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肝胆相照论坛 论坛 乙肝科普 存档 1 PCR原理(FLASH)
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PCR原理(FLASH) [复制链接]

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发表于 2005-8-17 03:40

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发表于 2005-8-17 03:51

名词解释;(以上FLASH许多专有名词翻译与大陆不同)

聚合酵素连锁反应:聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR),是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。

DNA聚合酵素:DNA聚合酶,DNA双链分子复制时必须的生物酶。

引子:引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增

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发表于 2005-8-18 06:15
基于我的智商,我要多看几遍
因为懂得,所以慈悲
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发表于 2005-8-18 14:03
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发表于 2005-8-19 10:45
太过专业,我也看不懂。
为中医复兴而努力!

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发表于 2005-8-20 00:29

PCR原理通俗解

PCR原理就是在很短时间内把一个文件复印100万份d 的 高效复印过程。这个过程需要一台高效自动复印机(DNA聚合酶),油墨和纸张(四种核苷酸)和被复印的文件(需要扩增的DNA片断)。

首先,要在众多文件中找到复印的文件,这就需要一个“引物”。这个引物是根据这个文件已知的部分特征人工设计的。他能识别这个文件,就像用磁铁在沙子中吸铁屑一样,与之相互吸引。

然后,这些文件很特别,需要高温(95度)才能打开[DNA双链解旋成单链],这时“引物”才能开始识别,接着再降温到60度使“引物”吸引到特定文件上,再升温到72度,高效自动复印机开始复制文件[核苷酸片断以单链为母版按碱基互补原责延着引物向下延伸],然后再降温到35度完成一轮复印。这是文件已经是双份。

以后,随着温度的上升下降,不断重复以上过程,每次复制的结果都是下此复制的底版。反复循环几十次文件按1‘2’4‘8’16翻倍很快就能复制百万份。

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发表于 2005-8-21 21:36

看了这个原理,我相信,PCR能知道病毒的复制能力是没有科学依据的,复制了亿万,然后再检测某一值,且不说在复制过程中的化学反映(肯定有其他的新物质的产生),已经把病毒量放大了亿万次了,

伪科学啊,

一颗和平的心可以幸福一生 一颗愤怒的心可以毁灭世界 http://www.hbvhbv.com/forum/dispbbs.asp?BoardID=1004&ID=328385 http://www.hbvhbv.com/forum/dispbbs.asp?BoardID=1004&ID=395536

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发表于 2006-2-10 13:23
以下是引用cosmart在2005-8-21 8:35:52的发言:

看了这个原理,我相信,PCR能知道病毒的复制能力是没有科学依据的,复制了亿万,然后再检测某一值,且不说在复制过程中的化学反映(肯定有其他的新物质的产生),已经把病毒量放大了亿万次了,

伪科

建议学学分子生物学在说
学医八年, 乙肝四年! 愿意和大家分享快乐和经验!

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发表于 2006-2-15 04:39
以下是引用cosmart在2005-8-21 8:35:52的发言:

看了这个原理,我相信,PCR能知道病毒的复制能力是没有科学依据的,复制了亿万,然后再检测某一值,且不说在复制过程中的化学反映(肯定有其他的新物质的产生),已经把病毒量放大了亿万次了,

伪科学啊,

PCR只是一种方法,由于病毒量在被检物中含量较小,用常规的方法很难直接检测到,所以采用体外扩增的方法,把微小的病毒量扩增到可以检测到的水平,然后再计算出原始的拷贝数。

呵呵,伪科学倒不是。只是由于这个过程要求比较高,也容易受到污染,所以计算出来的结果常常误差比较大,所以一般认为在2个log之内,认为是结果没有明显变化。

而且理论上可以精确到一个靶病毒,但是目前还做不到,所以一般实验室的最高精度也就在E02,随着技术的不断发展,相信精度会越来越高,“不幸”的是以前一些HBVDNA阴性的患者,会变成“阳性或弱阳性”。

PCR技术应用只会越来越广泛,尤其在检测病毒方面,除非有更新的技术取代。

比我有才的都没我帅,比我帅的都没我有才!
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