-
lated  liver  failure.  Furthermore,  Reed  et  al.  [23]  reported
that  no  severe  adverse  events  were  observed  in  six  HBV
carriers who received a high dose of HBIG. To verify the
safety of the present study, we closely monitored monthly
laboratory  data.  As  shown  in  Fig.3b,  serum  creatinine
levels did not increase during HBIG therapy, and no other
adverse  events  occurred.  Although  it  is  important  to  ana-
lyze a larger number of patients, these results suggest that
HBIG therapy for chronic hepatitis B patients can be per-
formed safely.
In conclusion, we demonstrated through both basic and
clinical studies that blocking HBV reinfection with HBIG
could promote reduction of HBV DNA and HBsAg levels.
This  study  provides evidence  that  additional  HBIG  injec-
tion  during  antiviral  therapy  could  be  a  useful  option  to
induce HBsAg loss, potentially leading to discontinuation
of long-term antiviral therapies.

StephenW

讨论
在HBV的生命周期中有几个步骤，如
附着和结合肝细胞，内吞作用，
几个HBV RNA的编码，HBV的复制
基因组，病毒颗粒的形成和胞吐，但是
最近的抗病毒治疗慢性乙型肝炎
主要靶向HBV RNA或复制的转录
的HBV基因组。虽然这些抗病毒治疗是
能够强烈抑制HBV复制，很难
降低HBsAg水平或从核中清除cccDNA
因为HBV DNA的再循环和再感染
肝细胞与HBV颗粒。因此，我们考虑
防止HBV再感染可以减少
cccDNA和HBsAg生产。根据几个
报道，HBIG可以阻止HBV进入[24-28]并增强
T细胞的反应[29]。然而，不清楚是否
HBIG可以减少慢性乙型肝炎的病毒载量
耐心。为了澄清这个问题，我们在体内进行了
分析使用HBV感染的人肝细胞嵌合体
小鼠开始临床研究。如图1所示，
血清HBV DNA水平显着下降
HBIG注射，并且减少在剂量 -
依赖方式。此外，血清HBsAg还
在HBIG后24 h显着降低至不可检测水平
注射（数据未显示）。根据这些结果，它
被认为重复的HBIG治疗可以抑制
HBV再感染，可以减少细胞内cccDNA
和HBsAg生产。
在体内分析的基础上，我们进行了a
涉及慢性乙型肝炎治疗的临床试验
HBIG患者。因为它被认为是dif-
难以与高的患者获得足够的结果
初始HBV DNA或HBsAg水平，研究仅集中
对慢性乙型肝炎患者进行长期治疗
具有不可检测的HBV的核苷酸类似物治疗
DNA水平和HBsAg水平低于500 IU / mL
（表格1）。经过1年以上的HBIG治疗，a
观察到大于1log的HBsAg水平降低
在八个患者中的四个，和这四个患者中的两个
实现了持续的HBsAg消耗，
tinue抗病毒治疗（图4a，b）。虽然临床
试验对少数患者进行
HBsAg水平降低率高，25％的患者
达到HBsAg消失。此外，这些结果表明
HBIG治疗可能是HBsAg水平的触发因素
减少，因为在一些情况下HBsAg水平开始
在停止HBIG治疗后减少（图4c）。
考虑到低HBsAg损失率超过自然
当然或在抗病毒治疗期间（0.6-11％）[30-35]，
在这项研究中观察到的HBsAg丢失率似乎相当高
并表明HBIG联合治疗可能诱导
额外HBsAg水平降低患者低
HBsAg滴度。
此外，几个有趣的特点
观察在两个最成功的临床课程。
虽然抗HBs滴度逐渐降低，
继续抗病毒治疗后，他们反弹
额外的乙型肝炎疫苗接种（图4a，b）。抗HBs
水平一般不会增加慢性乙型肝炎
患者再接种乙型肝炎疫苗后，但这些
两个患者可靠地响应额外的疫苗 -
。临床结果表明这些患者可能
已经能够成功地消除HBV
它们对HBV的免疫应答由NA恢复
和HBIG联合治疗。然而，短暂性HBV
DNA升高（2.1毫升拷贝每毫升或更少）
发生，尽管HBsAg损失在这两个病人，
说明HBV cccDNA仍然保留在细胞核中
肝细胞。因此，重要的是，
HBs水平在更高的滴度以防止HBV复发。
根据日本处方信息，
在HBsAg阳性HBV携带者中使用HBIG是
由于担心急性肾功能衰竭而被训练
由于免疫复合物或过敏反应的活化
免疫补体。然而，HBIG在HBV中的应用
携带者不在其他国家禁用，和HBIG
可以安全地使用以防止HBV再感染
患者接受肝移植HBV-
肝衰竭。此外，Reed等人[23]报道
在六个HBV中没有观察到严重的不良事件
接受高剂量HBIG的携带者。验证
安全性的本研究，我们密切监测每月
实验室数据。如图3b所示，血清肌酐
水平在HBIG治疗期间没有增加，没有其他
不良事件发生。虽然对ana-
冻结了更多的患者，这些结果表明
HBIG治疗慢性乙型肝炎患者，
安全形成。
总之，我们通过基本和
阻断HBV再感染HBIG的临床研究
可以促进HBV DNA和HBsAg水平的降低。
这项研究提供证据表明额外的HBIG注射 -
在抗病毒治疗期间可能是一个有用的选择
诱导HBsAg消失，可能导致停止
的长期抗病毒治疗。

styxl

美国一项研究表明，恩替卡韦联合乙肝高效价免疫球蛋白（HBIG）能有效抑制慢性乙型肝炎肝移植患者的HBV DNA，且耐受良好。(Liver Transpl 2013 Jun 21)【原文下载】

对于因HBV相关性肝脏疾病而采用肝移植（LT）治疗的患者而言，目前预防移植物再感染的标准疗法是核苷（酸）类似物联合乙肝高效价免疫球蛋白（HBIG）。恩替卡韦在慢性乙型肝炎（CHB）的治疗中已经显示出高度有效并具有良好的安全性，但是在HBV相关LT患者中的资料却是有限的。

美国贝勒大学医学中心Robert Perrillo等进行了一项研究，来评估恩替卡韦联合各种不同方案HBIG治疗CHB相关LT的安全性和疗效。

在本项Ⅲ b期、单组、开放式研究中，65例患者因HBV相关性肝病而接受LT并且LT时HBV DNA<172 IU/mL（大约1000 copies/mL），在移植以后接受了72周的恩替卡韦（1.0 mg/d）治疗。其中64例同时使用了HBIG，其中44%的患者接受了高剂量的HBIG（在特定的期限内每一次HBIG的剂量都超过10 000 IU）。

研究的主要终点是在整个72周研究期间，患者（治疗至少4周）出现病毒学复发（HBV DNA≥50 IU/mL，大约300 copies/mL）的比例。结果可作疗效分析评估的61例患者的HBV DNA都检测不出来。72周时没有HBsAg复发的患者累积比例是96.55%。有2例患者经历了HBsAg的再现，但是直到最后一次随访这2例患者的HBV DNA都一直未能检测出来。不良反应的频率和种类与该类患者人群中的预期相吻合。62%和39%的患者出现血清肌酐升高≥0.3 mg/dL和≥0.5 mg/dL，所有这些患者都接受了钙调磷酸酶抑制剂的治疗。

总之，在因HBV相关性疾病而行LT的患者人群中，即便发生过HBsAg再现，恩替卡韦仍能有效地持续抑制HBV，且耐受良好。

styxl

乙肝免疫球蛋白的副作用主要体现有以下几点：
1、乙肝免疫球蛋白可能导致乙肝病毒变异，产生乙肝病毒免疫逃逸株，给治疗和预防带来困难;此外如果该免疫逃逸株在人群中传播，现行的乙肝疫苗将无法预防，这是十分危险的。
2、引起婴幼儿接种疫苗失败，引起母肾的功能负担。
3、在肝移植患者中，静脉滴注乙肝免疫球蛋白有可能会发生恶心、皮疹、风疹、红斑、关节痛、注射局部疼痛、过敏，用抗组胺类药物和普通止痛药配合使用能有效控制以上症状。
4、接受高剂量静脉滴注乙肝免疫球蛋白的患者，血浆汞浓度升高会出现偏执、说话困难、双手震颤等症状，此外还应该警惕汞中毒。
5、乙肝患者注射乙肝免疫球蛋白，有可能在其体内形成乙肝病毒抗原-抗体免疫复合物，这种免疫复合物有可能晨起在乙肝病毒感染者体内的重要脏器中，引起免疫反映，导致乙肝并发症。

StephenW

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肝移植后, 研究表明恩替卡韦/替诺福韦可以替代HBIG.

上述来自日本的研究是非常令人振奋的消息! 希望HBIG也可以用单克隆HBsAg替代，便宜得多.

StephenW

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1.乙肝免疫球蛋白可能导致乙肝病毒变异

正确，甚至疫苗有这种可能性.用HBsAb作为治疗，有限疗程，低剂量. 变异病毒载量是很低，我相信.
5.乙肝病毒抗原-抗体免疫复合物引起肾的损伤
正确.
During HBIG treatment, no adverse events, including
exacerbation of hepatitis (Fig. 3a), renal dysfunction
(Fig. 3b), virological breakthrough, or gastrointestinal
symptoms, were observed in any patient.
在HBIG治疗期间，没有不良事件，包括
肝炎的恶化（图3a），肾功能障碍
（图3b），病毒学突破或胃肠道
症状，在任何患者中观察到。