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标题: 关于荧光PCR检测法对乙肝病毒检测的疑问 [打印本页]

作者: zhaomien2008 时间: 2012-9-4 12:09 标题: 关于荧光PCR检测法对乙肝病毒检测的疑问

请问荧光PCR法检测的是血液中完整乙肝病毒颗粒中的DNA吗？或者只是血液中裸露的乙肝DNA？

请专业的指点下啊

。

作者: StephenW 时间: 2012-9-4 12:26

本帖最后由 StephenW 于 2012-9-4 12:26 编辑

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是血液中完整乙肝病毒颗粒中的DNA - 表面外套除去后,dna提取.
或者只是血液中裸露的乙肝DNA？- 感染的肝细胞不释放病毒dna到血液中, 感染的肝细胞释放病毒颗粒到血液中。

作者: zhaomien2008 时间: 2012-9-4 19:12

谢谢StephenW 的解答，

弱弱的问下乙肝病毒颗粒表面外套大概用什么技术除去？

作者: StephenW 时间: 2012-9-4 20:24

本帖最后由 StephenW 于 2012-9-4 20:24 编辑

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I don't know. Here is one method:我不知道。这里有个方法：
Extraction of the DNA. DNA的提取。

In phase 1, laboratory 1 treated 200 μl of the plasma samples with 300 μl of lysis buffer (2.5 mg of proteinase K per ml, 1% sodium dodecyl sulfate in 0.13 M NaCl, 0.015 Tris-HCl [pH 8.0]) for 4 h at 56°C, extracted this lysate with phenol-chloroform, and precipitated the DNA with ethanol.
在阶段1中，实验1200微升的血浆样品处理4小时，用300μl的裂解缓冲液（2.5毫克每毫升的蛋白酶K，1％十二烷基硫酸钠在0.13 M氯化钠，0.015的Tris-HCl[pH为8.0]）在56℃下，用苯酚 - 氯仿提取此溶胞产物，并用乙醇沉淀DNA。

作者: bigben446 时间: 2012-9-4 20:48

zhaomien2008 发表于 2012-9-4 19:12
谢谢StephenW 的解答，
弱弱的问下乙肝病毒颗粒表面外套大概用什么技术除去？ ...

完整病毒颗粒，没有HBV的DNA会释放到血液中的报道。
方法很多，碱裂法、酶解法、热变性等等。

作者: zhaomien2008 时间: 2012-9-5 12:03

多谢两位的解疑

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