CD4 CD25 regulatory T cells may modulate the immune response to hepatitis B v

medline

Circulating and liver resident CD4+CD25+ regulatory T cells actively influence the antiviral immune response and disease progression in patients with hepatitis B.

Xu D, Fu J, Jin L, Zhang H, Zhou C, Zou Z, Zhao JM, Zhang B, Shi M, Ding X, Tang Z, Fu YX, Wang FS.

Beijing Institute of Infectious Diseases, Beijing 302 Hospital, 100 Xi Si Huan Middle Road, Beijing 100039, China.

CD4+CD25+ regulatory T cells (Treg) have been shown to maintain immune tolerance against self and foreign Ags, but their role in persistent viral infection has not been well-defined. In this study, we investigated whether and where CD4+CD25+ Treg contribute to the development of chronic hepatitis B (CHB). One hundred twenty-one patients were enrolled, including 16 patients with acute hepatitis B, 76 with CHB, and 29 with chronic severe hepatitis B. We demonstrated that in chronic severe hepatitis B patients, the frequencies of CD4+CD25+ Treg in both PBMC and liver-infiltrating lymphocytes were significantly increased and there was a dramatic increase of FoxP3(+)-cell and inflammatory cell infiltration in the liver compared with healthy controls. In CHB patients, circulating CD4+CD25+ Treg frequency significantly correlates with serum viral load. In acute hepatitis B patients, circulating CD4+CD25+ Treg frequency was initially low and with time, the profile reversed to exhibit an increased number of circulating Treg in the convalescent phase and restored to normal levels upon resolution. In PBMC taken from infected patients, depletion of CD4+CD25+ Treg led to an increase of IFN-gamma production by HBV-Ag-stimulated PBMC. In addition, CD4+CD25+ Treg were capable of suppressing proliferation of autologous PBMC mediated by HBV Ags, which probably reflects the generation of HBV-Ag-specific Treg in circulation and in the liver of HBV-infected patients. Together, our findings suggest that CD4+CD25+ Treg play an active role not only in modulating effectors of immune response to HBV infection, but also in influencing the disease prognosis in patients with hepatitis B.


Faculty Member     Comments
David Adams
University of Birmingham, United Kingdom
GASTROENTEROLOGY & HEPATOLOGY

New Finding
    This study provides evidence that CD4(+)CD25(+) regulatory T cells (Treg) may modulate the immune response to hepatitis B virus (HBV) infection and influence disease progression. This has implications for understanding the persistence of chronic infection and for future vaccination strategies. The authors report an increase in circulating and liver-infiltrating functional Treg in patients with severe chronic HBV infection. Circulating CD4(+)CD25(+) Treg frequency correlated with serum viral load in chronic infection. In acute hepatitis B Treg frequency in blood was initially low but increased above normal in the convalescent phase.

Competing interests: None declared
Evaluated 7 Jul 2006

rts6666

为什么不翻译出来?大多数人都看不了,又有什么意义呢?版主这样做是什么意思呀?

IC

CD4⁺CD25⁺调节性T细胞和乙型肝炎免疫耐受特点的研究¹

 

解放军第三○二医院生物治疗研究中心  王福生²

 

HBV(hepatitis B virus)是一种嗜肝DNA病毒，它的感染虽然不直接引起肝细胞的破坏，但是可以导致慢性肝炎、肝硬化、肝癌。HBV感染的控制与特异CD8⁺ T细胞介导的细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T lymphocytes，CTL）反应和CD4⁺ T辅助细胞（Th）引起的免疫反应有关^[1，2]，成人感染HBV后有90％以上为急性自限性感染,并在感染恢复后产生保护性免疫，约有10％的成年感染者发展为慢性感染，而胎儿或幼儿期感染则绝大部分发展为慢性感染。在急性性乙型肝炎（AHB）患者体内可以发现多特异性的CTL和Th细胞反应，分泌IFN-γ和IL-2等I型细胞因子，这种多特异性的T细胞反应能够在临床恢复后维持多年。而在慢性乙型肝炎（CHB）患者体内则缺少这种多特异性的抗HBV反应。导致CHB患者免疫耐受或者较弱T细胞反应的精确机制尚不清楚。20世纪90年代中期发现表达IL-2受体α链（CD25）的CD4⁺T细胞亚群数量的减少和功能的缺陷往往导致自身免疫性疾病的发生，并且这一T细胞亚群通过抑制其它T细胞亚群尤其是CTL和Th1细胞反应在维持自身免疫耐受、肿瘤及感染性疾病中发挥重要作用。近年来研究发现，具有免疫抑制功能的Treg主要集中在高表达CD25的CD4⁺ T 细胞（即CD4⁺CD25^high Treg）中，约占正常人外周血CD4⁺T细胞的2 ~ 4％。Treg对IL-2、抗原及抗原提呈细胞的刺激呈低反应状态，经TCR活化后可以抑制CD4⁺和CD8⁺ T细胞的活化、增殖及其IL-2、IFN-γ细胞因子的分泌，在体外这种抑制是接触和细胞剂量依赖的，不依赖于IL-10和TGF-β，并且是抗原非特异性的。Stoop等和Franzese等均发现CHB患者外周血Treg可以抑制HBV特异性细胞免疫反应，但二人对CHB患者外周血Treg频率是否增高观察结果不一致，前者报告与正常对照相比有显著增高，后者则报告无显著差别。Rushbrook和Cabrera分别在慢性HCV感染者的肝脏原位发现Treg细胞的浸润，但目前尚未见到急性乙型肝炎发病过程中对Treg的观察报告以及HBV感染时对肝脏原位Treg浸润的观察报告。本研究观察了急慢性乙型肝炎和慢性重型肝炎（CHSB）患者外周血Treg频率和功能，以及肝脏原位Treg浸润特点， 我们的发现初步阐明了Treg细胞在乙肝免疫耐受过程中的作用和相关机制，为进一步探讨抗乙肝病毒的免疫治疗研究提供了科学依据。

在我们的研究中，入选病例为2004年8月至2005年8月解放军第302医院收治的临床确诊AHB患者16例，CHB患者76例，另有健康对照42例。诊断标准符合2000年9月全国第十次病毒性肝炎及肝病学术会议（西安）制定的标准。所有病例均排除其他肝炎病毒感染及合并自身免疫性、酒精性肝病等，未经任何免疫抑制剂治疗。

IC

通过流式细胞议进行表型研究发现Treg表面高表达CD45RO、HLA-DR和CD95，低表达CD45RA，细胞内高表达FoxP3和CTLA-4（图1c）。说明Treg属于记忆类T细胞，而HLA-DR作为MHCII类分子，则可能在T－T细胞间的相互作用包括抗原的提呈起到重要作用。FoxP3是控制Treg细胞的发育和功能的关键基因，被认为是特异的表达在Treg细胞。进一步通过RT-PCR 方法鉴定FoxP3 mRNA的表达，我们发现FoxP3 mRNA特异地表达在CD25⁺的Treg，而CD25^-细胞基本不表达（图1d），提示FoxP3可以作为鉴定Treg的一个特异性标志物。

我们观察到CSHB患者外周血CD4⁺CD25⁺ 调节性T细胞频率均显著高于健康对照和急慢性乙型肝炎患者（图2）， FoxP3的RT-PCR检测也支持CSHB患者外周血Treg数量增加（图1e）。在提取的LIL中也发现了CSHB患者Treg比例升高，肝脏原位免疫组化分析也证实在CSHB患者肝脏有大量的FoxP3⁺细胞浸润和CD4，CD8等炎症细胞浸润。这说明Treg在抑制肝脏免疫损伤中发挥了重要作用：CSHB患者由于严重的炎症反应，从而招募了大量的Treg细胞浸润，抑制过强的炎症反应，正常肝脏由于基本没有炎症损伤而没有Treg细胞浸润，而CHB患者的炎症反应弱于重型肝炎，Treg细胞的数量也较少。但是由于Treg在抑制炎症反应的同时，也抑制了针对HBV的病毒特异性免疫反应，从而可能成为病毒持续感染的一个重要因素。

我们发现慢性乙型肝炎患者的Treg频率高于健康对照组（图2），但是没有发现统计学差异，这与Franzese等人的发现一致。Stoop等研究发现Treg频率在HBeAg阳性患者明显高于HBeAg阴性患者，二者有统计学差异，说明在病毒复制活跃的CHB患者体内有更高的调节性T细胞比例。我们入组的CHB患者均为HBeAg阳性，故而我们进一步按照病毒载量高低和炎症程度（ALT）将CHB患者分组后发现，Treg频率在高病毒载量组明显高于低病毒载量组和健康对照，二者有统计学差异（P < 0.01），并且第一次发现Treg频率与病毒载量呈正相关（图4）。已经有研究表明Treg在HIV和HCV的感染慢性化中起重要作用。而在慢性HBV感染中也发现Treg可以抑制HBV特异性的T细胞增殖和CTL反应。结合我们的研究，说明Treg在HBV持续感染中可能发挥了重要作用。

rts6666

长

682256

CD4 CD25 控制T 细胞可调整传染性乙型肝炎病毒的免疫反应

肝脏中的CD4+CD25+ 控制T 细胞可激活免疫耐受的慢性活动性乙型肝炎病人

许D  副J  进L 张H  周C  找Z 张JM 是B 顶M 躺X 副Z 望FX

北京传染病研究所，北京302医院，西四环中路100号，100039 中国北京

、、、、下次再来。（论文是中国人写的，这是摘要部分）

IC

CD28在致命性自身免疫疾病中的作用 2007年05月16日 Blood. 2007 Apr 26; [Epub ahead of print]

医学空间（MEDcyber.com）5月16日消息，CD28在致命性自身免疫疾病中的作用。 Blood四月刊登了一项研究，Scurfy小鼠发生CD4 T细胞介导的淋巴细胞增生性疾病，后者会导致小鼠在四周龄内死亡。scurfy突变可以发生foxp3 基因(foxp3(sf))功能的丧失，后者在自然发生的调节性CD4 T细胞(nTregs)的发生以及维持中发挥重要作用。在人类Foxp3基因突变会导致X染色体连锁的先天免疫缺陷、多发性内分泌腺体病和小肠免疫性综合征(IPEX)；在大多数IPEX患者以及scurfy小鼠中，T细胞呈现高反应性，且Th1和Th2相关的细胞因子的水平显著升高。 美国乔治亚医学院免疫治疗中心Singh N等发现，在去除CD28表达后可以使scurfy小鼠避免早期死亡。长期CD28缺陷的scurfy小鼠仍然会发生淋巴细胞增生性疾病，但它们的CD4 T细胞显示IFN-gamma水平减低，且无IL-4和IL-10产生增多。此外，注射CTLA4-Ig以阻断CD28-B7相互作用可以通过抑制效应T细胞分化而显著改善scurfy小鼠的生存。 因此，设想CD28-B7相互作用在scurfy小鼠的致命性自身免疫性疾病的发病中发挥关键作用，这一作用可能是通过刺激抗原活化的T细胞分化为效应T细胞而完成的。

www.medcyber.com/news/news_detail.php?news_id=24060

IC

自身免疫性肝脏疾病研究进展

首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心 贾继东 http://ask.39.net/Topics/gblt/812969.xml -------------------------------------------------------------------------------- 第57届美国肝病研究学会(AASLD)年会于2006年10月26日至31日在美国波士顿召开,我国百余名肝脏病和传染病医师与来自世界各国共5000多名代表参加了此次国际肝脏病学盛会。和往年的会议一样,本次大会除了年会本身的学术交流外,还包括毕业后教育课程和肝移植课程等。大会给人突出的印象是**运作务实、简洁、高效;会议内容安排信息量大、学术水准高,会场视听效果很好;演讲者准备充分,幻灯片简洁明了,发言严格遵守时间,提问和讨论热烈且秩序井然;为避免商业展览对会议的影响,大会严格规定展览开放的时间。为及时传递大会信息,我们特别**了几位与会专家向读者介绍会议的主要内容。 自身免疫性肝炎(AIH,自免肝) 自身免疫性肝炎(AIH,自免肝)的发病率在西方国家相对较高。曾有报道美国阿拉斯加原居民的自免肝患病率较高(42.9例/10万),而美国CDC参与的一项回顾性研究显示,阿拉斯加原居民自免肝的患病率更高,为57.9例/10万;而且其发病率在90年代后逐渐上升,至最近10年达到平台期。 有几篇关于自免肝发生机制研究,主要涉及到调节性T细胞(T-Reg)和自然杀伤T细胞(NKT)。T-Reg具有免疫抑制功能,CD4+ CD25+ 细胞在大剂量IL-2 和 T-cell 扩展剂 (anti-CD3/anti-CD28)的刺激下可转化为T-Reg,自免肝病人的T-Reg在数目及功能方面均有缺陷。 英国学者Longhi等人发现,自免肝病人的外周血CD4+ CD25+ 细胞在体外可扩展为T-Reg,而且也有抑制功能,但其扩展能力和抑制功能较正常对照组为低。 日本学者发现T-Reg表面表达Toll样受体(TLR),自免肝在活动期主要表达TLR6, 而缓解期主要表达TLR2 、TLR4 和TLR8。提示这些TLR不同表达类型可能和自免肝发生机制有关。 日本学者发现自免肝患者外周血NKT的阳性率(44.4%)低于慢性丙肝患者(100%),而且维持NKT细胞活性的可溶性CD1d(sCD1d)分子的mRNA水平在自免肝患者中也低下;肝脏中无NKT细胞的自免肝患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)较高,其sCD1dl亦较低;而且sCD1d mRNA水平较低的自免肝患者的血清ALT和IgG水平较高。这项研究说明NKT细胞的缺陷是自免肝的发生机制之一。 美国Rochester大学Mantry 等报告,122例自免肝中有18例为急性肝炎(定义为ALT大于1000 U/L),占15%,仅有5.5%出现暴发性肝衰竭征象,大部分病人经过激素及硫唑嘌呤积极治疗得到缓解。英国学者Al-Chalabi等通过对1970-2005年的235 例自免肝病人进行回顾性分析发现,在最初发病时血清天冬氨酸氨基转移酶(AST) >10×ULN病人的肝脏炎症坏死重,但持续时间较短,而且发展为肝硬化的机会较小,长期预后较好。 德国Csepreg等回顾性地分析了肝脏首过效应明显的肾上腺皮质激素类药物布地奈德治疗52例自免肝病人的疗效, 给药方法为3 mg, 每日3次,随访至少6个月。结果显示74%病人达到完全生化缓解,14%病人达到部分生化缓解,总应答率为88%,仅6例病人治疗失败或病情加重。副作用主要见于有严重纤维化的病人。7例有治疗前后肝活检病人的肝脏**学均有改善。这一结果提示布地奈德可能是治疗自免肝的有效药物,但尚需进一步随机、双盲对照试验来确认其临床疗效。 美国Mayo医学院Montano-Loza等人报告了1型自免肝病人复发及目前治疗策略的效果。他们对102例(占77%)停药后复发患者及30例(占23%)持续缓解患者进行比较,结果发现,复发次数与不良临床转归密切相关(肝硬化、肝衰竭、死亡及肝移植)。重新用原方案治疗或小剂量维持治疗并不能真正改善预后,因此强调自免肝的治疗目标应为持续缓解。同一组研究者还报告了激素治疗的终点问题,他们发现复发组患者在治疗结束时的AST、γ球蛋白及IgG均比不复发组高。因此他们认为常规的临床生化指标是对肝**指标的一个补充,只有当肝**学缓解同时血生化也完全恢复正常的情况下,停药复发的风险才比较低。 原发性胆汁性肝硬化(PBC) 加拿大学者利用管理数据库(出院记录、医师账单和门诊就诊记录)回顾性地分析了加拿大Calgary 卫生服务区(人口近100万)在1996-2002年间新诊断的224例PBC病例,经计算得出性别和年龄调整的发病率为5.22例/10万人,其中女性为7.62例/10万;而且1999-2002年发病率比1996-1998年要高。 美国Aok等发现PBC患者及其一级亲属(女儿及姐妹)外周CD4+ CD25+ T-Reg细胞减少,认为T-Reg缺陷可能与PBC易感性有关。 Zein等回顾性分析了241例PBC患者,结果发现在发病时有乏力者较无乏力者生存期短,但是生存期和年龄、胆红素水平等已知的因素有关,因此尚不能完全肯定乏力和生存期的关系。日本学者在 276例肝**学证实的PBC患者中研究了抗-gp210 和抗-中心粒胞浆抗体与PBC进展的关系,结果发现抗-gp210和肝衰竭性的进展(肝衰竭死亡或肝移植)有关,而抗-中心粒胞浆抗体和非肝衰竭性的进展(静脉曲张、肝细胞癌、腹水但无黄疸)有关。 欧洲和美国学者在146例 参加甲氨蝶呤多中心临床试验的病人中验证了欧洲肝纤维化(ELF)指标的诊断价值,发现联合测定血清Ⅲ型前胶原肽、透明质酸和基质金属蛋白酶**抑制因子(TIMP1)对于发现中到重度肝纤维化很有帮助。 另一组美国学者也发现ELF等纤维化血清指标在预测将来的肝功能失代偿方面比肝**学、Mayo危险积分及胆红素水平更优越。 西班牙学者Gomez-Dominguez等在64例PBC患者中观察了用Fibroscan进行肝脏刚度测定诊断肝纤维化的价值,他们发现诊断F=Ⅱ和F=Ⅳ以上纤维化的准确性较高,其ROC曲线下面积分别为0.89和0.95。 美国学者通过对器官共享网络(UNOS)中PBC、原发性硬化性胆管炎(PSC)病人资料进行分析后,认为在1995-2004年,尽管肝移植病人数量上升了,因PSC而肝移植的人数无明显变化,但因PBC而做肝移植的病人数却下降了,这间接提示熊去氧胆酸治疗可能减少了PBC患者对肝移植的需求。 美国Mayo医学院Charatcharoenwitthaya对 52例因PBC肝移植后又复发病人再次给予熊去氧胆酸治疗,平均随访3年,治疗组中有52%的病人ALT和碱性磷酸酶(ALP)复常,而对照组仅为22%,说明该药对于肝移植术后复发PBC仍然有效。因参试者多为早期病变且观察时间较短,故未观察到对**学改善及死亡等长期指标的改善。 Modafinil是一种被批准用于治疗白天睡眠过多的药物,15例有白天睡眠过多PBC病人用Modafinil 100 mg/d,其疲劳明显改善。 原发性硬化性胆管炎(PSC) 德国学者Preus等建立了一种测定针对线粒体酶-亚硫酸盐氧化酶(sulfite oxidase)抗体的ELISA方法,并初步证明血清抗-亚硫酸盐氧化酶测定是诊断PSC较特异的抗体,在PBC及炎性肠病中均不呈阳性。 经典PSC常累及肝内和肝外胆管,而小胆管型PSC仅累及肝内小胆管。阿根廷学者Guma等在46例PSC中观察到9例为小胆管型PSC, 经随访后发现,小胆管型PSC病人中肝硬化、胆管癌及大胆管病变的发生率均较经典的PSC低。 英国学者Cholongita等经观察发现为术前溃疡性结肠炎严重者,肝移植术后PSC复发的危险性高。 加拿大学者Grover 进行了一项系统综述,通过对13项随机对照临床试验进行分析,认为阿片样受体拮抗剂和利福平治疗胆汁郁积性瘙痒有效,而以前认为是一线药物的胆酪胺却无效;口服阿片样受体拮抗剂的副作用较多。因研究数目和样本均小,判断瘙痒的标准也不尽相同,尚需更多设计良好的临床试验才能得出最终结论。

IC

Association of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ regulatory T cells with chronic activity and viral clearance in patients with hepatitis B

Guilin Yang^1,2, Ailian Liu¹, Qing Xie³, Taylor B. Guo¹, Bing Wan¹, Boping Zhou² and Jingwu Z. Zhang^1,4,5

¹ Joint Immunology Laboratory of Institute of Health Sciences and Shanghai Institute of Immunology, Shanghai Jiao-Tong University School of Medicine and Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai, China
² Shenzhen Municipal Hospital of Infectious Diseases, Shenzhen, China
³ Department of Infectious Diseases, Rui-Jin General Hospital, Shanghai, China
⁴ Immunology Divsion, E-Institutes of Shanghai Universities, China
⁵ Present address: Institute of Health Sciences, 225 South Chongqing Road, Shanghai 200025, China

Correspondence to: Correspondence to: J. Z. Zhang; E-mail: [email protected]

Chronic activity of hepatitis B is thought to involve aberrant immune tolerance of unknown mechanism. In this study, we examined the role of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ regulatory T cells in disease activity and viral clearance in hepatitis B. Patients with chronic active hepatitis B (CAH) and asymptomatic HBV carriers (AsC) exhibited a significantly high frequency of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T cells as opposed to that of controls and resolved HBV infection. These CD4⁺CD25⁺ T cells expressed an elevated level of Foxp3 and displayed increased inhibitory activity towards both CD4⁺CD25^– and CD8⁺ effector cells. They were found to accumulate in liver biopsy tissue of CAH patients as opposed to controls. The frequency of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T cells correlated positively with hepatitis B envelope (HBe) antigen status and serum HBV DNA copy numbers and had a converse relationship with HBe antibody status in patients with CAH and AsC. It was evident that in these patients, the increased frequency of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T cells was associated with serum levels of transforming growth factor-ß known to promote peripheral conversion of CD4⁺CD25^– T cells to CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ regulatory T cells. The findings provide new insights into the role of CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ regulatory T cells in chronic activity and viral clearance in chronic hepatitis B.

Keywords: CD4⁺CD25⁺ regulatory T cells, hepatitis B, TGF-ß, transcription factor Foxp3

Transmitting editor: C. J. Paige

臧敬五

IC

Mechanism of T cell hyporesponsiveness to HBcAg is associated with regulatory T cells in chronic hepatitis B

Tohoku University Graduate School of Medicine, 1-1 Seiryo-machi, Aoba-ku, Sendai 980-8575, Japan.

AIM: To study the mechanisms of hyporesponsiveness of HBV-specific CD4+ T cells by testing TH1 and TH2 commitment and regulatory T cells. METHODS: Nine patients with chronic hepatitis B were enrolled. Peripheral blood mononuclear cells were stimulated with HBcAg or HBsAg to evaluate their potential to commit to TH1 and TH2 differentiation. HBcAg-specific activity of regulatory T cells was evaluated by staining with antibodies to CD4, CD25, CTLA-4 and interleukin-10. The role of regulatory T cells was further assessed by treatment with anti-interleukin-10 antibody and depletion of CD4+CD25+ cells. RESULTS: Level of mRNAs for T-bet, IL-12R beta2 and IL-4 was significantly lower in the patients than in healthy subjects with HBcAg stimulation. Although populations of CD4+CD25highCTLA-4+ T cells were not different between the patients and healthy subjects, IL-10 secreting cells were found in CD4+ cells and CD4+CD25+ cells in the patients in response to HBcAg, and they were not found in cells which were stimulated with HBsAg. Addition of anti-IL-10 antibody recovered the amount of HBcAg-specific TH1 antibody compared with control antibody (P < 0.01, 0.34% +/- 0.12% vs 0.15% +/- 0.04%). Deletion of CD4+CD25+ T cells increased the amount of HBcAg-specific TH1 antibody when compared with lymphocytes reconstituted using regulatory T cells (P < 0.01, 0.03% +/- 0.02% vs 0.18% +/- 0.05%). CONCLUSION: The results indicate that the mechanism of T cell hyporesponsiveness to HBcAg includes activation of HBcAg-induced regulatory T cells in contrast to an increase in TH2-committed cells in response to HBsAg.

www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Retrieve&dopt=AbstractPlus&list_uids=16865771

[此贴子已经被作者于2007-5-29 4:10:19编辑过]