乙肝病毒大蛋白反式激活作用与临床意义

过河不湿

何谓反式激活
        所谓反式激活是指病毒或细胞基因编码的蛋白质对基因转录的激活作用该蛋白质称反式激活因子（transactivator）.反式激活不仅是基因转录激活的重要方式也是1984年以来提出的一种病毒致癌新模式

                                                 乙型肝炎病毒大蛋白（LHBs）的反式激活作用
        乙肝病毒感染可引起急性肝炎，也是引发肝细胞癌(HCC)的主要致病因素。鉴于此， 很多研究集中于发现其潜在的病毒癌基因产物。目前确认HBV至少可编码二个转录激活因子，HBx蛋白和LHBs蛋白（Nature 癌基因2003 22，2604-2610）都可诱导c-Raf-1/MEK激酶级联通路的激活，其中HBx蛋白是通过不依赖于PKC和依赖Ras的机制介导的，而LHBs的激活为PKC依赖性，不需要Ras的参与。在转染的HepG2细胞中选择性破坏LHBs-或HBx-的特异性激活，并未导致病毒的生成显著性减少。应用反式主要负调节物c-Raf-1-或MEK-特异性抑制剂，阻断二种激活因子共有的信号步骤，可同时抑制LHBs-和HBx-依赖性激活，导致HBV基因的表达的终止。在病毒生活周期中激活蛋白因子功能有重要性，鉴于激活c-Raf-1 /MEK信号级联的LHBs和HBx 可互相取代。c-Raf-1 /MEK信号级联的完整性对于病毒的复制是必须的。因此有研究提出可以尝试是否抑制c-Raf-1 /MEK 可以作为未来抗病毒的靶点。
      LHBs反式激活作用与病毒复制具有密切的关系，以鸭乙型肝炎为模型，研究发现亚病毒颗粒能显著增强细胞内的病毒复制和基因表达。该效应对感染滴度、病毒粒子与亚病毒颗粒的比例以及亚病毒颗粒加入的时间具有依赖性，更重要的是亚病毒颗粒的pre-S蛋白能触发该增强效应，数据表明这种增强作用由pre-S蛋白的反式激活功能所活化的信号转导所引发。它们显示含HBV的血清感染性不仅仅依赖于感染性病毒粒子的数量，还与不含核酸的粒子的数目息息相关，特别是与LHBs上的pre-S相关。这个研究具有重要的临床意义，对于临床治疗后期患者血液中HBV DNA阴性（或低载量）但是LHBs残留的预后具有指导意义。国内成军、张伟等其他研究者也证实了HBV前S区不同片段所表达的蛋白拥有自激活功能。这些研究有助于我们对乙型肝炎病毒感染过程中相对病毒粒子数量大量过量的亚病毒颗粒的生物学功能的了解。

                                                   乙型肝炎病毒大蛋白（LHBs）对肝细胞直接毒性和致癌性
       毛玻璃样肝细胞，是人类慢性乙型肝炎的特征性改变，早在90年代，Chisari和Fernandes等已经证实，在转基因小鼠中过量表达乙型肝炎病毒大蛋白（LHBs）会使导致转基因老鼠中毛玻璃样肝细胞（ground glass hepatocytes）的产生，并且发展为细胞的损伤作用，它会诱导肝的再生，在这个模型中最终导致肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC），目前认为HCC的发展是由体内LHBs连续的过表达造成的持续煽动过程所引发。因为LHBs的过表达导致一些控制细胞增殖的激酶的活化(PKC, c-Raf-1 kinase)，这些酶的连续活化可能与肝癌的发生具一定的相关性。在其中，感染的细胞不能或来不及通过细胞分泌途径来外运管状颗粒，直接导致细胞的病变效应,表现为细胞内大量LHBs的存在，在转基因老鼠模型上还能看到肝细胞癌的产生。  
对于乙型肝炎病毒大蛋白（LHBs）对肝细胞直接毒性作用，国际上近年也有新发现:  
乙肝肝损伤通常认为是由免疫反应所介导的.，而非通过病毒或病毒成分本身所致。新的研究却发现LHBs对于肝细胞具有直接毒性，是导致肝细胞损伤的主要原因。该研究以急性肝病纤维淤胆性肝炎(FCH)肝细胞损伤为模型，它发生于严重的免疫抑制病人中，FCH状态下的肝脏的主要特征是肝细胞产生广泛性的液泡化和细胞凋亡，gee-Chih Foo等的研究发现LHBs是形成FCH的直接原因，LHBs致使肝细胞凋亡而快速死亡，这些细胞在死亡前的胞质中有明显的液泡化。国内林旭等的研究也显示：LHBs蛋白同样可导致HepG2细胞(肝胚细胞瘤细胞)及Chang肝细胞(永生化肝细胞)空泡化及凋亡，对肝细胞致病性具有普遍性。


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