[转帖]抗乙肝转移因子去病毒工艺新视点

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日前从武汉海特生物制药股份有限公司
获悉，该公司与武汉大学医学院联合开展的“去除抗乙肝转移因子中病毒”的工
艺研究经过生产实践表明，超滤法是去除抗乙肝转移因子原液中猪细小病毒(PPV)
的一种简便有效的去病毒工艺技术，而且用滤液组分的相对分子量作为验证超滤
膜完整性的指标简单可靠。
　　随着生物制药技术的发展，许多动物组织和器官成为制药的原料。然而这些
原料都存在安全性问题，主要是动物源性病毒对原材料的污染或潜在污染，以及
在生产过程中其它病毒的污染。为了保证药品的安全性，在控制原材料质量的同
时，研究生产过程中去除或灭活病毒工艺，对药品的安全性起着十分重要的作用。
　　据了解，由于各种制品原料来源不同，其生产工艺、理化性质及生物活性也
不相同，因此，去除或灭活病毒的工艺也不相同。目前国内外常用的方法有巴氏
德消毒法、干热法、有机溶剂或去污剂法（S/D法）、膜过滤法、低pH值孵育法、
光化学法、辐照法和色谱法等。这些方法各有特点，而超滤法则是一种机械过滤
法，操作简单，重现性好，在国外已经得到应用，但超滤法去除病毒工艺在我国
还缺乏实验研究。
　　该公司技术部部长汤华东在北京接受记者采访时说，抗乙肝转移因子系从经
乙型肝炎疫苗免疫的猪淋巴和脾脏中提取的生物活性物质，因此，有潜在污染猪
源性病毒的可能，如PPV、伪狂犬病毒、口蹄疫病毒等。这些猪源性病毒对温度、
pH值等因素敏感性不尽相同，其中PPV为ssDNA病毒，无包膜，直径20~23纳米，
是这几种病毒中最小的病毒，也是目前已知的最小动物病毒之一，对热有一定耐
受性。根据这几种病毒的大小及特征，他们利用美国Pall公司截留相对分子质量
为5000的超滤膜，在进压0.14兆帕、回流压0.07兆帕和进压0.2兆帕、回流压0.1
兆帕的条件下，对去除抗乙肝转移因子原液中具有代表性的直径为20～23纳米、
耐热的PPV的效果和超滤膜的清洗方法、超滤膜的完整性检查方法进行了研究。
结果表明，在抗乙肝转移因子原液中加入1/9体积病毒滴度为7.4LgTCID50/毫升
的PPV，经超滤后，滤过液中未检测到PPV，经盲传3代，亦未发现特异性细胞病
变。滤过液中各组分相对分子质量均小于10000，表明超滤膜完整。
　　研究证实，超滤法可有效去除PPV，且改变超滤压力及循环次数对结果无影
响。由于PPV粒子小于其它病毒，因此在该条件下，超滤法理论上可以去除其它
比PPV大的病毒。
　　该公司质保部部长欧阳怡还指出，超滤法去除病毒工艺中很重要的因素是滤
膜完整性及膜残留病毒的清洗效果。研究中，用0.4摩尔/升的氢氧化钠溶液循环
清洗超滤膜并使其保留10小时，可灭活残留在膜中的病毒；研究人员同时采用测
定滤过液组分相对分子质量的方法验证了膜的完整性，3批供试品相对分子质量
均小于5800，表明超滤膜完整，结果可靠。研究者对该公司56批样品进行回顾性
验证，凡滤过液组分相对分子质量符合要求、超滤膜完整的产品，病毒检定结果
均为阴性，表明用滤过液组分相对分子质量作为监测膜完整性的指标简单可靠。

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