AASLD2014: GS9620在抗病毒反应的Toll样受体7激动剂

StephenW

1873The Antiviral Response to the Toll-Like Receptor 7 Agonist GS-9620 in Preclinical Models of Chronic Hepatitis B is Associated with an Intrahepatic Cytotoxic T Cell Transcriptional SignatureLi Li1, Peng Yue1, Robert E. Lanford2, Stephan Menne3, Congrong Niu1, Stephane Daffis1, Daniel Tumas1, Abigail Fosdick1, William E. Delaney1, Simon P. Fletcher1;1Gilead Sceinces, Foster City, CA; 2Department of Virology and Immunology, Texas Biomedical Research Institute, San Antonio, TX; 3Department of Microbiology & Immunology, Georgetown University Medical Center, Washington DC, DC
Background & Aims: GS-9620, an oral agonist of toll-like receptor 7 (TLR7), is in phase 2 studies for the treatment of chronic hepatitis B (CHB). In earlier preclinical studies, GS-9620 induced prolonged suppression of serum viral DNA and antigens in the chimpanzee and woodchuck models of CHB. Here we present a follow-up transcriptional analysis of liver biopsy samples from these animal model studies in order to define the intrahepatic cellular and molecular characteristics of the antiviral response to GS-9620 in vivo.
Methods: Whole transcriptome analysis of liver biopsies taken from chronically infected chimpanzees (n=3) and woodchucks (n=7) during treatment with GS-9620 or placebo (woodchuck study only, n=7) was performed by RNA-Seq. Intrahepatic transcriptional responses were characterized by gene set enrichment analysis (GSEA), Ingenuity Pathway Analysis (IPA) and a gene module approach. Results: GS-9620 induced a broad intrahepatic immune response in HBV-infected chimpanzees, with type I interferon (IFN), T cell and B cell gene signatures prominently up-regulated. Notably, the transcriptional signature induced by GS-9620 was significantly enriched with genes induced during HBV clearance in acutely infected chimpanzees (Wieland et al. (2004) PNAS 101: 6669-74). Underscoring the parallels with natural clearance of acute infection, the HBsAg reduction by GS-9620 in HBV-infected chimpanzees was associated with up-regulation of intrahepatic CD8+ T cell and cytotoxic cell gene signatures, as well as B cell and plasma cell tran-scriptional profiles. Notably, the elevated expression of cyto-toxic cell-associated genes (e.g. perforin, granzyme B and Fas ligand) was accompanied by significant induction of transcrip-tional signatures consistent with hepatocyte apoptosis (e.g. caspase 3 and caspase 7), as well as hepatocyte regeneration and proliferation (e.g. cell cycle regulatory genes). Importantly, GS-9620 also induced an intrahepatic cytotoxic T cell gene signature in chronically infected woodchucks, suggesting this is a key mechanism of antiviral response to GS-9620 in both chimpanzee and woodchuck models of CHB. Likewise, the induction of intrahepatic interferon-stimulated gene (ISG) expression suggests that antiviral ISGs may also play a role in GS-9620 treatment response in these animal models.
Conclusion: These data indicate that the antiviral response induced by GS-9620 in preclinical models of CHB was likely mediated, at least in part, by the cytolytic activity of CD8+ T cells. Induction of a strong intrahepatic B cell response may also have played an important role in HBsAg antigen seroconversion.
Disclosures:
Li Li - Employment: Gilead Sciences Peng Yue - Employment: Gilead Sciences
Robert E. Lanford - Grant/Research Support: Arrowhead Research
Stephan Menne - Advisory Committees or Review Panels: Hoffman-La Roche; Consulting: Northeastern Wildlife Inc.; Grant/Research Support: Hoffmann-La Roche
Congrong Niu - Employment: Gilead Science Stephane Daffis - Employment: Gilead Sciences Daniel Tumas - Employment: Gilead Sciences, Inc
Abigail Fosdick - Employment: Gilead Sciences
William E. Delaney - Employment: Gilead Sciences; Patent Held/Filed: Gilead Sciences; Stock Shareholder: Gilead Sciences
Simon P. Fletcher - Employment: Gilead Sciences; Stock Shareholder: Gilead Sciences

StephenW

在抗病毒反应的Toll样受体7激动剂GS-9620在慢性乙型肝炎的临床前模型的关联与肝内细胞毒性T细胞的转录签名
李莉，彭悦1，罗伯特·E·Lanford2，斯蒂芬Menne3，从容Niu1，斯特凡Daffis1，丹尼尔Tumas1，阿比盖尔Fosdick1，威廉E Delaney1，西蒙体育Fletcher1;
1Gilead Sceinces，福斯特城，CA;教研室病毒学与免疫学，得克萨斯生物医学研究所，圣安东尼奥，德克萨斯州;微生物学与免疫学，乔治敦大学医学中心，美国华盛顿特区的3Department

背景与目的：GS-9620，Toll样受体7（TLR7）的口服激动剂，是在第二阶段的研究慢性乙型肝炎（CHB）的治疗。在早期的临床前研究，GS-9620引起的​​血清病毒DNA和抗原慢性乙型肝炎的黑猩猩和土拨鼠模式长期抑制。这里我们提出了从这些动物模型研究肝活检样品的后续转录分析，以便确定在体内GS-9620的抗病毒反应的肝内细胞和分子特性。方法：慢性感染的黑猩猩采取肝活检（N=3），土拨鼠的全转录组分析（N=7）在与GS-9620或安慰剂治疗（土拨鼠研究只，N=7）进行了RNA测序。肝内转录反应的特点是基因组富集分析（GSEA），独创性途径分析（IPA）和基因模块的方法。结果：GS-9620诱导HBV感染的黑猩猩的广泛肝内的免疫反应，与I型干扰素（IFN），T细胞和B细胞的基因特征显着上调。值得注意的是，转录签名诱导GS-9620是显著带中的HBV间隙在急性感染黑猩猩诱导的基因（：6669-74威兰等人（2004）美国国家科学院院刊101）富集。强调与急性感染的自然间隙的相似之处，在HBV感染的黑猩猩的乙肝表面抗原减少由GS-9620与上调肝内CD8 + T细胞和细胞毒性细胞的基因标记，以及B细胞和浆细胞TRAN-scriptional相关配置文件。值得注意的是，升高的表达的CYTO毒性细胞相关的基因（例如穿孔素，粒酶B和Fas配体）是伴随着显著诱导transcrip-周志武签名与肝细胞凋亡（例如，胱天蛋白酶3和胱天蛋白酶7）相一致，以及肝细胞再生和增殖（例如，细胞周期调控基因）。重要的是，GS-9620还诱发慢性感染的土拨鼠的肝内细胞毒性T细胞的基因标记，表明这是慢性乙肝两黑猩猩和土拨鼠车型GS-9620的抗病毒反应的关键机制。同样，肝内干扰素刺激的基因（ISG）表达的诱导表明，抗病毒的ISG也可起到在这些动物模型GS-9620治疗的反应的作用。结论：这些数据表明，在慢性乙型肝炎的临床前模型中由GS-9620诱导的抗病毒反应中可能介导的，至少部分地由CD8 + T细胞的细胞溶解活性。诱导肝内强的B细胞应答的可能也起到了HBsAg的抗原血清学转换的重要角色。

披露：

李锂 - 就业：Gilead Sciences公司彭迂厄 - 就业：Gilead Sciences公司

罗伯特·兰福德 - 格兰特/研究支持：慈姑研究

斯蒂芬Menne - 咨询委员会或审查小组：霍夫曼 - 罗氏;咨询：东北野生动物公司;格兰特/研究支持：罗氏

从戎牛 - 就业：吉利德科学斯特凡Daffis - 就业：吉利德科学丹尼尔Tumas - 就业：吉利德科学公司

阿比盖尔福斯迪克 - 就业：Gilead Sciences公司

威廉·德莱尼 - 就业：Gilead Sciences公司;专利已挂起/归档：Gilead Sciences公司;股股东：Gilead Sciences公司

西蒙·P.弗莱彻 - 就业：Gilead Sciences公司;股股东：Gilead Sciences公司

lgs1

看不懂

也许明年能有进一步的报告

是否有可能根治呢？

最起码要求能停药

肝肠欲断

不大懂！但祝贺一下，毕竟有人在重视

newchinabok

aasld开会要详论toll理论的

newchinabok

arc520的口号和目标是功能性治愈，可是hbsag打针就抑制，停药就反弹，这不是功能性治愈，而是功能性不愈，而gs9620你的目标是产生抗体？还是增加免疫功能清除hbsag或cccdna？总要有临床试验目标，何为成功？何为失败？

StephenW

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arc520的口号和目标是功能性治愈，可是hbsag打针就抑制，停药就反弹，

arc520的目标是:打针抑制hbsag, 抑制为一个有限的时间周期（一个或多个注射）停药.  HSAG水平会降低一段时间, 那么我们的免疫系统会重新建立，清除乙肝病毒.

gs9620你的目标是产生抗体？还是增加免疫功能清除hbsag或cccdna？总要有临床试验目标，何为成功？何为失败？
gs9620的目标是诱导免疫系统清除乙肝病毒.

功能性治愈: 不使用任何药物, HBsAg-ve, HBsAb+ve. cccDNA可能不会全部消失.

newchinabok

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解释很好，谢谢你，arc520，gs9620，莫非赛定算有个盼头，否则一片漆黑，自己给自己希望，自己给自己鼓励

rocgao

看来吉利德还是以最稳妥的方式推进HBV治疗。可能最近被rep9ac，数家rnai技术等新治疗手段宣传的功能性治愈所影响，现在好像大家每每关心一个药物就是是否能功能性治愈或根治。随着以hbsag为标靶的药物疗效逐渐公布疗效不如预期（rep9ac迅速降低表抗到检测线以下，但迟迟不能激发人体免疫反应；arc520单剂量2mg/kg，只实现51%表抗降低，多计量毒性是药品研发方十分担心的，估计不容易长期持续使用），也让我们产生疑问：核衣壳抑制剂（国内1家，国外1家在研）即使抑制病毒有效，真的能够激起我们的免疫反应吗？
回过头来看看gs9620，让我不禁佩服起吉利德的战略。gs9620类似于inf-a（干扰素），可以激起肝内CD8 + T细胞免疫反应及B细胞反应。吉利德以gs9620为新一代抗hbv药物突破口之一，有干扰素实际药理作用和药效在哪摆着，可以最大降低药物研发风险。同样，对于我们战友来说，就是有最大的可能看到gs9620的成功。
相较于肌注干扰素，gs9620为口服药，全身性不良反应降低（可以实现更高计量从而实现更加的效果）。如果说功能性治愈，按目前药物来说干扰素应该是唯一的能实现功能性治愈的药物，原因就在于治愈原理是通过激发人体免疫实现。缺憾是治愈率是实在太低了。我们有理由相信gs9620可以有更广泛的适用性和更高的治愈率指标。但是，50%？在我个人看来是个奢望。
这里吐槽一下吉利德，都已经做临床2期了，却把之前临床前动物研究结果搬出来，不知何故？况且，其模型还不是人源化动物模型，和人类治疗是不具有可比性的。
写出来和大家分享一下，但知识有限，还望大家勿喷啊。
插句无聊的话，王震宇言语刻薄，思维极度敏捷全面却又独具角度，看问题角度深刻，得罪了不少战友。我见证了无数嘴仗。以我这个旁观者角度考虑，他除了具有极其丰富的治疗经验（可能拉米西斯不被接受，但稀释hbsag测量并用于指导治疗，不算最早也至少算最早之一了吧？至少是最早分享给我们战友让我们学习和获得启示了吧），之前他对arc520等药效预测现在仍令我记忆尤新。斯蒂芬给了无数战友信心和期望，王震宇泼水至少不会让我们对期望产生太大失望。咱战友最怕生气，伤肝啊！保持平常心吧！感谢斯蒂芬、小伍、newchinabok 、王震宇等人对战友的默默奉献。

咬牙硬挺

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